耐盐真菌Aspergillus variecolor B-17产生的烃基苯甲醛衍生物及其细胞毒活性

为从极端环境微生物中获得抗肿瘤药物先导化合物,作者从采自内蒙古盐湖的沉积物中分离了96株耐盐真菌。采用小鼠乳腺癌细胞株tsFT210和海虾(Artemia salina Leach)筛选抗肿瘤活性微生物,1株耐盐真菌AspergillusvariecolorB-17表现出明显的细胞毒活性和海虾致死活性。采用活性跟踪的分离方法,从该菌株的大量发酵产物的石油醚层提取物中分离得到了3个单体化合物。通过一维、二维超导核磁共振、质谱等波谱方法确定其结构分别为:2-(E-1-庚烯基)-3,6-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(1)、2-庚基-3,6-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(2)、2-(E,E-3,5-庚二烯基)-3,6-二羟基-5-(3-甲基-2-丁烯基)苯甲醛(3)。化合物1、2和3对P388、A549、HL-60和BEL-7402肿瘤细胞表现弱的细胞增殖抑制活性,IC50值分别为88,68,66,65μmol/L,9,99,110,84μmol/L以及77,147,93,203μmol/L。

云南三个盐矿盐卤沉淀池耐盐真菌的活性研究

采用滤纸片法和胞外酶定性筛选培养基对云南三个盐矿(乔后盐矿、一平浪盐矿和昆明盐矿)盐卤沉淀池耐盐真菌进行抗菌活性和产胞外酶筛选。结果从107株耐盐真菌中筛选到有抗菌活性的菌株14株,主要表现在对白假丝酵母(Candida albicans)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)和木霉(Trichoderma)的抗菌活性。产胞外酶活性菌株有15株,产纤维素酶、淀粉酶和蛋白酶的菌株各有13株、6株和4株。活性菌株主要分布在乔后盐矿盐卤沉淀池,优势属均为青霉属(Penicillium)和曲霉属(Aspergillus)。

碱蓬根系嗜盐耐盐真菌的分离与鉴定

为分析耐盐植物碱蓬根系真菌的组成和耐盐程度,采用常规植物组织真菌分离方法对盐碱地中生长健康的碱蓬根系进行真菌分离,将分离得到的真菌在不同Na Cl浓度培养基上进行培养,检测菌株的嗜盐耐盐性,并对分离得到的嗜盐耐盐真菌进行形态学鉴定和分子生物学鉴定。结果显示:分离得到耐盐真菌40株,分别属于镰刀菌属(Fusarium sp.)、链格孢属(Alternaria sp.)、曲霉属(Aspergillus sp.)、腐霉属(Pythium sp.)等,其中,棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)和尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是没有被报道过的耐盐真菌;分离得到嗜盐真菌3株,都属于聚多曲霉(Aspergillus sydowii)。结果表明,耐盐植物碱蓬中嗜盐耐盐真菌多样性丰富。

黄河三角洲耐盐真菌Penicillium chrysogenum HK14-01的次生代谢产物

【目的】从黄河三角洲耐盐微生物的代谢产物中寻找具有抗菌和抗肿瘤活性的化合物。【方法】应用化学与生物活性相集成的筛选方法,从耐盐微生物中筛选获得代谢产物丰富并具有生物活性的目标菌株;通过高盐胁迫目标菌株,利用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱和高效液相色谱等方法对发酵产物进行分离、纯化,运用波谱解析、钼靶X-射线单晶衍射分析、圆二色散谱(CD)和密度泛函数(DFT)-ECD的计算鉴定化合物的结构。【结果】从采自黄河三角洲的泥土样品中得到一株耐盐真菌HK14-01,鉴定为产黄青霉Penicilliumchrysogenum;从其发酵产物中分离鉴定了8个化合物:(2S,3R)-oxaline(1,主产物)、(3R,4R)-3,4,8-trihydroxy-3,4-dihydronaphthalen-1(2H)-one(2)、(Z)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(3)、(E)-N-(4-hydroxystyryl)formamide(4)、emodin(5)、4-(2-hydroxyethyl)benzene-1,2-diol(6)、methyl 2-(4-hydroxyphenyl)acetate(7)和2-(4-hydroxy phenyl)acetonitrile(8);化合物1、3和4对大肠杆菌以及化合物1和5对金黄色葡萄球菌表现出抑菌活性,化合物5对P388细胞表现出微弱的细胞增殖抑制活性。【结论】首次确定了化合物2的绝对构型、首次报道了化合物1和2的CD数据;从黄河三角洲的耐盐微生物的次生代谢产物中可以得到活性化合物,这一区域的耐盐微生物资源值得深入研究。

一平浪盐矿耐盐真菌的种群调查

研究了云南一平浪盐矿的耐盐真菌的分布和种群 .采用 4种不同含盐浓度的培养基进行分离纯化培养 ,结果获得 14 9株真菌 ,以形态特征为主进行分类鉴定到属 ,有 3目 ,3科 ,18属 .优势属为 :青霉属 (Penicil lum) ,曲霉属 (Aspergillus) ,拟青霉属 (Paecilomyces) .

