耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌感染预测神经网络模型的构建及应用

目的研究耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CRAB)感染预测神经网络模型的构建及应用。方法回顾性分析医院从2019年2月~2022年2月收治的286例鲍曼不动杆菌(AB)感染的住院患者病历资料,根据耐药性分为观察组(CRAB感染)92例及对照组(碳青霉烯类抗生素敏感AB感染)194例。比较两组患者的一般资料以及临床治疗情况。通过单因素分析、多因素Logistic回归分析明确CRAB感染的影响因素。采用Logistic回归分析以及神经网络模型分析CRAB与各项影响因素的关系,构建预测评估模型。结果单因素分析发现,性别、年龄、BMI以及基础疾病均和CRAB感染无关(P均>0.05),使用呼吸机、碳青霉烯类抗生素、替加环素以及使用抗菌药物时间、入住ICU时间均和CRAB感染有关(P均<0.05)。经多因素Logistic回归分析显示,使用呼吸机、碳青霉烯类抗生素、替加环素以及使用抗菌药物时间、入住ICU时间均是CRAB感染的危险因素(P均<0.05)。将“1-特异性”作为横坐标,以“灵敏度”作为纵坐标,进行ROC曲线的绘制,其中ROC曲线下面积为0.879,95%CI(0.572~0.894),P<0.001,可见该模型预测效果较佳。结论CRAB感染的危险因素较多,包括使用呼吸机、使用碳青霉烯类抗生素、使用替加环素等,且随着使用抗菌药物时间以及入住ICU时间的增加,CRAB感染风险增加。其中,神经网络模型对CRAB感染的预测能力较佳。

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌种群结构和耐药机制研究

耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)是临床常见的耐药菌之一。本研究对88株全国49家医院收集的CRKP菌株进行碳青霉烯类耐药基因检测,其中65株(73.9%)检出bla_(KPC)类基因(64株检出bla_(KPC-2)、1株检出bla_(KPC-3))、9株(10.2%)检出bla_(NDM)类基因(均为bla_(NDM-1))、7株(8.0%)检出bla_(IMP)类基因(均为bla_(IMP-4))。通过多位点序列分型(multi-locus sequence typing,MLST)将88株CRKP分为25个MLST型,其中ST11型为优势型别,包含48株菌。88株CRKP通过脉冲场凝胶电泳(pulsed field gel electrophoresis,PFGE)分为79个PFGE型,呈现高度多态性。本研究揭示了我国blaKPC-2阳性CRKP菌株存在克隆化现象,存在ST11型流行克隆;而bla_(NDM-1)和bla_(IMP-4)阳性CRKP菌株分子型别多态性大,还没形成流行克隆。需要密切监测并采取措施控制携带blaKPC-2基因的ST11型CRKP的传播扩散。

区域性耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌耐药基因型的分析

目的:分析区域耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(carbapenem resistant Klebsiella pneumoniae,CR-KPN)的耐药性及耐药基因型。方法:筛选黑龙江省医院2018年1月—2020年12月临床分离的菌株,通过BD Phoenix~(TM)-100全自动细菌鉴定、药敏系统细菌鉴定和药敏试验,改良碳青霉烯灭活试验(mCIM)表型筛查CR-KPN36株,分析CR-KPN的临床分布特点、耐药特性及耐药基因型。结果:医院分离的CR-KPN主要来源于神经外科、ICU、康复科等,除氨基糖苷类和四环素类抗生素有一定抑制作用外,一、二、三、四代头孢菌素和碳青霉素类抗生素等β-内酰胺类抗生素耐药率接近100%,主要携带blaKPC基因型(97.22%)。结论:CR-KPN临床检出逐年增加,其耐药性强,临床抗感染难道大,需加强病原菌监测,并进行耐药基因检测,指导区域临床合理使用抗菌药物,做好院感防控。

