不同体外诱导物对T细胞疫苗诱导免疫耐受作用的影响

目的 :探讨不同的疫苗细胞体外诱导物对 T细胞疫苗 ( TVC)诱导免疫耐受作用的影响 ,方法 :用 L OU /C大鼠脾细胞免疫 BN大鼠 ,取免疫过的 BN大鼠脾细胞进行淋巴细胞转化实验 ,计算刺激指数 ( SI) ,比较 Con A和PHA两种诱导物对 T细胞的诱导增殖作用 ;用被 L OU/C大鼠抗原活化的 BN大鼠脾细胞作为疫苗细胞 ,在体外经Con A诱导增殖后灭活制备 TCV1、经 PH诱导增殖后灭活制备 TCV2 ,用制备的 T细胞疫苗分别免疫正常的 BN大鼠 ,于免疫后进行单向混合淋巴细胞反应 ( ML R) ,计算抑制率。结果 :淋巴细胞转化实验 :Con A的 SI为 2 1.4 2 ,显著高于 PHA的 SI( 4 .93) ( P<0 .0 1) ;ML R:TCV1免疫组抑制率为 87.75 % ,TCV2免疫组抑制率为 34.6 6 % ,与 TCV1免疫组比较 P<0 .0 1。结论 :用 Con A诱导的疫苗细胞制备的 T细胞疫苗 ,可以显著抑制被免疫大鼠脾细胞的免疫应答能力 ,体外诱导物的诱导增殖作用越大 ,所制备的

霉酚酸酯对树突状细胞抗原递呈功能的影响和诱导同种移植免疫耐受作用

目的观察霉酚酸酯对体外培养的树突状细胞(DC)前体(DCp)的成熟过程和同种免疫刺激活性的影响作用,评价预先用霉酚酸酯处理的供者DC在诱导同种移植物受者免疫耐受中的作用,并阐述可能的机制。方法(1)在骨髓来源的DCp培养过程中加入粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM CSF)和霉酚酸酯,用流式细胞术方法进行免疫表型分析,ELISA方法检测其白细胞介素(IL)12的分泌,并作混合淋巴细胞反应以观察其对同种T细胞的刺激能力。(2)24只C57/BL6小鼠被随机分成3组,每组8只,A组C57/BL6受者接受BalB/c小鼠供者心脏进行异位移植,B组C57/BL6受者在移植前7d注射未经处理的BalB/c供者DCp后进行异位移植,C组C57/BL6受者在移植前7d注射经霉酚酸酯处理的BalB/c供者DCp后进行异位移植,观察受鼠移植心脏的存活时间以及血清中细胞因子的变化。结果霉酚酸酯显著抑制了外源刺激下DCp的成熟过程,抑制其表面共刺激分子(CD80、CD86)的表达,降低IL12的分泌并显著抑制其同种T细胞激活能力(P<0.01)。接受未成熟DCp回输的受者移植心脏组(组B、组C)存活期显著长于单纯移植组(组A),而以霉酚酸酯处理的未成熟DCp(组C)可使移植物的存活时间得到进一步的延长,并且显著抑制了TH1细胞因子的产生。结论霉酚酸酯对DCp的成熟和功能有着显著的抑制作用,并能?

可溶性组织相容白细胞抗原诱导自然杀伤细胞和T细胞耐受作用的研究

目的 探讨可溶性组织相容性白细胞抗原 (HLA G1)对自然杀伤细胞 (NK)、T细胞的致耐作用。方法 借助基因工程技术构建表达可溶性HLA G1的真核表达质粒 ;把重组质粒转染入宿主细胞LCL72 1.2 2 1,表达可溶性HLA G1并借助免疫亲和层析技术纯化可溶性HLA G1蛋白 ;探讨可溶性HLA G1分子对NK细胞杀伤活性的影响 ,对混合淋巴细胞培养中T细胞增殖的影响 ,对活化T细胞凋亡的影响。结果 可溶性HLA G1能够有效抑制NK细胞的杀伤活性 ;能够抑制混合淋巴细胞培养中T细胞的增殖 ;能够促进活化T细胞发生凋亡。可溶性HLA G1对NK、T细胞的上述作用无HLA限制性。结论 可溶性HLA G1为一种免疫致耐分子。