产自耐盐真菌Alternaria sp. M6的一个新苝醌类化合物(英文)

目的:研究耐盐真菌 Alternaria sp. M6 的代谢产物。方法:运用多种色谱分离手段对耐盐真菌 Alternaria sp. M6的发酵液及菌丝体部分进行分离纯化。并借助各种波谱学方法鉴定结构。结果:从耐盐真菌 Alternaria sp. M6 的发酵液及菌丝体中分离得到 9 个代谢产物, 分别鉴定为 8β-chloro-3, 6aα, 7β, 9β, 10-pentahydroxy-9, 8, 7, 6a-tetrahydroperylen-4(6aH)-one (1),alterperylenol (2), dihydroalterperylenol(3), 腺嘌呤(4), 腺嘌呤核苷(5), 腺嘌呤脱氧核苷(6), 鸟嘌呤核苷(7), 色氨酸(8), 棕榈酸(9)。结论:化合物 1 为新的苝醌类化合物。

宁夏野生甘草中产甘草黄酮耐盐内生真菌分离及其DPPH自由基清除作用

采用组织分离法,在不含盐及含盐PDA培养基上分离、纯化内生菌,以甘草苷等8种甘草黄酮为对照品,分析发酵产物;DPPH自由基清除法测定清除率。共得到108株内生菌,TLC发现31株可能产甘草黄酮;HPLC-UV发现产甘草苷7株,产异甘草苷3株,产甘草素3株,产甘草查尔酮A3株,产刺甘草查尔酮1株,均为耐盐菌;产甘草苷、异甘草苷、甘草查尔酮A、刺甘草查尔酮的部分菌株有较强DPPH清除率;产甘草苷和异甘草苷的菌株8-5-Y-2活性最强,与甘草总黄酮相当,强于甘草查尔酮A。盐协迫得到产甘草黄酮,且具较强DPPH自由基清除活性的耐盐内生真菌,为资源替代奠定基础。

根际耐盐真菌分离筛选及溶磷促生性能分析

溶磷微生物可提高土壤中有效磷含量,但目前筛选的溶磷菌株在盐渍化土壤中应用的潜力有限。以滨海盐生植物根际土壤为材料,分离筛选可用于盐碱土改良的高效耐盐解磷菌株,为盐碱土生物菌肥的研制提供优质菌种资源。结果表明,北戴河湿地及曹妃甸湿地的3种原生盐地植物根际土壤中共分离筛选无机磷降解菌株5株和有机磷降解菌株3株,命名为C1-C7和G1,均能耐受10%的盐浓度。菌株间解磷能力差异显著,D/d为1.05~1.81,无机磷降解菌解磷量为26.61~4415.00mg/L,与对照相比有效磷增量为0.80~4371.10mg/L;有机磷降解菌解磷量为1.96~5.79mg/L,有效磷增量-3.40~0.20mg/L,有效磷含量与D/d之间相关性不强。其中菌株C1降解无机磷能力最强,溶磷量达4397.70mg/L,吲哚乙酸(IAA)分泌量为33.07mg/L,经分子鉴定该菌株为草酸青霉,是一株高效耐盐解磷菌,兼具促生作用,可以考虑作为盐碱地改良菌肥的重点菌种,与植物协同改良修复中重度盐碱土,可有效提高盐碱地土壤肥力,有更好的应用潜力。

盐蒿内生耐(嗜)盐真菌的分离及鉴定

采用含盐浓度不同的培养基分离陕北花马盐湖盐蒿(Artemisia halodendron)的内生耐(嗜)盐真菌并研究其物种多样性。从盐蒿组织中共分离得到1 215株内生耐(嗜)盐真菌,基于形态学和ITS系统发育分析表明,上述菌株属于6个属,包括小球腔霉属(Leptosphaeria)、青霉属(Penicillium)、木霉属(Trichoderma)、曲霉属(Aspergillus)、链格孢属(Alternaria)和镰孢属(Fusarium)。以小球腔霉属(Leptosphaeria)为优势属,其次为链格孢属,其分离频率分别为78.8%和2.28%;共计9个代表种如产黄青霉(Penicillium chrysogenum)、Aspergillus westerdijkiae、极细链格孢(Alternaria tenuissima)和长梗木霉(Trichoderma longibrachiatum)等。研究表明,陕北花马盐湖盐蒿中蕴藏着丰富的耐(嗜)盐真菌物种资源。

