耐盐根瘤菌对紫花苜蓿接种效果的研究

在甘肃省临泽县盐渍地采集紫花苜蓿耐盐根瘤菌，编号为GL007，它能在pH值为14，NaCl浓度为1．539mol／L，Na2SO4浓度为1．971mol／L的YMA培养基上正常生长。经温室蛭石盆栽试验对5个紫花苜蓿品种进行接种效果的研究。结果表明，该根瘤菌与5个紫花苜蓿品种都能共生结瘤，表现出共生效应的多样性。接种该耐盐根瘤菌的紫花苜蓿与不接种的对照相比其结瘤数增加了11．4％～77．7％，有效瘤重增加了26．4％～80．8％，地上生物量鲜重增加了45．8％～87．5％，地上生物量干重增加了49．1％～106．3％，粗蛋白质含量增加了1．5％～13．5％，初步筛选出的与耐盐根瘤菌GL007最佳匹配的紫花苜蓿品种是金黄后，其地上生物量鲜重、干重、粗蛋白质含量分别比对照增加了82．6％，106．3％和13．5％，与对照有显著差异。

利用TAIL-PCR克隆耐盐基因及其分析

通过大量筛选得到一株高耐盐的豇豆根瘤菌WME7,最高可耐15g/L NaCl,利用Tn5-sacB转座子对该菌株进行随机插入突变,从突变子中筛选获得30个共生缺陷型突变株。利用TAIL-PCR(thermal asymmetric interlaced PCR)方法克隆了突变株Tn5-sacB侧翼序列,通过BLAST发现有1个突变株的插入失活基因与鼠伤寒沙门氏菌抗银的结合蛋白SilE有94%同源性,表明有关Na+离子的抗性基因可能与Ag+离子的抗性基因有某种关系。该基因在其它菌中也能抗其它金属离子(铜、锌、钴、铬)。