上海地区结核病患者耐氟喹诺酮药物的研究

氟喹诺酮类药物是目前重要的治疗结核病的二线药物，但由于其对结核分枝杆菌具有显著的杀菌活性，被提议作为抗结核病的一线药物使用。由于氟喹诺酮类药物在临床上使用已有近20年时间，被广泛用于其他细菌感染的治疗，人们担心在结核分枝杆菌中已经存在较高的氟喹诺酮耐药水平而不能作为一线药物使用。本文对上海地区结核病患者中氟喹诺酮耐药水平及其危险因素进行了回顾性研究。

耐氟喹诺酮类药物的大肠埃希菌gyr A 基因点突变检测

目的：研究大肠埃希菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制。方法：对大肠埃希菌标准菌４４３０２和临床收集的３株对氟喹诺酮类药物高度耐药的大肠埃希菌及１株敏感菌，用ＰＣＲ方法扩增ＤＮＡ旋转酶ｇｙｒＡ基因的Ｎ末端编码区，并进行克隆和序列测定。结果：对氟喹诺酮类药物高度耐药的大肠埃希菌的ｇｙｒＡ基因的序列分析，发现３个导致氨基酸改变的基因点突变：丝氨酸－８３→亮氨酸；丙氨酸－８４→脯氨酸；天冬氨酸－８７→天冬酰氨。结论：对氟喹诺酮类药物高度耐药的大肠埃希菌的ＤＮＡ旋转酶Ａ亚单位存在着基因点突变。

结核分枝杆菌耐氟喹诺酮类药物的严重性及其特点

上世纪80年代发现氟喹诺酮类药物（FQs）具有抗结核分枝杆菌活性以来，FQs被逐渐用于结核病的治疗之中，今天FQs已不仅仅是治疗耐多药结核病（MDR-TB）的主选化疗药物，多耐药结核病（PDR—TB）和单耐药结核病也在使用FQs，国际上甚至研究将FQs用于新发或初治肺结核患者的治疗，以期缩短疗程，增加患者的依从性，提高治愈率，从根源上控制或减少耐药结核病的发生。

铜绿假单胞菌parC基因突变与耐氟喹诺酮的关系

研究了成都地区临床分离的铜绿假单胞菌拓扑异构酶ⅣparC基因突变与耐氟喹诺酮类药物的关系。测定临床分离的55株铜绿假单胞菌的MIC值,从中筛选出1株敏感菌和8株耐药菌,以标准敏感菌株ATCC27853作为质控菌株。用PCR反应扩增parC基因的喹诺酮耐药决定区(QRDR),扩增产物片段长度为396bp,同时对上述10株菌的PCR产物进行测序分析。临床分离敏感菌和标准菌株ATCC27853的parC基因序列与国外报道的序列相同,而R25,R42,R43,R44等4株耐药菌株在87位(TCGCG→TTG)均有突变,该单位点突变引起氨基酸由Ser→Leu的改变,此外,新发现在所有耐药菌株115位有一静止突变(GCT→GCG),该突变未引起氨基酸的改变。拓扑异构酶ⅣparC基因突变是铜绿假单胞菌对氟喹诺酮类药物产生耐药性的机制之一,以87位的突变最为常见。

Study of isolation of fluoroquinolone-resistant Ureaplasma urealyticum and identification of mutant sites

OBJECTIVE: To study the resistance mechanism of clinical isolates of Ureaplasma urealyticum resistant to fluoroquinolones. METHODS: Thirteen isolates of Ureaplasma urealyticum resistant to six fluoroquinolones were selected out of 184 clinical isolates and their QRDRs (quinolone resistance-determining region) gyrA, gyrB, parC and parE were amplified by PCR. Sequencing results were compared to those susceptible reference strains and a comparison of deduced amino acid sequences were performed. RESULTS: Sequence comparison revealed a C to A change at 87nt of gyrA QRDR leading to the substitution of Asp95 with glutamic acid and a C to T change at 50nt of parC QRDR leading to the substitution of Ser80 with leucine. CONCLUSION: These results suggest that a C to A change at 87nt of gyrA QRDR and a C to T change at 50nt of parC QRDR are associated with fluoroquinolone resistance of Ureaplasma urealyticum.