5株海洋来源真菌的卤盐调节发酵产物分析与代谢产物鉴定

目的对来源于青岛沿海的5株耐盐真菌,分析卤盐胁迫(halogen stress)对次生代谢产物结构多样性和活性的影响,并分离鉴定特征化合物。方法对5株海洋来源真菌进行单菌株多化合物(OSMAC)策略研究,使用高效液相层析(HPLC)法对次生代谢产物化学多样性进行分析,并采用非真菌的紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)进行群体感应(QS)活性测试。用中压柱色谱和制备HPLC进行分离纯化,根据波谱数据鉴定化合物结构。结果发酵培养基中碳氮源或卤盐的变化可改变5株耐盐真菌次生代谢产物的种类,继而带来活性的变化。从菌株L6的大米+NaCl培养基发酵粗提物中分离鉴定其主产物为细交链格孢酮酸。结论卤盐胁迫可丰富耐盐真菌次生代谢产物多样性,海洋来源真菌菌株对药用资源开发具有进一步研究价值。

昆明盐矿真菌次生代谢产物的分离与鉴定

对昆明盐矿真菌4-92的次生代谢产物进行了化学成分研究,从中分离得到15个化合物.通过波谱数据分析,鉴定其结构分别为5个酚类化合物:5-甲苯-1,3-二醇(1)、甲基2,5-龙胆酸(2)、对羟基苯甲酸(3)、3,3'-氧二苯(5-甲酚)(4)、2-(羟甲基)苯-1,4-苯二酚(5);3个甾醇类化合物:(22E,24R)-5α,6α-环氧-24-甲基胆甾-8(14),22-烯-3β,7α-二醇(6)、3β-羟基-(22E,24R)-麦角甾-5,8,22-三烯-7-酮(7)、啤酒甾醇(8);3个核苷类化合物:胸腺嘧啶(9)、尿嘧啶(10)、胞嘧啶(11);2个氧杂蒽酮类化合物:杂色黄曲霉毒素(12)、Oxisterigmatocystin C(13);一个蒽醌类化合物:大黄素(14);一个生物碱类化合物:Pseurotin A(15).

藏药黑果枸杞内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究

目的从藏药黑果枸杞中分离和鉴定内生真菌,并对其抑菌活性进行研究,旨在从该植物中获得强抑菌活性的菌株,为寻找新型抑菌活性物质提供新的资源。方法以新鲜黑果枸杞为材料,采用组织分离法从其根、茎、叶中分离内生真菌,依据形态进行初步鉴定;采用滤纸片法测定黑果枸杞内生真菌次生代谢产物的抑菌活性。结果从黑果枸杞的根、茎、叶中,共分离得到内生真菌81株,其中常态下分离得到60株,高盐条件下分离得到21株。81株内生真菌经鉴定属于7目,10科,13属,抑菌活性测试表明,高盐条件下得到的内生真菌代谢产物活性明显高于一般条件下的,特别是E21菌株平均抑菌圈直径为26～31 mm。结论采用模拟植物生长环境的方法分离内生真菌,对于特异性菌株的分离具有十分重要的意义。

南海局部海洋沉积物中真菌多样性及产酶活性

【目的】从11份南海海洋沉积物中分离耐盐真菌,并对其物种多样性及产酶活性进行研究。【方法】利用平板涂布法分离耐盐真菌,基于形态学和ITS序列的系统进化研究耐盐真菌多样性;利用6种筛选培养基对耐盐真菌进行产酶活性筛选。【结果】分离得到1689株耐盐真菌,共41个形态种。形态学和ITS序列分析表明,这些真菌归于15个属,其中曲霉属(Aspergillus)和青霉属(Penicillium)为优势菌群。对已测序的41株耐盐真菌的产酶活性研究表明,8株产纤维素酶,9株产淀粉酶,5株产复合酶,16株产蛋白酶,3株产脂肪酶,未发现产壳聚糖酶的菌株,其中Acrodontium sp.8m和Aspergillus sp.86b产复合酶的活性相对较高,而Penicillium sp.41m产蛋白酶的活性相对较高。【结论】南海局部海洋沉积物中耐盐真菌丰富,多数菌株具有产酶活性。