小鼠对大黄泻下作用产生耐受性与肠道蒽醌变化关系的量-时-效关系研究

目的:研究小鼠对大黄泻下作用产生耐受性与的给药剂量、时间与方法的关系,以及大黄泻下作用的耐受性与肠道结合型和游离型蒽醌比值变化的关系,为临床合理运用大黄提供依据。方法:以大黄致小鼠泻下作用的ED95为低剂量,2倍ED95为高剂量,将小鼠分为空白组、大黄低剂量组、大黄高剂量组、大黄低剂量隔日给药组、大黄高剂量隔日给药组,每日和隔日灌胃给药,均给药10次。分别观察粪便含水率、粪便粒数、停药后炭末排出时间的变化,并运用高效液相(HPLC)检测大黄高剂量组给药后第1、10日以及大黄高剂量隔日给药组第10次给药后粪便结合蒽醌和游离蒽醌色谱峰面积的相对比值。结果:相同剂量给药以大黄隔日给药发生泻下作用耐受最轻且易恢复;大黄高剂量隔日给药组第10次给药后粪便结合型和游离型蒽醌色谱峰面积相对比值低于每日高剂量组第10次给药后粪便结合型和游离型蒽醌相对比值。结论:小鼠对大黄泻下作用产生耐受性与给药剂量、给药时间和给药方法有关,给药方法对肠道蒽醌变化影响较大,大黄间断较大剂量给药可减少小鼠继发性泻下作用耐受。

乙醛酸对李氏禾铬耐受和富集作用的影响试验

通过水培试验,研究了乙醛酸对铬胁迫下李氏禾幼苗生理生化、草酸分泌及铬吸收量的影响,并考察了乙醛酸对李氏禾体内草酸合成的调控,进而促进李氏禾的铬耐受和富集能力。结果表明:铬胁迫下,经0.1mmol/L乙醛酸处理,李氏禾的细胞膜透性、丙二醛(MDA)含量相比对照组有所降低,李氏禾叶部总草酸含量为对照组的151%~328%,并且在铬浓度为0.2~0.8mmol/L时,增加的草酸以不溶性草酸为主,其含量为对照组的166%~193%;在一定Cr3+浓度胁迫下,添加乙醛酸能促进李氏禾体内草酸的合成,使得铬更易于与草酸结合形成不溶性的草酸铬络合物,进而提高植物对铬的耐受和富集能力。

家兔对细菌内毒素耐受性试验研究

本文通过用18 只家兔分成6 组( n = 3) ,分别iv 不同剂量的内毒素(endotoxin ETX) 国家标准品,然后间隔休息21 、28 、21 、28 、14d 共6 次重复首剂量,以ETX 的对数及各组家兔体温升高均值求出各次试验的直线回归方程,从各次试验的直线回归方程中求得家兔升温0-6 ℃所需的ETX 的量,以观察家兔休息时间对ETX 所引起体温变化的关系;另用10 只家兔每隔3d 共连续6 次重复首剂量的ETX,以家兔平均升温值及级ETX 次序,观察家兔对ETX 是否有积蓄耐受作用。实验显示,家兔2 次iv ETX 后并休息28d ,能恢复对ETX 升温的敏感性;重复iv 6 次ETX 对家兔无积蓄耐受作用。

LNCaP-flu细胞耐受氟他胺的作用机制

目的探讨可耐受氟他胺的LNCaP细胞亚株-LNCaP-flu耐受氟他胺的机制。方法抽提正常LNCaP细胞和LNCaP-flu细胞中的mRNA,琼脂糖凝胶电泳证明A260／A280>2．0,Su- perscriptⅡ逆转录酶行逆转录,加入Cy5和Cy3,制备cDNA探针,使用16 184点位cDNA基因芯片观察两者细胞雄激素受体相关基因表达差异情况。并使用逆转录聚合酶链反应验证基因芯片结果。结果 Trizol法提取细胞mRNA合格,从16 184个点位中筛选出差异表达基因共2 428个,占 15．0％;其中1 194条下调,1 234条上调。其中与雄激素受体功能明显相关的共有4条基因,分别为NCOR1、NCOA2、NCOA4和DDC。此4基因在氟他胺短时作用的LNCaP细胞中均无表达变化。结论雄激素受体相关基因,尤其是4种雄激素受体共调节物,在LNCaP细胞的氟他胺耐受性的产生过程中可能起到一定作用。

pDC的分化发育及其在免疫耐受中的作用

浆细胞样树突状细胞（plasmacytoiddendriticcell，pDC）从1958年被发现，其定位于活动性淋巴结周围，呈浆细胞形态，后续的研究发现这些细胞表达T细胞和单核细胞的表面标记，并且在病毒刺激后迅速产生大量的I型干扰素，结合其生物学形态特征、定位、表型及功能，这群细胞曾被称为T细胞样浆细胞、单核细胞样浆细胞、I型干扰素生成细胞。根据近年的研究明确这群细胞具有抗原提呈功能，现公认使用浆细胞样树突状细胞即pDC的名称。

