分子生物学技术在耐多药/耐利福平结核病诊断中的应用进展

耐多药/耐利福平结核病(multi-drug or rifampicin-resistant tuberculosis,MDR/RR-TB)对全球结核病的防控构成了严重威胁。2022年世界卫生组织(World Health Organization,WHO)全球结核病报告显示,2021年全球新发MDR/RR-TB患者45万例,我国居第四位,而全球治疗成功率仅为60%[1]。化学药物是其最重要的治疗手段,目前已有成熟的药物及方案,近年亦有不少新药问世,可为MDR/RR-TB治疗提供更多选择。

盐都区利福平耐药肺结核患者临床特征及治疗转归分析

目的分析盐都区利福平耐药肺结核(RR-PTB)患者临床特征及治疗情况。方法收集2012—2021年盐城市盐都区登记确诊的肺结核患者的临床资料,分析肺结核患者耐药情况、RR-PTB患者的临床特征及治疗转归情况。结果2012—2021年盐都区共发现病原学阳性肺结核患者864例,占所有肺结核患者的30.76%(864/2809);2012—2021年盐都区RR-PTB检出率为11.67%(93/797),呈先上升后下降趋势。2012—2016年、<60岁、高危人群的耐药肺结核(DR-PTB)、RR-PTB和耐多药肺结核(MDR-PTB)检出率均高于2017—2021年、≥60岁、非高危人群(P<0.05)。2012—2021年盐都区共67例RR-PTB患者纳入治疗,成功治疗率为71.64%(48/67)。2017—2021年、<60岁、非高危人群、6个月末痰培养阴性患者的成功治疗率较高,诊断天数≥30 d、合并糖尿病、合并空洞病灶、中断治疗≥14 d患者的成功治疗率较低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论盐都区RR-PTB的防治工作取得了显著成效,但应重点关注≥60岁、高危人群、合并糖尿病、合并空洞病灶等RR-PTB患者的治疗管理,制定针对性的综合防控措施,提高成功治疗率。

2011—2020年北京市怀柔区耐药结核病高危人群利福平耐药筛查情况分析

目的:通过筛查耐药结核病高危人群,了解北京市怀柔区耐药结核病高危人群利福平耐药情况。方法:统计2011—2020年登记管理的肺结核患者中耐药结核病高危人群筛查情况,包括筛查对象、结核菌培养及药敏试验,对耐药高危人群利福平耐药情况进行分析。结果:2011—2020年北京市怀柔区共登记利福平耐药高危人群130例,完成耐药筛查130例,筛查率为100.00%。实验室污染率为3.08%,其中,涂阳培阴率为34.62%,主要体现在治疗2个月及以上的痰涂片或培养仍为阳性的初治患者中;耐药结核病高危人群培养阳性81例,菌种鉴定为结核分枝杆菌75例,检出利福平耐药23例,检出率为30.67%,明显高于与同期初治培养阳性的肺结核患者利福平耐药检率的3.33%,差异有统计学意义(χ^(2)=40.82,P<0.05)。结论:北京市怀柔区积极开展监测,使利福平耐药结核病能够得到有效的管理和医治,做到早发现、早治疗,避免因贫致病、因病返贫,更重要的是能够有效遏制利福平耐药肺结核的传播风险,减少对人们健康的危害。

Xpert结核分枝杆菌及利福平耐药菌检测在结核病诊断中的应用价值

目的 探讨运用Xpert结核分枝杆菌及利福平耐药菌检测(MTB/RIF)对疑似肺结核患者的诊断效能。方法 结合病原学、影像学诊断结果,选取郑州人民医院和郑州市中心医院2021年1—12月收治的248例疑似肺结核患者为研究对象,留取痰液或肺泡灌洗液进行培养、Xpert MTB/RIF、抗酸染色和液基集菌涂片染色检测,对Xpert MTB/RIF在肺结核疑似患者中的诊断效能进行评估。结果 248例研究对象中,最终诊断为肺结核122例。MTB液体培养、Xpert MTB/RIF、抗酸染色涂片、液基集菌染色检测诊断肺结核的敏感度分别为54.10%、97.54%、7.38%、16.39%,特异度分别为98.41%、98.41%、95.24%、93.65%。Xpert MTB/RIF检测结果的敏感度优于其他3种检测方法,且漏检率最低。结论 Xpert MTB/RIF能提高MTB的阳性检出率,对结核病的早期诊断及有效防控均有益处,具有实际临床应用价值。

