盐碱土耐盐菌株保存方法的研究

菌种的保存,是微生物研究重要的基础工作。本实验利用滤纸片保存法和冷冻管保存法对PDA上生长的菌株进行长期保存,使用斜面保藏法和菌液保存法对LB上生长的菌株进行长期保存。结果表明,真菌更适合滤纸片保存法,细菌和放线菌均可使用斜面保藏法和菌液保存法。本实验对盐碱土中耐盐菌种的长期保存提供了具体的方法。

一株分解海参体壁蛋白的耐盐菌株的筛选及发酵条件优化

为获得可在高盐条件下降解海参蛋白的菌株,促进营养物质的释放,采用马丁氏培养基(高盐)从海水中分离获得3株可直接进行海参蛋白降解的耐盐菌株(SW01、SW02和SW03)。对降解能力最强的SW03,从形态学、生理生化特征及16S rDNA等方面进行了鉴定,探讨了菌株的最适降解条件,并与枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)、肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides)在各自最佳发酵条件下进行72 h发酵效果的比较。对发酵过程中发酵液pH、菌体浓度以及水溶性蛋白含量的变化进行了测定。结果表明,SW03为葡萄球菌属(Staphylococcus)菌株,其最佳发酵条件为26℃、接种量2.9%、初始pH 6.9。在此条件下,发酵液水溶性蛋白含量达到108.2 g/L。与其他4株商业菌株对比,SW03在进入稳定期后发酵液中菌体浓度及水溶性蛋白含量更高,且发酵过程中pH更稳定。耐盐菌株SW03在高盐环境下对海参蛋白有良好的降解作用,可作为海参蛋白降解菌株进行深入研究及开发。

黄河三角洲盐碱地耐盐促生菌株的筛选与功能评价

通过对黄河三角洲盐碱地植物根际土壤的筛选,获得47株耐盐菌株,其中9株具有促生效果。结合产酸、耐碱、耐不同盐碱土的能力,最终获得1株耐盐菌株GJY-3。GJY-3在氯化物盐土、硫酸盐土、重碳酸盐土中的耐受程度分别为5%、5%、1%,酸碱耐受范围为3.15~10.5,无机磷溶解量为16.71 mg/L,吲哚乙酸的合成能力为31.33 mg/L,同时具备固氮、解钾功能。通过生理生化分析和16s rDNA鉴定,确定该菌株为地衣芽孢杆菌。通过盆栽试验发现:GJY-3在氯化钠盐碱土的促生效果优于硫酸钠盐碱土的;小白菜产量以及土壤脲酶、蔗糖酶、过氧化氢酶活性分别增加17.54%、91.59%、32.24%、5.11%。试验结果表明,GJY-3可用作盐碱地土壤改良菌株。

一株耐盐类球红细菌的分离鉴定及其对不同作物的促生作用

[目的]分离和筛选耐盐菌株并探讨其对不同农作物的促生作用,为进一步研制耐盐微生物菌肥制剂提供理论基础和科学依据。[方法]利用培养基从土壤样品中富集、分离光合细菌,采用形态学特征和分子生物学方法对菌株进行分类鉴定。用水培法培养萌发的番茄和水稻种子,在番茄长出真叶、水稻长出第一叶时,分别灌根施用配制的YYH-1菌液、分离菌菌液、灭活YYH-1菌液、灭活分离菌菌液、培养基和清水,7 d施用1次,连续施用3次。另设盐胁迫试验(番茄和水稻水培液中分别含50和100 mmol/L NaCl),重复上述操作。第3次灌根后7 d,分别测定番茄和水稻的株高、茎长、根长、茎粗、鲜重及叶绿素含量,对比分析菌株BTN-1的耐盐和促生作用。[结果]从土壤样品中分离纯化获得一株菌株,编号为BTN-1。根据菌株BTN-1形态、生理生化特征和16S rDNA序列分析,鉴定该菌株为类球红细菌(Rhodobacter sphaeorides)。促生和盐胁迫试验结果均表明,BTN-1和YYH-1菌液处理对番茄、水稻幼苗的促生效果较佳,其次为灭活BTN-1和灭活YYH-1菌液处理,尤其以BTN-1菌液处理的效果最优。在盐胁迫条件下,与培养基处理相比,BTN-1菌液处理的番茄株高、茎长、根长、茎粗和鲜重分别增长52%、54%、55%、36%和50%,叶绿素a和叶绿素b含量分别提高36%和37%;BTN-1菌液处理的水稻株高、茎长、根长、茎粗和鲜重分别增长41%、30%、21%、36%和44%,叶绿素a和叶绿素b含量分别提高39%和54%。[结论]菌株BTN-1能促进盐胁迫下番茄和水稻幼苗的生长,同时可提高二者的叶绿素含量,增强其光合作用。该菌具有耐盐和促生作用,在海水灌溉农田、盐碱化土壤利用等方面具有应用潜力,可作为生物菌肥在农业生产中开发利用。

