考马斯亮蓝G-250染色法测定草乌中可溶性蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对草乌药材中可溶性蛋白质含量进行了测定,建立了快速、灵敏的测定蛋白质的方法.结果表明,考马斯亮蓝G-250染色法简单、迅速,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法.

荧光光谱法和分子模拟技术研究考马斯亮蓝G-250与牛血清白蛋白的相互作用

采用多种光谱技术结合圆二色谱技术研究了考马斯亮蓝G-250(CBBG-250)相互作用于牛血清白蛋白(BSA),探究了两者之间的作用机理。荧光光谱结果表明BSA与CBBG-250结合形式是静态猝灭,随CBBG-250浓度增加,其形成常数随温度逐渐减小,结合比为1∶1,根据Stern-Volmer曲线计算焓变值(ΔH)和熵变值(ΔS)分别为-4.38kJ·mol^(-1)和-6.16J·mol^(-1)·K^(-1),均小于零,证明该过程是一个自发过程。傅里叶红外光谱测定结果表明CBBG-250的加入引起BSA结构的变化,随着CBBG-250溶液浓度的增加,BSA中色氨酸微环境极性被改变,在1 600~1 700cm^(-1)(酰胺带Ⅰ)和1 600~1 500cm^(-1)(酰胺带Ⅱ)处的特征吸收带蓝移。其中1 650cm^(-1)移动至1 710cm^(-1),1 544cm^(-1)移动到1 573cm^(-1),显示BSAα-螺旋(1 650~1 658cm^(-1))和β-折叠(1 620~1 640cm^(-1),1 675cm^(-1))结构发生变化,且α-螺旋含量比结合前有所降低。圆二色谱分析结果表明,两者间通过氢键和范德华力为主的作用力使得BSA二级结构发生变化,α-螺旋含量由42.15%下降至1.27%,该结果进一步被分子建模对接技术证明。

考马斯亮蓝G-250染色法测定柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白含量

目的:建立快速、灵敏的蛋白质含量测定方法,对柠条锦鸡儿种子中可溶性蛋白质含量进行测定;方法:运用超声与研磨两种方法提取柠条锦鸡儿种子中的可溶性蛋白,采用考马斯亮蓝G-250染色法对其进行测定;结果:超声提取与研磨提取得到可溶性蛋白含量分别为6.91%、6.87%,RSD分别为0.72%0,.67%;结论:考马斯亮蓝G-250染色法简单、迅速,且两种方法提取的蛋白质含量差别不大。

考马斯亮蓝G-250染液配制过程中变色机理的初步研究

磷酸、乙醇、考马斯亮蓝G-250是配制考马斯亮蓝G-250染液的重要组成成分，本实验研究了各组分在考马斯亮蓝染色液中的作用，考察了组分不同添加顺序及不同浓度对其灵敏度的影响，结合200—800nm全波长扫描光谱法初步分析了染液配制过程中溶液颜色的变色机理。结果表明，乙醇是用来提供极性环境，促进考马斯亮蓝G-250的溶解；磷酸是为考马斯亮监G-250表面电荷发生变化的促进剂；两者构成了影响变色灵敏度的主要因素，CBBG-250显色剂在反应体系中呈现出从蓝色-绿色-棕红色等多种颜色变化，主要是由考马斯亮蓝G-250分子间疏水相互作用形成的聚合体聚集程度的不同所引起的。

考马斯亮蓝G-250法快速测定牛乳中的蛋白质

依据考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合呈现蓝色,在595nm波长下的吸光度与蛋白质含量呈正比,制作出标准曲线。研究了最佳实验条件,成功地建立一个牛乳中蛋白质快速测定的方法,具有简单、快捷、易行等特点。结果表明该方法精密度高,RSD为1.70%,结果准确,相对误差较小,回收率98.2%￣100.3%。

白葡萄酒中蛋白质含量的测定——考马斯亮蓝G-250法

蛋白质以及它的化合物是葡萄酒中的重要成份之一，在酒中它和多肽类参与了产品感观特性和物理特性的构成，但白葡萄酒中过多的蛋白质，会引起葡萄酒的混浊和沉淀。因此在研究和解决葡萄酒的蛋白稳定性问题时，蛋白质的定量测定是很重要的方面。而目前多测定粗蛋白含量，即...

次氯酸钠脱色考马斯亮蓝G-250废液的优化研究

本研究利用次氯酸钠对测蛋白试验废水考马斯亮蓝G-250废液进行脱色处理,利用响应面法优化了次氯酸钠溶液的投加量、废液的pH值和反应时间对考马斯亮蓝G-250废液脱色率的影响.结果表明:次氯酸钠法氧化降解考马斯亮蓝G-250废液的最佳条件为,10 mL的废液里次氯酸钠投加量为10μL,反应时间为15 min,pH为4.77,此条件下废液脱色率达92.55%.研究结果为次氯酸钠脱色处理实验室考马斯亮蓝G-250废液提供参考.