基于倾向性评分法的耐药结核病与非耐药结核病的相关因素研究

目的 研究分析耐药结核病与非耐药结核病间的相关因素差异,为临床诊疗提供参考。方法 选取2022年1月至2023年10月在安徽省阜阳市第二人民医院住院治疗的397例肺结核患者,根据药物敏感性试验结果将190例耐药结核病(DR-TB)患者作为观察组,207例非耐药结核病患者作为对照组。利用倾向性匹配评分法(PSM)将两组患者的基线资料进行1∶1的匹配,对比分析匹配后两组患者(各144例)清蛋白(ALB)、血红蛋白(HGB)、血小板计数(PLT)、C反应蛋白(CRP)、血清淀粉样蛋白A(SAA)及诊断分类(初治、复治)的差异,使用ROC曲线获得ALB、HGB、PLT、CRP的最佳截断值,采用二元logistic回归模型进行多因素分析,并探讨该模型的预测价值和校准度。结果 对匹配前后两组的相关因素进行对比分析,ALB、HGB、PLT、CRP、诊断分类,差异有统计学意义(P<0.05),二元logistic回归分析显示,ALB、HGB、PLT和复治患者是发生耐药的危险因素(P<0.05),模型的曲线下面积为0.833(P<0.001,95%CI:0.786~0.880),当约登指数为0.549时,灵敏度为78.5%,特异度为76.4%,HL检验评价模型校准度,χ2=10.811,P=0.213,预测值与实测值之间差异无统计学意义。结论 本研究建立了一个基于ALB(≤30.1 g/L)、HGB(≤121 g/L)、PLT(≤327×109/L)水平低下以及复治患者数量较多的logistic回归模型,该模型能够有效鉴别耐药结核病与非耐药结核病患者,具有一定的临床应用价值。

54例复治利福平耐药结核病患者菌株遗传特征及耐多药基因分析

目的 分析54例复治利福平耐药结核病(RR-TB)患者的结核分枝杆菌(MTB)菌株遗传特征及耐多药基因突变情况。方法 选择同时留存有初治及复治MTB菌株的复治RR-TB患者54例,取其初治及复治时的MTB共54对(108株),采用RD105基因缺失法检测其基因型,15位点可变数目串联重复序列基因分型实验(MIRU-VNTR)判断其复治发病原因;取复治时的MTB 54株,通过MIRU-VNTR结果构建最小生成树(MST),分析群体遗传特征;采用分子线性探针药敏实验分析复治MTB的耐多药基因(利福平耐药rpo B基因及异烟肼耐药kat G、inh A基因)突变情况。结果 108株复治RR-TB患者的MTB均为北京基因型,内源性复燃占比77.8%(42/54)、外源性再感染占比22.2%(12/54)。MST显示,54株复治MTB分为3个克隆复合群(CC1、CC2、CC3)和13个独特基因型;共48种基因型,成簇率为11.1%。分子线性探针药敏试验结果显示,异烟肼耐药kat G、inh A基因突变40株,耐多药率为74.1%(40/54);利福平耐药rpo B基因以S531L位点突变为主(63.0%,34/54),异烟肼耐药kat G基因以S315T1位点突变为主(75.0%,30/40)。结论 北京地区复治RR-TB患者发病原因主要是内源性复燃,主要流行菌株为北京基因型,呈现出较高的遗传多样性,成簇率较低,MTB耐多药基因突变位点多为rpo B基因S531L及kat G基因S315T1。