基于全基因组测序的耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌耐药基因、毒力因子及同源性分析

目的通过应用全基因组测序(whole genome sequencing,WGS)技术分析某三级医疗机构耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(carbapenem-resistant Acinetobacter baumannii,CRAB)的耐药基因、毒力因子及同源性。方法收集该院2020年1月至3月重症监护病房(Intensive care unit,ICU)、神经外科分离的11株医院感染CRAB菌株,通过二代测序平台进行全基因组测序,应用基因组流行病学中心(Center for genomic epidemiology,CGE)ResFinder 4.0软件分析其耐药基因型,并应用MORPHEUS在线制作热图,应用毒力因子数据库(virulence factors of pathogenic bacteria,VFDB)VFanalyzer软件筛选毒力因子,应用MLST软件检测菌株的ST型,应用Kaptive软件检测荚膜型,应用CSI Phylogeny 1.4软件及FigTree v1.4.4软件构建最大似然树(maximum likelihood tree,MLT)以分析其同源性。结果11株CRAB对亚胺培南、美罗培南、头孢菌素、环丙沙星均呈现耐药,而对阿米卡星、左氧氟沙星耐药的菌株株数较少。11株CRAB共检测出18种耐药基因,11株同时携带碳青霉烯酶耐药基因bla_(OXA-23)和bla_(OXA-66),β-内酰胺酶耐药基因以bla_(TEM-1D)和bla_(ADC-25)为主,大部分菌株携带多种外排泵相关耐药基因及抗菌药物修饰酶耐药基因。11株CRAB均携带多种毒力因子,包括外膜孔蛋白、脂多糖、生物膜、外排泵、磷脂酶和效应蛋白等,如OmpA、Lps、Csu、Pga、Ade、Plc、Bas、Bau、Ent、Hem、Aba、Bfm、Pbp和Kat等。11株CRAB均为ST2-K22型,同源性分析结果显示C组内同源性关系相近,存在院内传播的可能。结论该院CRAB的耐药性、毒力特征复杂多样,同源性分析显示该院存在1种优势克隆株,该克隆株有医院内传播的风险。

鲍曼不动杆菌对耐碳青霉烯类抗生素耐药机制研究

目的:探讨鲍曼不动杆菌(CRAB)耐碳青霉烯类抗生素的机制,为临床选择抗生素提供合理意见,同时为新药开发提供参考。方法:采用琼脂纸片扩散法(K-B法)及聚合酶链反应(PCR)法从78株广泛耐药鲍曼不动杆菌中筛选出8株仅对多黏菌素敏感、1株全敏感的临床株。采用PAβN外排泵抑制试验检测其外排泵表型。PCR扩增耐药基因,并对阳性产物进行双向测序分析,确定其基因型。结果:CRAB的耐药性非常严重,对12种抗菌药物中的9种均耐药(耐药率>90%),其中对哌拉西林、头孢他啶、哌拉西林-他唑巴坦和美洛培南的耐药率均为100.0%。结论:鲍曼不动杆菌对碳青霉烯抗生素具有较高的耐药性,应加强对该类抗菌药使用的监控。

急性白血病患儿并发耐碳青霉烯类抗生素败血症的临床特点

目的研究儿童急性白血病发生耐碳青霉烯类抗生素败血症的临床表现特点、病原菌分布、合并其他感染部位、治疗及预后，为临床合理使用抗生素提供参考依据。方法回顾性分析2011年12月至2015年9月在北京儿童医院血液肿瘤中心住院的45例急性白血病合并革兰阴性菌败血症患儿，药敏结果提示碳青霉烯类抗生素耐药，分析其临床资料及药敏试验结果。结果45例患儿均有发热，其中有8例患儿持续发热，37例患儿发热天数为1—27d，平均（6．1±5．2）d。45例患儿中26例感染发生于中性粒细胞缺乏阶段，中性粒细胞绝对值〈0．5×10^9／L，中性粒细胞缺乏时间2～79d，平均（15．2±16．2）d。中性粒细缺乏组发热持续时间平均（7．5±5．8）d，不伴中性粒细缺乏组，发热持续时间平均（3．7±2．5）d，两组比较差异有统计学意义（P=0．011）。45例患儿中有23例同时伴有其他部位感染，感染灶以肺部、消化道、口腔及肛周为主。全部患儿送检血培养标本总量711份，其中耐碳青霉烯类抗生素的耐药菌共162株，耐药菌标本中以铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、阴沟肠杆菌及大肠埃希菌为主要致病菌。45例中36例抗感染治疗有效，9例抗感染治疗无效（死亡及放弃）。结论耐碳青霉烯类抗生素败血症的革兰阴性菌以铜绿假单胞菌、肺炎克雷伯杆菌、阴沟肠杆菌及大肠埃希菌为主要致病菌。中性粒细胞缺乏是影响抗感染治疗转归的重要因素。