耐盐促生菌株B7的筛选及其在黄瓜上的应用

本文综述了一种提高作物耐盐能力促生菌的筛选及其应用。通过对沿海滩涂盐碱地土壤中的微生物进行分离纯化,并采用耐盐和解盐试验对分离纯化出的根际微生物进行耐盐促生筛选,得到高耐盐活性促生菌B7。对B7的16S rDNA、生理生化性质及促生能力进行测定,最后采用培养皿法和盆栽法对B7提高黄瓜耐盐能力进行测试。结果表明,该菌株耐盐度为6%,利用B7制备的微生物菌剂能在盐胁迫下显著提高黄瓜的耐盐能力,减缓盐害现象,增加生物量,达到促进黄瓜生长的效果。

耐盐降解苯乙酸类菌株A1(Arthrobacter sp.A1)的分离和特性研究

从处理含盐 (NaCl浓度为 0 77mol L)苯乙酸生产污水的耐盐活性污泥中分离到一株节杆菌 (Arthrobactersp A1) .该菌株能在NaCl浓度为 0 1mol L— 2 0mol L ,以苯乙酸为唯一碳源的基础培养基中生长 ,或在NaCl浓度为 0mol L— 2 4mol L的完全培养基中生长 ,并能适应急剧的盐浓度变化 .对其它常见的低价态无机盐份如KCl、MgCl2 、(NH4) 2 SO4、Na2 SO4、CaCl2 也具有较强的耐受性 ,而对高价态无机盐份和重金属盐则耐受性不强 .在不同的NaCl浓度下 ,菌株A1细胞内的QAC(季胺化合物 )、游离氨基酸和K+

耐盐降解性菌株A1(Arthrobactersp.A1)的渗透调节

菌株A1 (Arthrobactersp .A1 )分离自降解含盐 (NaCl浓度为 0 .77molL- 1)苯乙酸生产污水的活性污泥。该菌株能在NaCl浓度为 0 .1molL- 1～ 2 .0molL- 1,以苯乙酸为惟一碳源的基础培养基中生长。在不同的NaCl浓度下 ,菌株A1细胞内的QAC(Quaternaryammoniumcompounds)、游离谷氨酸和K+含量与盐浓度的升高成正相关。在盐激条件下 ,菌株A1细胞内的QAC、游离谷氨酸和K+含量急剧增加 ,当外界的盐浓度突然从 0 .1molL- 1增加到 1 .0molL- 1时 ,其细胞内的QAC和游离谷氨酸含量在 40分钟内分别增加了 4.9倍和 2 .1倍。

耐盐(CaCl_2)皂素废水降解菌的分离及特性

从湖北省某皂素生产废水池底污泥中分离出2株耐高盐（CaCl2）皂素废水降解菌，编号分别为B723—1和B723—3，并进行菌株的鉴定和生长特性以及不同盐度迫胁下胞内游离氨基酸、蛋白质、膜的相对透性的研究，结果发现：（1）菌株B723—1与扩展短杆菌的同源性为98．0％～99．0％，B723—3与松鼠葡萄球菌的同源性为98．0％～99．0％：（2）两菌株均能在0．0％～9．0％CaCl2范围内生长良好；（3）菌株B723—1和B723—3的适宜生长温度分别是20～35oC和25～37oC，两者均在pH7．0～10．0生长；（4）当耐盐菌株受到1．8％、3．6％、5．4％和9．0％CaCl2盐迫45min时，其胞内会迅速积累大量氨基酸来平衡外界的高盐渗透压，且其胞内蛋白质含量均高于对照组（未受盐迫），而其膜的相对通透性低于非耐盐菌株．图4表1参11.