1例新生儿耐药结核病成功救治病例报告

新生儿结核病是由结核分枝杆菌通过母婴传播或产后传播引起的疾病,新生儿结核病临床表现多样且缺乏特异性及病原学检测的阳性率远低于成人,如对结核病防治知识了解不足,重视度不够,早期导致误诊及漏诊机率大。本文对1例新生儿耐药性结核进行回顾分析,总结如何做到早发现、早治疗。

超敏结核分枝杆菌和利福平耐药基因检测技术在结核病诊断中的应用进展

1结核病现状结核病是严重危害人类健康的传染性疾病之一,是仅次于新型冠状病毒感染的第二大传染病杀手,是全球第13大死因[1]。2022年10月27日,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)发布《2022全球结核病报告》[2](以下简称报告)指出,2021年全球新发结核病患者约1060万人,其中儿童约120万人。受新型冠状病毒的影响,全球结核病发病率与2020年相比上升了3.6%,打破了过去20年间每年约2%的下降趋势。2019年至2021年,全球因结核病死亡人数有所增加,2021年全球共有160万人死于结核病,相当于倒退到2017年的水平。2020年至2021年全球耐药结核病负担增加了3%,2021年报告了45万例利福平耐药结核病例,需要治疗的耐药结核患者中仅有36%的人接受了治疗,并且全球耐药结核的成功治疗率只有60%。2021年全球结核病基本医疗服务支出也从2019年的60亿美元下降至54亿美元,而2022年所需的费用为130亿美元[2],资金缺口巨大。

利福平耐药结核病患者表型药敏试验结果分析及与Xpert MTB/RIF结果比较

目的分析利福平(RIF)耐药结核病患者表型药敏试验结果,并与结核分枝杆菌(MTB)及RIF耐药菌检测(Xpert MTB/RIF)结果进行对比。方法回顾性收集2019年1月至2021年12月昆明市第三人民医院收治的经Xpert MTB/RIF证实RIF耐药的288例结核病患者的临床资料,其中MTB培养阴性63例,MTB培养阳性225例。除8例患者因联系不上未行药敏试验外,其余213例MTB培养阳性患者均采用微孔板比例法进行药敏试验。比较表型药敏检测结果及其与Xpert MTB/RIF结果的差异。结果行药敏试验的213例RIF耐药结核病患者中,MDR患者比例最高,占53.5%(114/213),广泛耐药患者占22.5%(48/213);男性耐药患者比例[65.7%(140/213)]高于女性[34.3%(73/213)],但差异无统计学意义(P>0.05);RIF耐药结核病患者中,初治患者耐药发生率较高;在MDR和广泛耐药患者中,复治患者耐药发生率均高于初治患者,差异均有统计学意义(χ^(2)=5.648、13.385,P<0.05)。一线抗结核药物耐药率从高到低依次为RIF、利福喷汀、异烟肼、链霉素、乙胺丁醇,其耐药率分为96.7%(206/213)、96.7%(206/213)、76.1%(162/213)、26.8%(57/213)、20.2%(43/213)二线抗结核药物耐药率从高到低依次为利福布汀、莫西沙星、左氧氟沙星、对氨基水杨酸钠、阿米卡星、帕司烟肼、卡那霉素、卷曲霉素、丙硫异烟胺、克拉霉素、氯法齐明,耐药率分别为93.8%(200/213)、19.2%(41/213)、18.8%(40/213)、6.1%(13/213)、4.7%(10/213)、4.7%(10/213)、4.7%(10/213)、4.2%(9/213)、1.4%(3/213)、1.4%(3/213)、0.9%(2/213)。进行表型药敏试验的213例患者中,有7例(3.3%)显示基因耐药表型敏感,206例(96.7%)显示基因耐药表型耐药。结论氟喹诺酮类耐药率在二线药物中耐药率最高,故应加强Xpert MTB/RIF检测和抗结核药物表型药敏试验,以指导临床用药。