碳青霉烯类抗生素耐药铜绿假单胞菌的体外联合药敏研究

目的评价环丙沙星(CIP)分别与头孢哌酮/舒巴坦(CFS)、哌拉西林/三唑巴坦(TZP)联合用药对临床分离获得的碳青霉烯类抗生素耐药的铜绿假单胞菌(CRPA)的体外抑菌作用。方法采用棋盘法设计,琼脂平板稀释法测定抗菌药物对38株临床分离的CRPA的最低抑菌浓度(MIC),并计算抑菌指数(FIC指数)判断联合抑菌效应。结果 CIP与CFS联用后,5.3%为协同作用,81.5%为相加作用,13.2%为无关作用,没有拮抗作用;CIP与TZP联用后,7.9%为协同作用,73.7%为相加作用,18.4%为无关作用,没有拮抗作用。上述药物联用后,各药MIC50均明显降低,浓度-累积抑菌率曲线均表现为左移。结论 CIP分别与CFS、TZP联用对CRPA体外联合抗菌效应主要表现为协同和相加作用。

耐碳青霉烯类抗生素细菌感染的药物治疗研究进展

在临床上细菌感染的治疗主要为药物治疗,药物主要采用耐碳青霉烯类抗生素,然而却有多黏菌素、β-内酰胺酶抑制、氨基糖苷、头孢、四环素等多种类型。近些年来很多候选药物或应用潜力较好的药物大量出现,比如ACHN-975、murepavadin、SPR741、FADDI-287、eravacycline、plazomicin、BAL30027、cefidercol、AAI101/头孢吡肟、亚胺培南/relebactam/西司他汀、头孢洛扎/他唑巴坦、阿维巴坦/头孢洛林、阿维巴坦/氨曲南、头孢吡肟/zidebactam、vaborbactam/美罗培南、头孢吡肟他唑巴坦、阿维巴坦/头孢他啶等,以便更好地治疗细菌感染性疾病。本文对细菌感染治疗中耐碳青霉烯类抗生素的应用情况和进展。

烧伤患者耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌携带质粒及其与菌株传播的相关性

目的探索烧伤患者耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CRKP)的质粒携带情况, 分析这些质粒与CRKP传播的相关性。方法采用回顾性观察性研究方法。取从陆军军医大学(第三军医大学)第一附属医院2017年1—12月收治的22例烧伤患者[男20例、女2例, 年龄(42±16)岁]临床相关标本中分离保存的26株CRKP, 对其进行编号。采用碱裂解法提取菌株质粒, 用核酸浓度检测仪测定浓度后行琼脂糖凝胶电泳观察条带情况, 并对质粒行大致分型。从各个质粒分型中选取最小编号CRKP携带质粒转化感受态大肠埃希菌TOP10菌株(以下简称TOP10菌株), 观察各转化菌株与TOP10菌株涂布含氨苄西林的固体LB培养基并过夜培养后生长情况, 计算成功转化比例。取成功转化TOP10菌株的最小编号CRKP携带质粒的转化菌株(以下简称最小成功转化菌株)与相应编号CRKP, 提取菌株携带质粒, 行琼脂糖凝胶电泳观察条带情况。取前述各成功转化菌株与TOP10菌株, 采用药物敏感试验检测菌株对17种临床常用抗生素的耐药性。取最小成功转化菌株携带质粒, 使用第二代测序技术进行基因测序, 并完成蛋白质编码基因预测、序列比对等生物信息分析, 后续根据耐药基因携带情况命名为pKP03-NDM1。根据最小成功转化菌株携带质粒全基因组序列, 采用PCR法及琼脂糖凝胶电泳与基因测序检测剩余25株CRKP携带质粒的新德里金属β-内酰胺酶-1(blaNDM-1)基因携带情况, 结合文献分析26株CRKP多位点序列分型中的ST分型。结果从26株CRKP中均提取到质粒, 质粒质量浓度为19.3~189.8 ng/μL。26株CRKP携带质粒的琼脂糖凝胶电泳均可见2 500 bp以上条带, 可大致分为A、B、C、D、E、F型6个型别。过夜培养后, 在含氨苄西林的固体LB培养基上, 未见A、B、D、E型CRKP携带质粒转化TOP10菌株或单纯TOP10菌株菌落生长, 可见3号CRKP携带的C型质粒和15号CRKP携带的F型质粒转化TOP10菌株大量菌落生长(转化菌株被分别命名为TOP10-pKP03、TOP10-pKP15), 成功转化比例为1/3。TOP10-pKP03携带质粒琼脂糖凝胶电泳图仅表现为1个条带, 大小与3号CRKP携带质粒最大的条带一致。TOP10菌株对所检测的17种临床常用抗生素全敏感;TOP10-pKP03和TOP10-pKP15对青霉素类、头孢菌素类、碳青霉烯类抗生素耐药, 对单环β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类抗生素以及替加环素敏感。TOP10-pKP03携带质粒全长为41 190 bp, 该质粒携带blaNDM-1、bleMBL、T4SS、博来霉素抗性基因且包含接合转移元件、松弛酶等片段, 与从大肠埃希菌JN24中提取的质粒pJN24NDM1长度相同且核苷酸相似性为99%。从16株(61.5%)CRKP携带质粒中检测到了blaNDM-1基因, 该16株CRKP的ST型别中, ST11型11株, ST215型、ST260型、ST395型、ST2230型、新ST型各1株;不携带blaNDM-1基因的10株CRKP的ST型别中, ST11型8株, ST395型、ST2230型各1株。结论自烧伤患者CRKP中分离测序了一个高携带率的包含blaNDM-1基因的质粒pKP03-NDM1, 该质粒可能通过介导blaNDM-1基因在CRKP间以及CRKP和大肠埃希菌间的水平转移, 导致耐药性传播。