阻断协同刺激分子对TGF－β1和PAI-1的表达及妊娠结局的影响

目的：探讨阻断CD86协同刺激分子对自然流产模型孕鼠TGF-β1和PAI-1的表达及妊娠结局的影响。方法：实验组于妊娠第4．5天腹腔注射大鼠抗小鼠CD86单抗，实验对照组注射大鼠同型IgG2b，而正常妊娠组不做任何处理。于妊娠第13．5天计算胚胎吸收率，用免疫组化测定TGF-β1和PAI-1的表达。结果：（1）实验组的胚胎吸收率显著低于实验对照组（P〈0．05）。（2）实验组蜕膜细胞中TGF—β1和PAI-1的表达均显著高于实验对照组（P〈0．05）。结论：妊娠早期阻断CD86协同刺激分子信号途径可使母胎界面中的TGF-β1和PAI-1分别通过各自不同的途径来发挥免疫耐受作用并且使自然流产模型孕鼠的胚胎吸收率降低至正常妊娠水平。

参与个体化治疗高血压1例

探讨具有有效的个体化药学服务模式。对同一患者长达6个月的药学服务进行回顾性分析,发现影响个体化治疗效果的具体因素。与患者进行有效沟通,建立互信,是有效咨询及提高临床治疗效果的前提。

多西紫杉醇诱导人宫颈癌细胞凋亡对其放射增强作用的影响

目的探讨放射联合多西紫杉醇化疗治疗宫颈癌的作用机制，为其在宫颈癌治疗方面的应用提供实验依据。方法采用MTT方法检测0．5μmol／L、1．0μmol／L多西紫杉醇分别预先孵育Hela细胞24h后联合0，2，4，6，8Gy放射对Hela细胞增殖活性的影响；TUNEL法检测单纯放射组、单纯多西紫杉醇化疗组与联合治疗组细胞的凋亡情况，采用Western blot法检测检测单纯放射组、单纯多西紫杉醇化疗组与联合治疗组细胞中caspase-3蛋白及其裂解片段的表达情况。结果放射联合多西紫杉醇化疗对Hela细胞的抑制作用显著强于单纯放射组（P〈0．05），在2Gy的6MVX线照射作用下，对Hela细胞的抑制率随着多西紫杉醇浓度的增加而增加（P〈0．05）。与单纯化疗和单纯放射相组比，多西紫杉醇联合放射处理的Heia细胞48h后，细胞凋亡指数明显增多（P〈0．05），同时caspase-3酶原被降解，产生有活性的小片段增多。结论多西紫杉醇通过激活easpase-3诱导Hela细胞凋亡是其放射增敏机制之一。

雷帕霉素增强鼻咽癌放疗敏感性的分子机制研究

目的探讨雷帕霉素对于鼻咽癌（NPC）放射治疗的增敏效果及其分子机制。方法体外实验以未经处理的细胞作为对照，用雷帕霉素、放射照射、雷帕霉素联合放射照射对鼻咽癌细胞进行处理，比较各组间S6和糖原合成酶激酶3S（GSK313）磷酸化、细胞周期蛋白CyclinD1的表达、肿瘤细胞克隆形成及残余γH2AX灶数量以及细胞周期进展。裸鼠体内接种鼻咽癌CNEl细胞，与体外实验同样分组处理，比较各组之间肿瘤的重量以及细胞周期蛋白CyclinD1和磷酸化s6的表达。结果雷帕霉素降低鼻咽癌细胞中的S6和GSK3~磷酸化以及CyclinD1表达；雷帕霉素处理后，鼻咽癌细胞存活率降低，DNA损伤率升高和G1期阻滞延长；体内研究结果显示雷帕霉素显著抑制肿瘤生长，并降低细胞周期蛋白D1和磷酸化S6表达水平。与单独治疗相比，雷帕霉素联合放射照射能进一步促进鼻咽癌细胞凋亡、DNA损伤率升高和G1期阻滞延长，进一步抑制肿瘤生长。结论雷帕霉素通过抑制Akt／哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）／S6和Akt／GSK313／细胞周期蛋白D1途径提高放射治疗鼻咽癌的效果。