含贝达喹啉全口服方案治疗耐多药/利福平耐药结核病(MDR/RR-TB)患者的有效性与安全性研究

目的:含贝达喹啉全口服方案治疗耐多药/利福平耐药结核病(MDR/RR-TB)患者的有效性与安全性研究。方法:选取2021年5月1日~2023年5月1日于我院就诊的108例MDR/RR-TB患者,按随机数字表法分为两组,对照组(n=46,予利奈唑胺+环丝氨酸+吡嗪酰胺+丙硫异烟胺+莫西沙星治疗)和观察组(n=62,予对照组治疗基础上+贝达喹啉治疗)。对比两组治疗有效性与安全性。结果:治疗后,观察组治疗总有效率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组QTcF延长发生率高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);组间其他不良反应发生率对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:含贝达喹啉全口服方案治疗MDR/RR-TB患者获得了更高的治疗有效性以及安全性。

耐多药结核病实验室检测技术进展

耐多药结核病(MDR-TB)是指对包含异烟肼和利福平同时在内的至少2种以上一线抗结核药物耐药的结核病,其严重威胁着人类的健康和生命,因此早期快速检测耐药情况是MDR-TB患者有效治疗的关键。当前临床MDR-TB诊断主要以表型药物敏感性试验(pDST)检测为主,但pDST检测耗时长,一定程度上延误患者最佳治疗时机,而基因型药物敏感性试验(gDST)则能在较短时间内完成耐药检测。目前在MDR-TB诊断的研究中,pDST检测联合gDST检测是研究热点,但仍处于探索阶段,缺少多中心、大样本、前瞻性研究报道。该文对MDR-TB的实验室检测技术进行综述,以期使读者深入了解MDR-TB的诊断现状及未来研究方向,为MDR-TB的快速诊断及治疗提供参考或借鉴。

不同剂量左氧氟沙星治疗利福平耐药肺结核的临床效果比较

目的比较不同剂量左氧氟沙星治疗利福平耐药肺结核的临床效果。方法选择2019年1月—2022年1月于厦门市第三医院治疗的利福平耐药肺结核患者85例,依据抽签法随机分为高剂量组和低剂量组,以左氧氟沙星0.75 g/d剂量治疗的43例患者为高剂量组,以左氧氟沙星0.5 g/d剂量治疗的42例患者为低剂量组,2组均治疗1个月。比较2组疗效,治疗前后血清炎性因子水平、生活质量评分及不良反应,随访12个月,比较2组不同时间痰涂片痰菌转阴率。结果高剂量组总有效率为97.67%,高于低剂量组的80.95%(χ^(2)=4.634,P=0.031)。治疗1个月后,2组血清各炎性因子水平较治疗前下降,生活质量评分较治疗前升高,且高剂量组变化幅度大于低剂量组(P<0.01)。2组治疗后3个月痰涂片痰菌转阴率比较无显著差异(P>0.05),高剂量组治疗后6、9、12个月痰涂片痰菌转阴率高于低剂量组(P<0.05)。高剂量组不良反应总发生率为13.95%,与低剂量组的11.90%比较无显著差异(χ^(2)=0.079,P=0.778)。结论利福平耐药肺结核患者在治疗中,以高剂量(0.75g/d)的左氧氟沙星治疗,可减轻血清炎性因子水平,改善生活质量,提升患者痰涂片痰菌转阴率,且安全性较高。

盐酸莫西沙星对利福平耐药结核病患者痰菌转阴的价值分析

探究对利福平耐药结核病患者采用盐酸莫西沙星治疗对患者产生的影响及作用。方法 选择2020.1.1~2023.12.31期间的100例患者,分为对照组(50)/观察组(50),对比疗效。结果 观察组治疗效果更为突出,治疗后T细胞亚群指标均更卓越,治疗后生活质量更好(P<0.05)。结论 将盐酸莫西沙星应用于利福平耐药结核病患者中,可提高患者疗效及生活质量,改善机体T细胞亚群指标,对患者病情恢复效果明显,值得推广。