鲍曼不动杆菌对碳青霉烯类抗生素耐药分子特征的研究

目的对110株鲍曼不动杆菌临床分离株进行菌种鉴定,检测其对碳青霉烯类抗生素的耐药性,并在DNA水平对碳青霉烯酶进行分子鉴定。方法收集110株经VITEK-2鉴定的鲍曼不动杆菌,利用特异性引物sp2F、sp4F和sp4R通过PCR扩增法复检菌株;使用VITEK-2检测鲍曼不动杆菌对亚胺培南和美罗培南的药物敏感性;PCR法检测碳青霉烯酶基因,分析耐药基因型,并使用χ2检验分析碳青霉烯酶与耐药表型的相关性。结果 110株临床样本中96株确认为鲍曼不动杆菌,对亚胺培南和美罗培南的耐药率达83.3%。blaTEM、blaOXA-23-like和blaOXA-51-like等3个碳青霉烯酶基因检测阳性,检出率在所有鲍曼不动杆菌中分别为77.1%、83.3%及100%,并以多基因联合耐药模式为主。blaOXA-23-like与耐药表型显著相关,其次为blaTEM。结论特异性PCR法鉴定鲍曼不动杆菌快速、准确。鲍曼不动杆菌临床分离株对碳青霉烯类抗生素耐药性高,主要由碳青霉烯酶blaOXA-23-like和blaTEM引起。

5种β-内酰胺酶抑制剂复合制剂对耐碳青酶烯类抗生素的体外抗菌活性

目的 研究5种β-内酰胺酶抑制剂复合制剂(BLIC)对耐碳青霉烯类抗生素菌(RCAB)的体外抗菌活性。方法 采用K-B扩散法测定31株RCAB临床分离株(嗜麦芽窄食单胞菌10株，不动杆菌6株，铜绿假单胞菌6株，脑膜败血性黄杆菌4株，假单胞菌属3株，普罗威登斯菌属2株)的体外抗菌活性。结果 在6种RCAB，SCF对脑膜败血性黄杆菌、不动杆菌和嗜麦芽窄食单胞菌的耐药率分别为0．0％、10．0％和33.3％，TIM和TZP对假单胞菌属的耐药率均为33.3％，AMC对脑膜败血性黄杆菌的耐药率为50．0％，其它BLIC对RCAB的耐药率均高于66．7％。结论 TIM和TZP是对假单胞菌属．SCF是对假单胞菌属外的RCAB有效抗菌药物；普罗威登斯菌属和铜绿假单胞菌对5种BUC的耐药最严重。

