中药饮片污染耐胆盐革兰阴性菌的考察

目的:考察中药饮片耐胆盐革兰阴性菌的污染状况。方法:依据2015年版《中国药典》微生物限度检查法草案中耐胆盐革兰阴性菌检查方法对中药饮片耐胆盐革兰阴性菌进行定性检查,对阳性样品进行定量检查,比较预培养2 h和不预培养两种方法对耐胆盐革兰阴性菌定量检出的差异。结果:通过对17个品种174批中药饮片的考察,结果显示中药饮片耐胆盐革兰阴性菌污染比较严重,达81.0%。按2015年版《中国药典》中药饮片耐胆盐革兰阴性菌标准来判断,16.1%不合格,且预培养2 h和不预培养两种方法检验结果没有显著差异(P>0.05)。结论:本研究可为2015年版《中国药典》中药饮片耐胆盐革兰阴性菌限度标准的制定提供参考依据。

中药饮片耐胆盐革兰阴性菌量化风险评估研究

目的建立中药饮片耐胆盐革兰阴性菌的量化风险评估方法。方法收集中国知网2012年1月1日至2021年12月31日耐胆盐革兰阴性菌数据,采用潜在失效模式和效应分析模型,从耐胆盐革兰阴性菌可能的种类、生物负载等角度进行分析,并将风险指标量化,评估风险等级。结果共纳入中药饮片品种53个(760批次)。穿心莲、两头尖、部分枸杞和部分麦冬饮片污染风险高(6.25%),红花、夏枯草和部分菊花饮片污染风险中等(4.69%),其余饮片污染风险低(89.06%)。枸杞等10个品种中药饮片中有7种(除枸杞、麦冬、菊花外)风险评估结果一致。结论建立的中药饮片耐胆盐革兰阴性菌的量化风险评估方法可行,为中药饮片的微生物控制提供了参考依据,是对当前中药饮片外源性污染物风险评估模型的补充。

不同品种根类中药饮片耐胆盐革兰阴性菌污染研究

该研究通过对8种根类饮片共计40份样本需氧菌总数计数(total aerobic microbial count,TAMC)、酵母、真菌总数计数(total yeast and mould count,TYMC),探讨不同作用类型根类中药饮片微生物污染状况;进一步评价样品耐胆盐革兰阴性菌污染载量,并运用革兰阴性杆菌生化鉴定系统对分离到的耐胆盐革兰阴性杆菌进行鉴定。结果显示,85%(34/40)的样品TAMC超过1 000 CFU·g^(-1),30%(12/40)的样品TYMC超过100 CFU·g^(-1);45%(18/40)的样品检出耐胆盐革兰阴性菌污染,7批样品检测结果 N>1 000 MPN·g^(-1),从13批样品中分离出阴沟肠杆菌、河生肠杆菌、创伤埃希氏菌、坂崎肠杆菌等16株耐胆盐革兰阴性杆菌,其中阴沟肠杆菌是丹参样品中分离到的优势菌;河生肠杆菌是麦冬样品中分离到的优势菌;假结核耶尔森菌是党参样品中分离到的优势菌。上述研究结果表明,武汉市场中根类饮片存在较严重的微生物污染,微生物种类对药材成分具有一定的选择特异性,依据不同作用类型饮片所含化学成分有针对性地鉴定控制菌类型、制定控制菌检验限度,对提高中药饮片的安全使用具有重要意义。

453例胆道感染胆汁培养阳性患者病原菌分布及影响因素、耐药性分析

目的探讨胆道感染胆汁培养阳性患者病原菌分布及其影响因素、耐药特征。方法回顾性分析453例胆道感染胆汁培养阳性患者的病原菌分布及耐药情况,收集并整理患者年龄、性别、糖尿病、高血压、心脏病、高脂血症、既往胆道手术史、术前抗生素使用时间、疾病性质等临床资料,探讨其是否影响胆道感染病原菌分布。结果 453例患者胆汁中共分离出476株病原菌,其中革兰阴性菌380株(79.83%)、革兰阳性菌88株(18.49%)、真菌8株(1.68%)。主要革兰阴性菌对氨苄西林、头孢唑林等药物耐药率高,对哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类抗生素、庆大霉素等药物较敏感。主要革兰阳性菌对青霉素G、头孢西丁、庆大霉素、妥布霉素、阿米卡星、红霉素、克林霉素、夫西地酸、利福平、甲胺苄啶等药物耐药率较高,对庆大霉素(高浓度)、糖肽类抗生素、利奈唑胺、奎奴普丁等药物较敏感。年龄、高血压病、术前抗生素使用时间是胆道感染病原菌分布的影响因素(P<0.05)。结论胆道感染胆汁培养阳性患者病原菌中,革兰阴性菌居多,年龄、高血压病、术前抗生素使用时间是胆道感染病原菌分布的影响因素,临床可参考影响因素先进行经验性用药,此后再根据细菌学检查结果调整治疗方案。