2018-2022年重庆市复治肺结核患者利福平耐药情况及影响因素

目的分析重庆市复治肺结核患者利福平耐药情况及影响因素,为该市耐药结核病防控工作提供依据。方法应用描述性流行病学方法分析2018—2022年重庆市区县登记的复治肺结核患者利福平耐药情况,采用χ^(2)检验及二元logistic回归分析复治肺结核患者耐药影响因素。结果2018—2022年该市区县复治肺结核患者利福平耐药检出率14.45%(558/3862),总体呈下降趋势(χ_(趋势)^(2)=22.739,P<0.001)。单因素分析显示复治肺结核患者中流动人口、居住在主城都市区、工人及民工患者利福平耐药检出率最高(均P<0.05),随年龄增加利福平耐药检出率降低(P趋势<0.001)。多因素logistic回归分析显示,随着年龄增长,利福平耐药风险逐渐降低,OR值从<25岁组的2.778下降至45~岁组的1.654(均P<0.001)。流动人口、居住在主城都市区、职业为工人及民工是复治肺结核患者利福平耐药的危险因素,差异均具有统计学意义(均P<0.05)。结论虽然重庆市复治肺结核患者利福平耐药检出率逐年下降,但形势依然严峻,需重点关注流动人口、低龄、居住在主城都市区和工人及民工相关人群。

平顶山地区某医院195例肺结核患者利福平耐药发生与危险因素分析

目的探究平顶山地区某医院195例肺结核患者利福平耐药发生与危险因素。方法回顾性选取我院2019年8月至2023年4月期间收治的650例阳性肺结核患者作为研究对象,分析患者利福平耐药情况,并根据是否利福平耐药分为对照组(利福平敏感,455例)、观察组(利福平耐药,195例),通过单因素及多因素分析法分析肺结核患者利福平耐药的危险因素。结果650例肺结核患者痰标本中分离出650株结核分枝杆菌,其中有195例利福平耐药患者,利福平耐药率为30.00%。多因素Logistic分析结果显示,有合并症、抗结核治疗次数≥2次、自服药物、未按剂量服药、中断治疗、未知晓肺结核的传播途径为肺结核患者利福平耐药的危险因素(OR=9.767、7.471、5.463、6.693、11.056、10.268,P均<0.05)。结论肺结核患者利福平耐药率为30.00%,有合并症、抗结核治疗次数≥2次、自服药物、未按剂量服药、中断治疗、未知晓肺结核的传播途径为肺结核患者利福平耐药的危险因素,临床可据此给予患者针对性治疗及干预措施,以降低肺结核患者利福平耐药的风险。

耐多药或利福平耐药肺结核与利福平敏感肺结核患者炎症因子表达对比分析

目的 分析耐多药或利福平耐药肺结核(MDR/RR-PTB)与利福平敏感肺结核(RS-PTB)患者炎症因子表达情况。方法 选取MDR/RR-PTB患者120例与RS-PTB患者120例,进行回顾性分析。结果 MDR/RR-PTB与RS-PTB2组内白细胞计数、中性粒细胞绝对值、血小板计数正常的患者占比均较高,血沉(ESR)增快患者占比较高,C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)升高的患者占比较高。2组患者的ESR、CRP、PCT、IL-6水平明显升高,均高于正常参考值。2组患者白细胞介素-6(IL-6)水平比较差异具有统计学意义(P<0.05),ESR、CRP、PCT水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 MDR/RR-PTB与RS-PTB2组患者外周血白细胞计数多为正常,ESR、CRP、PCT与IL-6水平均明显升高。MDR/RR-PTB组患者CRP水平高于RS-PTB组患者,MDR/RR-PTB组患者感染更严重。