考马斯亮蓝G-250染色法测定苜蓿中可溶性蛋白含量

蛋白质的存在,会影响到酸碱测定中所用的某些指示剂的颜色变化,从而会改变染料的光吸收。因此在此基础上发展了蛋白质的染色测定方法,所涉及的指示剂目前最为广泛使用的染料就是考马斯亮蓝。该文分析了考马斯亮蓝G-250染色法,测定苜蓿中的可溶性蛋白含量。

响应面法优化Fenton试剂脱色考马斯亮蓝G-250废液

研究使用响应面法优化Fenton试剂脱色考马斯亮蓝G-250废液.探究pH、H2O2和FeSO4溶液浓度三个单因素对G-250废液褪色率的影响.在单因素实验的基础之上,响应面法优化G-250废液脱色条件.结果表明,Fenton试剂脱色考马斯亮蓝废液G-250的最佳优化条件为:20 mL G-250废液体系中,H2O2投加量为60μL,FeSO4投加浓度为1.5 g/L,pH值为4,该条件下G-250废液褪色率为95.93%.光谱扫描结果表明褪色的废液中含有大量具有苯环结构的分子.实验验证结果为实验室考马斯亮蓝G-250废液的脱色提供了实验依据.

一种改良的蛋白质电泳考马斯亮蓝G-250染色方法

目的建立一种简便、低毒的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法。方法电泳后的凝胶经短暂固定后,用含氨基磺酸的考马斯亮蓝G-250溶液染色,无需脱色。结果该方法灵敏度高于经典考马斯亮蓝R-250染色方法,并去除了常规染色和脱色液中有毒的甲醇等溶剂。结论改良方法具有灵敏度高、染色背景浅、节省染料、直接显色无需脱色及配方安全低毒等优点。

响应面法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制

试验研究了各组分磷酸、乙醇、考马斯亮蓝G-250在考马斯亮蓝G-250溶液中的作用及其对测定蛋白质浓度灵敏度和准确度的影响,结合全波长扫描光谱法分析了溶液配制过程中的变色机理。在此基础上,以一系列牛血清白蛋白溶液标准浓度和测定值之间的差值平方和的均方(S值)为响应值,采用单因素试验和响应面分析法优化考马斯亮蓝G-250溶液的配制条件。结果表明,乙醇是用来降低水溶液的极性环境,促进考马斯亮蓝G-250的溶解;磷酸是为考马斯亮蓝G-250表面电荷发生变化的促进剂;两者构成了影响变色灵敏度的主要因素,考马斯亮蓝G-250分子在溶液中不同的存在形式使反应体系呈现出从蓝色→绿色→棕红色等颜色变化;响应面优化配制条件为:60 mg/L考马斯亮蓝G-250、50 mL/L 95%乙醇、130 mL/L 85%磷酸时,S值最小值为2.07,即在此配制条件下的牛血清白蛋白测定值与标准值最接近。同时以不同标准蛋白质为试样对所配制的溶液进行准确度和灵敏度试验,结果表明对牛血红蛋白、γ-球蛋白测定准确度和灵敏度较好,对胰蛋白酶、胃蛋白酶灵敏度较差,主要原因是由于蛋白质组成差异所引起的。

考马斯亮蓝G-250与牛血清白蛋白的相互作用研究

利用紫外-可见光谱、傅里叶变红外光谱、圆二色谱和分子建模技术研究了考马斯亮蓝G-250与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。紫外-可见光谱测定结果表明,随BSA的浓度的增加,以1:1形成复合物,在不同温度条件下,结合形成常数值分别为5.03×104、3.04×104、2.84×104和1.99×104 L/mol,随温度升高而减小,整个反应过程是焓、熵联合驱动自发进行,热力学焓变(ΔH)和熵变(ΔS)分别为-45.3229 k J/mol和-139.1847 J/(K·mol),说明分子间作用力以氢键和范德华力为主;采用傅里叶红外技术研究了作用前后BSA中α-螺旋特征酰胺带(I和II)的变化,结果表明酰胺带I由1650 cm-1移动到1710 cm-1,酰胺带II从1544 cm-1移动到1573 cm-1,α-螺旋结构降低;圆二色谱测定结果和分子对接技术进一步验证了BSA结构的变化,α-螺旋含量由42.15%下降至1.27%。

一种考马斯亮蓝G-250快速染色法在SDS-PAGE中的应用

对SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中一种仅加入3m mol/L盐酸的考马斯亮蓝G-250染色液配合微波加热的快速染色方法的具体条件进行了研究。该方法能在1h内完成,比常规考马斯亮蓝R-250染色法短得多。同时未加入有机溶剂和其他酸,对人体几乎无害,对环境污染小。而其灵敏度与常规考马斯亮蓝R-250染色法相近,适于在实验教学和科研方面进行推广应用。