《美国药典》35版附录“<62>非无菌产品微生物检查:控制菌检查法”中两个问题的探讨

目的:探讨耐胆盐革兰阴性菌检查中,胰酪大豆胨肉汤预培养是否能达到对菌体只复苏不增殖的目的;肠道增菌肉汤颜色指示特性的必要性。方法:采用不同菌株和不同厂家培养基,依据《美国药典》35版方法进行对比考查。结果:胰酪大豆胨肉汤按规定的最短预培养时间培养后菌体有增殖;不同厂家肠道增菌肉汤培养基的颜色指示特性具有不一致性。结论:微生物经胰酪大豆胨肉汤预培养在复苏的同时菌数有所增加;肠道菌增菌肉汤无需观察颜色指示特性。

神经内科院内泌尿道感染病原学及耐药监测分析

目的研究一年半内神经内科院内泌尿道感染的菌群分布和药敏情况,为临床合理应用抗菌药物提供依据.方法回顾性分析2004年1月～2005年6月期间神经内科院内泌尿道感染的茵群分布和约敏情况.结果 249株病原菌中,革兰阳性菌121株,占48.59%,以屎肠球菌、粪肠球菌等为常见;革兰阴性菌93株,占37.35%,以大肠埃希菌为主;真菌35株,占14.06%以白色念珠菌为主.结论神经内科院内泌尿道感染病原菌正发生变迁,以阳性菌为主,念珠菌的感染明显升高,临床应重视病原学检查,及时调整治疗方案.

广西等地区9种中药饮片微生物污染状况分析

目的:分析广西等地区9种中药饮片的微生物污染现状,为中药饮片微生物限度检查项和限值的制定提供参考。方法:参考中国药典2015年版方法,测定中药饮片的需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌数、耐胆盐革兰阴性菌数并进行沙门菌的检查。结果:90批中药饮片的需氧菌总数的l g平均值为3.7,霉菌和酵母菌总数的l g平均值为1.7,耐热菌数的l g平均值为0.9,耐胆盐革兰阴性菌l g值均值为1.1,均未检出沙门菌;不同加工工艺和包装材质的饮片,其微生物污染水平差异有统计学意义(P<0.05)。结论:应根据不同炮制加工方式及给药途径分类建立微生物限度标准,引导中药饮片规范生产,逐步提高中药饮片的质量。

中药饮片蒲黄、柴胡和青箱子中微生物污染情况考察

目的:考察3种中药饮片蒲黄、柴胡和青箱子中微生物污染状况。方法:每种饮片选取10个批次,进行需氧菌数、霉菌和酵母菌总数、耐热菌数、耐胆盐革兰阴性菌数、大肠埃希菌、沙门菌等检测。结果:饮片中需氧菌、霉菌和酵母菌、耐热菌的负载量很高,77%的饮片检出耐胆盐革兰阴性菌,43%检出大肠埃希菌,未检出沙门菌。经鉴定,3种饮片耐热菌主要为芽孢杆菌,耐胆盐革兰阴性菌主要为γ-变形菌纲细菌。结论:中药饮片微生物污染状况严重,饮片的微生物限度标准亟待完善,饮片生产加工过程控制亟待加强。

30批中药饮片中检出5株非脱羧勒克菌

目的:对30批中药饮片中检出的5株非脱羧勒克菌进行分析,加强对该菌的认识。方法:按2015版《中国药典》征求意见稿的方法,检测30批中药饮片中需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数及控制菌大肠埃希菌;将检出疑似的大肠埃希菌进行分离纯化、革兰染色和用Vitek2-compact全自动细菌鉴定仪鉴定;将检出的非脱羧勒克菌加入到相应的增菌培养基后,按2010版《中国药典》检测大肠埃希菌、大肠菌群和按2015版《中国药典》征求意见稿的方法检测耐胆盐革兰阴性菌。结果:30批中药饮片中检出5株非脱羧勒克菌。非脱羧勒克菌形态和生化反应结果与大肠埃希菌相似。将检出的非脱羧勒克菌加入到相应的增菌培养基后,按2010版《中国药典》检测,结果未检出大肠菌群;而按2015版《中国药典》征求意见稿的方法检测,检出耐胆盐革兰阴性菌。结论:非脱羧勒克菌与大肠埃希菌易于混淆,在鉴别时要注意区分。按2015版《中国药典》征求意见稿的方法检测非脱羧勒克菌,其被认为是耐胆盐革兰阴性菌。

甘肃两种道地药材当归及党参中药饮片中微生物污染状况研究

目的:研究甘肃省市售的两种道地药材当归和党参中药饮片的微生物污染状况。方法:根据《中华人民共和国药典》(2015版)微生物相应的检查方法,对两种中药材饮片共计61批样品的需氧菌总数(total aerobic microbial count,TAMC)、酵母菌和霉菌总数(total combined yeasts and molds count,TYMC)、耐胆盐革兰阴性菌及沙门菌进行检查,初步了解市售当归、党参中药饮片的微生物负载量。结果:61批中药饮片样品的对数IgTAMC值介于2.05~6.30,IgTYMC值介于0.70~3.23,47.5%的样品检出耐胆盐革兰阴性菌,当归和党参饮片所有批次均未检出沙门菌。结论:中药饮片微生物污染状况严重,饮片的微生物限度标准亟待完善,饮片生产加工过程控制亟待加强。