感染耐碳青霉烯类抗生素的肺炎克雷伯菌患者死亡危险因素分析

目的探讨感染对碳青霉烯类抗生素耐药的肺炎克雷伯菌(CRKP)患者的死亡危险因素。方法回顾性分析无锡市第二人民医院2012年1月—2015年12月期间住院的70例感染CRKP患者的病例资料。通过χ~2检验等方法确定CRKP产生的危险因素,通过logistic回归确定CRKP感染患者死亡的危险因素。结果 CRKP组患者急性生理与慢性健康(APACHEⅡ)评分、呼吸道感染、机械通气、重大手术、头孢哌酮/舒巴坦钠、入住ICU的比例明显高于对碳青霉烯类抗生素敏感的肺炎克雷伯菌(CSKP)组患者(均P<0.05)。单因素logistic回归分析发现,呼吸道感染、重大手术、机械通气、头孢哌酮/舒巴坦钠、入住ICU是CRKP感染患者死亡的危险因素(P<0.05)。多因素logistic回归分析发现,头孢哌酮/舒巴坦钠是CRKP感染患者死亡的独立危险因素。结论 CRKP感染患者死亡的危险因素为头孢哌酮/舒巴坦钠。因此避免或减少上述危险因素是降低CRKP感染患者死亡率的有效方法之一。

耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌血流感染患者危险因素及预后

目的探讨住院患者血流感染耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌（CRAB）的危险因素及预后。方法采用病例对照研究,回顾性收集某院2010—2013年CRAB血流感染患者163例,并以同期68例对碳青霉烯类敏感的鲍曼不动杆菌（CSAB）血流感染患者作为对照,进行危险因素及预后分析。结果 CRAB血流感染的独立危险因素是感染前入住重症监护病房（ICU）[OR及OR95%CI：1.27（5.55-22.89）]及入住过急诊室[OR及OR95%CI：3.57（1.67-7.62）]。鲍曼不动杆菌（AB）血流感染患者28 d生存率CRAB为66.17%,而CSAB为96.95%,CRAB组患者的生存率低于CSAB组（χ^2=15.71,P〈0.001）。影响AB血流感染预后的独立危险因素包括感染CRAB（HR95%CI：3.01-67.28）、血液病（HR95%CI：3.77-25.97）、心功能不全（HR95%CI：2.10-20.41）、入住ICU（HR95%CI：1.01-5.28）及年龄（HR95%CI：1.01-1.04）。结论感染前入住ICU以及入住过急诊室是CRAB血流感染的危险因素,CRAB血流感染是影响患者预后的危险因素。

河南省某医院耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌的临床分布及耐药谱

目的了解耐碳青霉烯类革兰阴性杆菌(CR-GNB)的临床分布及其耐药特征,为指导临床抗菌药物的合理使用提供依据。方法收集2017年1月—2018年10月某院临床分离的CR-GNB,使用WHONET 5.6软件进行统计学分析。结果共收集CR-GNB 9506株,其中耐碳青霉烯类抗生素鲍曼不动杆菌(CRAB)3879株(40.18%),耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CRKP)3602株(37.89%),耐碳青霉烯类抗生素铜绿假单胞菌(CRPA)1322株(13.91%),耐碳青霉烯类抗生素大肠埃希菌(CREC)334株(3.51%)。CR-GNB主要分布在ICU(6340株,66.69%),其次是呼吸内科(751株,7.90%);以呼吸道标本来源的菌株最多(6614株,69.58%),其次是血标本(800株,8.42%)。四种主要的CR-GNB均对常见抗菌药物普遍耐药,其中CRPA仅对多粘菌素B、阿米卡星较敏感,敏感率分别为99.39%、74.18%;CRAB、CRKP对替加环素、多粘菌素B、米诺环素较为敏感,敏感率为60.30%~99.66%;CREC对替加环素、多粘菌素B、阿米卡星、米诺环素较为敏感,敏感率为66.49%~99.13%。结论CR-GNB耐药情况严重,特别是ICU分离株,临床医生应个体化制定更为合理的抗感染治疗方案,加强感染控制措施的落实,减少包括CR-GNB在内的多重耐药菌的产生,并控制其在医院内的传播。