世界卫生组织利福平耐药结核病患者数估算方法

2022年10月,世界卫生组织(World Health Organization,WHO)公布了《2022年全球结核病报告》,报告估算2021年我国新发利福平耐药结核病患者数约为3.3万例,远低于2019年估算的6.5万例。为此,笔者对2022年WHO报告中我国利福平耐药结核病患者数的估算方法进行解读。

聚合酶链反应熔解曲线法检测结核分枝杆菌对利福平和异烟肼耐药的临床价值分析

目的:评价荧光聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)熔解曲线法检测结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对利福平和异烟肼耐药的临床价值,为临床MTB耐药情况的快速、准确检测提供参考。方法:选取2023年10月-2024年4月苏州市第五人民医院收治的153例结核病患者作为研究对象,留取所有患者的痰液标本、纤支镜洗液标本和培养菌株标本,同时采用荧光PCR熔解曲线法、利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(XpertMTB/RIF法)和微孔板药敏法检测MTB对异烟肼和利福平的耐药情况,分析荧光PCR熔解曲线法检测MTB对利福平和异烟肼耐药的临床价值。结果:微孔板药敏法检测结果显示,153例结核病患者中有43例的MTB为耐药型,其中单利福平耐药的有1例(占0.65%),单异烟肼耐药的有15例(占9.80%),利福平+异烟肼耐药的有27例(占17.65%);与Xpert MTB/RIF法相比,荧光PCR熔解曲线法检测MTB对利福平耐药的符合率、阳性预测值、阴性预测值、灵敏性、特异性分别为98.04%、90.91%、100.00%、100.00%、97.56%,而其Kappa值为0.94;与微孔板药敏法相比,荧光PCR熔解曲线法检测MTB对利福平耐药的符合率、阳性预测值、阴性预测值、灵敏性、特异性和Kappa值分别为95.42%、81.82%、99.17%、96.42%、95.20%、0.86,而其检测MTB对异烟肼耐药的符合率、阳性预测值、阴性预测值、灵敏性、特异性和Kappa值分别为94.12%、92.31%、94.74%、85.71%、97.30%、0.85。结论:对于MTB对利福平和异烟肼的耐药检测,荧光PCR熔解曲线法与Xpert MTB/RIF法、微孔板药敏法几乎完全一致,可为临床耐药结核病的早期诊断提供较为可靠的依据。

耐利福平作为筛选耐多药结核病指标的评估

目的探讨耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的可行性。方法对结核分枝杆菌临床分离株采用美国BD公司BACTEC MGIT 960全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏仪进行药敏试验,并对数据进行分析。应用诊断性试验评价指标评价耐利福平作为耐多药结核病筛选指标的科学性。结果在621株结核分枝杆菌临床分离株中,177株对利福平菌耐药,其中172株至少同时对异烟肼耐药,结核分枝杆菌的耐多药率为27.7%。若以至少同时耐异烟肼和利福平作为诊断MDR-TB的参考标准,以耐利福平作为MDR-TB筛选指标的敏感性为100%、特异性为98.9%、准确度为99.2%、阳性预测值为97.2%、阴性预测值为100%、阳性似然比为34.4、阴性似然比为0。结论我市耐多药结核病发生率高;耐利福平可以作为耐多药结核病的初步筛选指标。

利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术在结核病诊断中的研究进展

结核病是一种严重危害人类健康的慢性传染病,其诊断的传统细菌学检查方法主要为涂片镜检、分枝杆菌培养及药敏实验等。由于传统方法的局限性,新的诊断技术利福平耐药实时荧光定量核酸扩增技术(Xpert MTB/RIF检测)应运而生,因其操作简便,具有较高的灵敏度和特异度,快速且准确检测结核分枝杆菌和利福平耐药,而受到国内外广泛关注。本文将对该方法在肺结核、肺外结核、儿童结核、HIV/MTB双重感染及MDR-TB患者中的应用做一综述。