八珍丸的中国药典2015年版微生物学检查结果分析与评价

目的：建立八珍丸微生物限度检查方法,并对其检验结果和污染菌进行分析。方法：采用中国药典2015年版微生物限度检查法对8家10批次的产品进行方法验证试验,用建立的方法对8家30批次的八珍丸进行微生物限度检查,细菌鉴定采用VITEK2全自动微生物鉴定系统和VITEK MS全自动微生物质谱鉴定系统。结果：需氧菌总数、霉菌和酵母菌总数验证中各菌的回收率均为0.5-2.0,大肠埃希菌检查验证组可检出大肠埃希菌,耐胆盐革兰阴性菌检查验证组可检出大肠埃希菌和铜绿假单胞菌,沙门菌检查验证组可检出沙门菌。样品主要污染的微生物是芽孢杆菌和其他根系微生物。结论：建立八珍丸的中国药典2015年版微生物限度检查方法,需氧菌总数采用培养基稀释法,霉菌和酵母菌总数采用常规法,大肠埃希菌检查、耐胆盐革兰阴性菌检查和沙门菌检查都采用直接接种法。30批样品的微生物限度检查结果均符合规定,污染的主要微生物为药材原料和环境中常见的芽孢杆菌等。

中国药典2015年版八珍胶囊和八珍片微生物限度检查与探讨

目的对八珍胶囊和八珍片微生物限度检查进行方法学验证并对检验结果和污染菌进行分析。方法八珍胶囊和八珍片采用中国药典2015年版微生物限度检查法进行方法验证,对6家31批次的八珍胶囊和八珍片进行微生物限度检查,细菌和酵母菌鉴定采用VITEK2全自动微生物鉴定系统。结果需氧菌总数、真菌和酵母菌总数验证中各菌的回收率均>0.5,大肠埃希菌检查、耐胆盐革兰阴性菌检查沙门菌检查各验证组均可检出阳性菌。污染的微生物主要是芽孢杆菌等药材原料和环境中常见的细菌和酵母菌。结论建立满足中国药典2015年版要求的八珍胶囊和八珍片的微生物限度检查方法,需氧菌总数采用培养基稀释法、真菌和酵母菌总数采用常规法,大肠埃希菌检查、耐胆盐革兰阴性菌检查和沙门菌检查(针对八珍胶囊)都采用直接接种法。31批样品的微生物限度检查结果均符合规定,污染的微生物主要为药材原料和环境中常见的芽孢杆菌等。

上海地区10种中药饮片微生物污染情况研究

目的考察上海地区生产的10种中药饮片微生物污染情况。方法参考《中国药典》2015年版第3公示稿微生物相关检查方法，对94份样品进行微生物计数、耐热菌计数和7种致病菌的检查，初步了解各类中药饮片的生物负载水平。结果样品需氧菌总数计数结果介于10-10^8CFU／g，霉菌和酵母菌总数计数结果介于10-10^7CFU／g，耐胆盐革兰阴性菌（MPN法）和耐热菌的检出率分别为22．3％（21／94）和76．6％（72／94），有1批样品检出大肠埃希菌（100〈N〈10^3MPN／g）。样品中均未检出沙门菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌、志贺氏菌（GB4789．5）和溶血性链球菌（GB4789．11）。按《欧洲药典》8．0版、《日本药典》16版和《美国药典》37版相关限度标准判断，本实验考察的中药饮片样品中微生物项目不合格率分别为5．3％、18．1％和23．4％。结论中药饮片极易受到多种微生物的污染，需要开展更深入的风险评估工作，完善中药饮片检验方法和评价标准，降低患者用药风险。

中药饮片微生物污染量调查分析

目的通过17个省市药检所在国内市场采购的151种2286批饮片样本收集检验,客观真实地反映当前国内中药饮片污染微生物情况,对中药饮片污染微生物的控制问题形成共识。方法获得国内饮片需氧菌总数(TAMC)、霉菌和酵母菌总数(TYMC)、耐热菌数及耐胆盐革兰阴性菌数的数量结果。参考国内外通行的微生物计数方法和标准控制限值,比较国内饮片与国外标准之间的关系。结果饮片中污染的微生物在不同类别间、同品种内部都呈现出较大的不确定性。煎煮类饮片污染微生物数量高于直接服用类饮片。比对不同国外计数标准,约3%煎煮类饮片不能满足EP/JP要求,17%煎煮类饮片不能满足USP要求;约5%直接服用饮片不能满足EP/JP要求,15%直接服用饮片不能满足USP要求。不能满足标准要求的饮片未呈现特定规律,大多为部分品种的部分批次。结论中药饮片污染微生物受限于品种采收加工等诸多影响因素,污染微生物具有高度的不确定性。目前按照国际共识,将饮片按其用途分为煎煮和直接服用两大类控制污染微生物的总量,是理想是较适宜的质控策略。随着中药材及中药饮片标准化水平的提高,饮片微生物质量控制水平也会得到提升。