62株耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌的同源性分析

目的了解某院住院患者分离的耐碳青霉烯类鲍曼不动杆菌(CRAB)同源性,为预防CRAB医院传播提供依据。方法检测2015年8月—2016年11月该院住院患者各类临床标本分离的62株CRAB药敏结果,利用脉冲场凝胶电泳(PFGE)分析同源性及其流行特征。结果 62株CRAB主要来自痰标本(占88.71%),对头孢他啶、头孢吡肟、亚胺培南、美罗培南、环丙沙星均耐药,对左氧氟沙星的耐药率(25.81%)最低。62株CRAB分为14个不同的型别,分别为A^N型,其中B、D、E、J和M型别仅包含1株菌,其中F型别包含5个亚型,A、G、H和K型别均有3个亚型,C和I型各有2个亚型。对主要的克隆株临床资料进行分析,32株菌(占51.61%)来自重症监护病房(ICU),另有12株菌(占19.35%)分离患者曾入住ICU。结论医院内流行的鲍曼不动杆菌存在外部带入和内部传播两种形式,需加大对其感染控制力度。

烧伤患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染的环境追踪研究

目的研究烧伤患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)感染与环境菌株的同源关系,为烧伤患者CRKP感染的防治提供科学依据。方法前瞻性监测某院烧伤科重症监护病房(ICU)2020年6—12月的CRKP感染患者,进行临床标本与环境标本采样,通过Compact VITEK 2全自动微生物分析仪进行菌株鉴定和药物敏感试验。采用脉冲场凝胶电泳(PFGE)和多位点序列分型(MLST)进行菌株同源性分析,并检测毒力基因、荚膜血清型基因携带情况。结果共有4例烧伤患者发生CRKP感染,2株分离自创面分泌物,2株分离自血。采集环境标本152份,经细菌鉴定和药物敏感试验,获得CRKP菌株共15株。通过PFGE分析,经聚类分析获得结果为A~G 7个聚类组,1号患者的血标本、2号患者的血标本及外环境标本及3号患者的创面分泌物及外环境标本具有同源性,为同一型别A型。将A~G型别的菌株进行MLST分析,结果分别得到A~G型为ST11、ST35、ST1、ST37、ST2929、ST23、ST17。对15株CRKP菌株进行毒力基因检测,5株K57型,ST型别为ST35、ST37和ST17。结论烧伤患者环境CRKP检出率高,通过对环境标本追踪发现与临床标本分离菌株具有同源性,说明有效控制环境污染有助于防控感染传播扩散。CRKP出现局部克隆株流行,可能合并高毒力,下一步应开展更大范围的监测。

碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌血流感染不同抗感染治疗方案的疗效与安全性

目的评价不同抗感染方案在治疗碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯杆菌(CRKP)血流感染中的疗效与安全性。方法2017年1月至2018年1月在浙江大学医学院附属第一医院诊断为CRKP血流感染的患者,根据不同药物治疗方案分为(1)美罗培南组:静脉滴注美罗培南2.0 g,每8小时1次,联合除替加环素和多黏菌素以外的其他药物,治疗时间超过72h者;(2)替加环素组:以替加环素为基础的联合治疗,替加环素剂量最低首剂200 mg,维持剂量100 mg每12小时1次,静脉滴注,根据临床需要联合其他抗菌药物(不包括多黏菌素B),治疗时间72 h以上者;(3)多黏菌素B挽救治疗组:符合替加环素组要求,替加环素治疗72~96 h,期间因临床需要加用多黏菌素B,并治疗72 h以上者,多黏菌素B剂量1.25 mg/kg每12小时1次,静脉滴注。分析3组患者的疗效和不良反应。结果86例患者纳入本研究,其中美罗培南组14例,替加环素组52例,多黏菌素B挽救治疗组20例。86例患者首次血培养的CRKP均对替加环素和多黏菌素B敏感,2例患者替加环素治疗期间出现对替加环素耐药。所有CRKP均对美罗培南耐药。以首次血培养阳性标本留取日起计算28 d病死率,美罗培南组(13/14)高于替加环素组(61.5%)和多黏菌素B挽救治疗组(12/20)(P<0.01),替加环素组与多黏菌素B挽救治疗组间28 d病死率差异无统计学意义(χ^2=0.014,P>0.05)。肝功能损害替加环素组2例(3.8%),多黏菌素B挽救治疗组1例(1/20),差异无统计学意义(P>0.05)。肾功能损害替加环素组0例,多黏菌素B挽救治疗组1例(1/20),差异无统计学意义(P>0.05)。结论以美罗培南为基础的抗感染治疗方案对CRKP所致血流感染疗效差;使用以替加环素为基础的联合治疗病死率达60%;多黏菌素B未能改善替加环素初始疗效不佳患者的结局,联合多黏菌素B治疗未明显加重肾功能损害。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌耐药分析及耐药基因和多位点序列分析