考马斯亮蓝G250染色法测定啤酒中蛋白质含量

以啤酒为原料,利用蛋白质与考马斯亮蓝显色原理,测定啤酒中蛋白质含量,并对测定条件进行优化研究,实验结果表明:波长在595nm处蛋白质有最大吸收峰,反应时间3～5min为最适宜,SDS对马斯亮蓝测定蛋白质含量有干扰。测定所用的标准曲线方程为:y=0.1296x+0.0907。考马斯亮蓝G-250法测量蛋白质含量与凯氏定氮法相比较误差范围3%～8%。

一种简便的考马斯亮蓝G250蛋白质染色方法

介绍一种快速、简便、几乎无背景的考马斯亮蓝G2 5 0 (CBBG2 5 0 )染色方法 .该方法所用试剂仅为稀盐酸和CBBG2 5 0 ,CBBG2 5 0的工作浓度为 0 0 0 15 % ,灵敏度达 0 0 2 μg/带 ,染色 2h达 70 % ,4h以上或染色过夜即可充分染色 .与以往的考马斯亮蓝染色方法相比 ,该方法有经济方便、灵敏度高、几乎无背景等优点 。

用鲁米诺-过氧化氢-铜(Ⅱ)-考马斯亮蓝G250体系反相流动注射化学发光法测定铜(Ⅱ)

建立了一种Luminol-H2O2－Cu（Ⅱ）-考马斯亮蓝G250反相流动注射化学发光分析新方法，线性范围0．005－0．100mg/LCu（Ⅱ），检出限为0．0015mg/LCu（Ⅱ），对0．050mg／LCu（Ⅱ）溶液进行10次平行测定，其相对标准偏差为3．6％，干扰离子允许量大。该方法灵敏度、精密度和选择性好，直接用于江河水样中微量Cu（Ⅱ）的测定，取得了满意的结果。

溴酸钾氧化考马斯亮蓝G250反应的催化动力学光度法测定痕量钒和亚硝酸根

建立了溴酸钾氧化考马斯亮蓝G250反应的催化动力学分光光度测定痕量钒和亚硝酸根的新方法。研究了在磷酸介质及抗坏血酸活化条件下，钒（V）强烈的催化溴酸钾氧化考马斯亮蓝G250的褪色反应，该催化反应可用于钒的测定，线性范围是0～0．4ng／mL，检出限是5．2×10^-11g／mL，催化反应的表观活化能为192．2kJ／mol，表观速率常数为3．02×10^-3s^-1，用于水样中痕量钒的测定；同一指示反应在不同的温度下，亚硝酸根也具有很高的催化活性，据此可用于亚硝酸根的测定，线性范围是0～0．4μg／mL，检出限是9．4×10^-8g／mL，催化反应的表观活化能为26．7kJ／mol，表观速率常数为1．17×10^-3s^-1，用于硝酸盐试剂中痕量亚硝酸根的测定。

考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量的教学实践及方法学探讨

该文研究之目的:考马斯亮蓝G250法测定蛋白质含量是生物化学实验教学的基本实验之一。为了更好地开展实验教学,对实际教学中发现的该方法组间稳定性及线性相关性存在的问题进行研究和探讨。之方法:在对问题出现原因进行解析的基础上,对影响实验稳定性的因素和线性范围进行了实验研究。之结果:发现该方法的显色稳定时间为60min,线性范围为1.0-30.0μg/mL。之结论:将研究成果引入实验教学,将有利于学生对于实验原理的理解,并消除学生对组间实验结果差异大的疑虑,提高实验教学效果。

考马斯亮兰G-250法测定苹果浓缩汁生产中的蛋白含量

考马斯亮兰G 250法(Bradford法)是目前灵敏度最高的蛋白质测定法。将其用于检测果汁中的蛋白,研究发现,苹果 汁中的几种主要成分,如:果糖、葡萄糖、蔗糖和苹果酸等不会对测定造成干扰,其最大吸收波长不变,标准曲线的线性较 好。并对苹果浓缩汁生产中不同工序物料中的蛋白含量进行测定,测定结果的精密度较好,加标回收率在97.76%～103.20% 之间。

考马斯亮蓝G250光度法测定水样中阳离子表面活性剂

在pH3．60的HCl-NaOAc缓冲介质中，考马斯亮蓝G250（CBBG）溶液与阳离子表面活性剂（CS）反应，形成离子缔合物，溶液颜色发生明显改变，最大褪色波长分别在584nm（CBBG-CTMAB体系）和582nm（CBBG-CPB体系）处，在此波长处阳离子表面活性剂的浓度与褪色程度呈良好线性关系，从而建立测定阳离子表面活性剂的光度法．在最大褪色波长处，CS的浓度在0-1．97×10^-5mol／L（CTMAB体系）、0～2．31×10^-5mol／L（CPB体系）范围内遵守比尔定律，表观摩尔吸光系数为1．64×10^4L／（mol·cm）（CTMAB体系）和1．31×10^4L／（mol·cm）（CPB体系），检出限为8．03×10^-7mol／L（CTMAB体系）和1．02×10^-6mol／L（CPB体系）．方法具有较高的灵敏度和良好的选择性，用于水样中CS的测定，结果满意．