耐盐菌的筛选及在裙带菜加工尾水中的应用

目的筛选应用于裙带菜盐渍加工尾水处理的耐盐菌。方法以裙带菜盐渍加工尾水为培养基,根据CODMn去除率、甘露醇去除率以及生物量筛选出4株耐盐菌株。将这4株菌株分别应用于裙带菜盐渍加工尾水中,以CODMn去除率为主要指标测定72 h生长曲线,优选出各菌株的最佳培养时间。然后将这4株菌株混合应用于裙带菜盐渍加工尾水,确定最佳接种量和培养时间。结果经鉴定4株菌株分别为二尖梅奇酵母菌(Metschnikowiabicuspidata)、鞘氨醇菌(Sphingomonas)、胶红酵母菌(Rhodotorulamucilaginosa)、盐单胞菌(Cobetia)。各菌株对裙带菜加工尾水处理后CODMn去除率均在48h后达到最大值,去除率分别为84.90%、77.40%、79.20%、70.80%。4种混合菌株在28℃、150 r/min摇床反应条件下的最佳接种量为3%,最佳培养时间为60 h, CODMn去除率达到83.49%。结论本研究中筛选出的耐盐菌株有效的降低了裙带菜漂烫尾水的CODMn,对于实际应用有重要意义。

大豆凝乳菌株筛选及其蛋白酶性质的研究

从我国南方白腐乳样品中分离出2株具有豆乳凝乳作用的耐盐菌株DH1和JS3，镜检及生理生化实验测定初步判断为短杆菌属，在40℃及近中性的条件下，2菌株均可在4.5h内凝固豆乳。DH1在添加豆浆的改良肉汤培养基中培养60h后生物量可达1.2g／L，而JS3的生物量在75h时达到1.9g／L，进一步研究表明在适宜的发酵条件下，DH1生长到60h时蛋白酶活力为250U／mL，而JS3生长到65h时蛋白酶活力达到192U／mL。2株菌所产蛋白酶的适宜作用pH范围为7.0左右，温度范围为35～45℃，表明其所产蛋白酶属于中性蛋白酶的范畴。

具有脱毛性能的蛋白酶产生菌的筛选

从富含蛋白质的泥土样中筛选到耐盐和耐碱蛋白酶产生菌各一株。研究表明：两株菌（其中耐盐菌的ＮａＣｌ耐受高浓度为１０％）均可在饱和石灰水中生长，并且产生的蛋白酶在ｐＨ７～１１范围内稳定，且具较好脱毛性能。

同步脱氮除硫菌的筛选鉴定及其生长特性研究

为促进反硝化脱硫工艺的工程化应用,从稳定运行的反硝化脱硫UASB中筛选出2株高活性自养反硝化菌H3和H7,并对其进行了鉴定和生长及反硝化特性的研究。结果表明,2株菌均为革兰氏阴性菌,16S r DNA序列分析表明,分别与Pseudomonas stutzeri CONC12和Pseudomonas stutzeri 19smn4相似性为99.6%和98.9%。结合生理生化特性和16S r DNA序列分析,确定两菌株都为Pseudomonas stutzeri。对两菌株的生长和反硝化特性研究表明,菌株H3和H7的生长最适起始p H为6.94和6.88,最适反硝化p H分别为6.77和6.56。H3和H7的最适生长温度为30.4℃和30.6℃,最适反硝化温度分别为31.4℃和31.2℃,两株菌种都为非耐盐菌株。

一株耐高温高矿化度的芽孢杆菌CQ11及其对原油的乳化和降解性能

以高温高盐油藏环境中筛选出的一株芽孢杆菌Bacillus kokeshiiformis CQ11为对象,研究该菌株的耐盐、耐温以及对酸碱的耐受性;研究该菌株产生的乳化剂的特性,以及它对原油的作用特点.结果表明:该菌株能够在盐度4%-8%、p H 7-9、温度45-65℃环境中良好生长,它产生的糖蛋白类生物乳化剂具有乳化活性高,能耐受一定的高温,不受高盐、酸碱影响的特性.菌株CQ11的生长特性和产生的生物乳化剂与Geobacillus属的更为相似.该菌株具有高效乳化原油的应用潜力,可以应用于高温高盐油藏微生物提高石油采收率.

青海湖耐盐微生物分离及对盐碱降解率的研究

为了合理改良和开发利用盐碱地资源,研究耐盐微生物对盐碱降解的作用,试验采用纯化分离法、菌株耐盐碱度和降盐降碱率测定法对青海湖水样中的菌种进行耐盐微生物的分离及降盐降碱特性研究,最后对菌株RM3与RM25 16S r DNA序列进行测定。结果表明：纯化分离后获得43株菌,其中细菌31株、真菌7株、放线菌5株;菌株RM1、RM2＇、RM3、RM8、RM14、RM25、RM40可在氯化钠浓度为100 g/L的培养基中生长,属于中度嗜盐微生物,分离到4株嗜碱菌RM3、RM8、RM14、RM25;菌株RM3的降盐率和RM25的降碱率最高,降盐率达到17.30%,降碱率达到7.60%;对菌株RM3与RM25 16S r DNA序列进行测定显示,RM3属于芽孢杆菌属,RM25属于嗜盐单胞菌属。说明青海湖部分耐盐菌具有降盐、降碱特性。