目的分析耐碳青霉烯类抗生素肺炎克雷伯菌(CRKP)耐药性,并探讨其耐药机制及同源性。方法收集2018年2月-2019年2月本院临床送检的各类标本中分离的非重复性CRKP,采用PCR扩增法扩增7种常见碳青霉烯酶基因,通过BLAST比对确定基因型;采用多位点序列分析(MLST)方法分析CRKP菌株7个管家基因,获得菌株的ST型。结果共分离CRKP 35株,35株CRKP对青霉素类、碳青霉烯类、头霉素类、头孢霉素类、喹诺酮类类抗菌药物的耐药率较高,对阿米卡星(71.43%)、甲氧苄啶-磺胺甲恶唑(60.00%)和替加环素(77.14%)的耐药率较低。PCR扩增7种常见碳青霉烯酶基因,35株均扩增出KPC基因阳性条带,测序确认44株CRKP全部携带blaKPC-2基因,未发现blaNDM-1、blaIMP-4、blaNDM-1、blaVIM和blaOXA-48基因。35株CRKP菌株MLST分型结果均为ST11型。结论本院分离的CRKP均为多重耐药,为MLST分型ST11型,主要耐药机制为产KPC-2型碳青霉烯酶。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌感染危险因素的Meta分析

目的分析耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)医院感染的危险因素。方法检索Pubmed、Medline、Web of Science、CNKI、万方、维普、中国生物医学文献等,并辅以文献追溯和手工检索,检索日期从建库至2017年7月1日止公开发表的文献,采用Review maneger5.0软件对纳入的文献数据进行分析,NOS法评价各项研究证据等级,并用Egger法评价发表偏倚。结果共纳入14篇研究,其中英文11篇,中文3篇,研究总样本量为2392例;Meta分析CRKP感染危险因素的比值比(OR)值及其95%CI:碳青霉烯类药物使用5.76(4.20,7.90),ICU 2.17(1.56,3.01),抗菌药物的使用2.54(1.80,3.57),定植9.18(2.82,29.92),侵入性医疗操作3.53(2.57,4.85),手术5.79(2.27,14.77),住院时间4.83(1.64,14.26),机械通气4.65(1.91,11.30),基础疾病3.99(0.24,65.34),使用导尿管9.69(0.24,398.28)。结论碳青霉烯类抗生素的大量使用、入住ICU、抗菌药物的使用、定植、手术、侵入性医疗操作、住院时间、机械通气是感染CRKP的高危因素。

耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌对替加环素敏感性及不同检测方法的差异性研究

目的了解碳青霉烯类抗生素耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)的体外对于替加环素敏感性,以及不同药敏检测方法之间存在的差异。方法选择临床分离的耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌147株,分别采用肉汤稀释法、Etest纸片法、仪器法(N334药敏卡)、纸片法(K-B)和药敏纸片联合复敏液法检测其体外对替加环素的敏感性,分析5种药敏检测方法所存在的差异。结果147株耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌微量肉汤稀释法、Etest法、仪器法、KB法和KB联合复敏液法的敏感率分别为98.6%、100.0%、71.4%、49.7%和95.2%,其中Etest法和KB联合复敏液法与参考方法具有较高一致性,而仪器法和KB法敏感率显著下降(P<0.01);4种方法的误差分析表明,Etest法和KB联合复敏液法符合率较高。仪器法标准符合(CA)、重大错误(ME)和小错误(mE)分别为71.43%、9.52%和19.05%,KB法CA和ME分别为49.66%和48.98%,均超出标准。结论本地区CRKP菌株对于替加环素具有较高敏感性,Etest和KB联合复敏液法相对参考方法具有较高一致性和准确性,适合在临床实验室推广。