环吡酮胺对耐药假丝酵母菌药物敏感性研究

目的研究环吡酮胺对耐药假丝酵母菌菌株的药物敏感情况。方法 2013年12月至2014年1月参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的M27-A3方案的微量液基稀释法,测定环吡酮胺对120株耐药性白假丝酵母菌和7株非白假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 (1)并没有因为菌株对其他抗真菌药物耐药而发生环吡酮胺MIC增加,相反在耐克霉唑组和耐咪康唑组还有环吡酮胺MIC值进一步降低的现象。(2)环吡酮胺在耐咪康唑组的MIC值要低于耐克霉唑、耐氟康唑、耐伊曲康唑组的MIC值。结论对于耐其他抗真菌药物的假丝酵母菌,可以选择使用环吡酮胺进行治疗。

两性霉素B对阴道耐药假丝酵母菌药物敏感研究

目的探讨两性霉素B对阴道内不同耐药真菌的药物敏感情况。方法 2015年于北京大学第一医院,参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的M27-A3方案的微量液基稀释法,测量两性霉素B对阴道假丝酵母菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)来源的120株耐药白假丝酵母菌、30株临床分离株和8株非白假丝酵母菌的最低抑菌浓度(MIC)。结果 (1)两性霉素B对耐唑类药物的白假丝酵母菌的MIC仍较低。(2)两性霉素B对耐伊曲康唑组的MIC与耐氟康唑组没有差别(中位数分别为1.52μg/m L、1.10μg/m L),低于耐咪康唑组、耐克霉唑组。结论两性霉素B在临床上可以用来治疗VVC,对伊曲康唑和氟康唑耐药的白假丝酵母菌造成的VVC更有应用前景。

舍他康唑对于耐药假丝酵母菌药物敏感性研究

目的研究耐药真菌对抗真菌药物舍他康唑的药物敏感情况。方法 2015年6-8月于北京大学第一医院,参照美国临床实验室标准化协会(National Committee for Clinical Laboratory Standards,CLSI)推荐的M27-A3方案的微量液基稀释法,测量舍他康唑、伊曲康唑、咪康唑、克霉唑和氟康唑5种抗真菌药物对临床分离的120株耐药白假丝酵母菌、120株耐药光滑假丝酵母菌、30株敏感白假丝酵母菌株的最低抑菌浓度(MIC)。结果 (1)舍他康唑对白假丝酵母菌各耐药组的MIC值均高于非耐药组。(2)舍他康唑对光滑假丝酵母菌各耐药组的抗菌效果优于白假丝酵母菌组。结论舍他康唑在临床上治疗耐药光滑假丝酵母菌有一定的应用前景。

鱼腥草素钠诱导临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡

目的观察鱼腥草素钠对临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡的影响。方法利用DAPI染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞核的形态;利用FITC-VAD-FMK染色观察耐药白假丝酵母菌生物膜细胞metacaspase活性;分别在JC-1染色和DCFH-DA染色下,采用流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;利用AnnexinⅤ-FITC/PI染色和流式细胞仪检测耐药白假丝酵母菌生物膜细胞的凋亡率。结果一定浓度的鱼腥草素钠作用下,临床耐药白假丝酵母菌生物膜细胞内ROS水平、生物膜细胞凋亡率、metacaspase酶活性明显升高,MMP水平明显降低,生物膜细胞核出现碎裂和皱缩。结论鱼腥草素钠能够诱导耐药白假丝酵母菌生物膜细胞凋亡。

穿心莲内酯联合氟康唑抗耐药白假丝酵母菌作用机制研究

目的探讨穿心莲内酯联合氟康唑抗耐药白假丝酵母菌作用及其机制。方法采用微量稀释法检测穿心莲内酯(AG)及联合氟康唑(FLC)对耐药白假丝酵母菌的MIC;采用罗丹明6G(Rh 6G)检测AG对耐药白假丝酵母菌CDR外排功能的影响;利用罗丹明123评估AG对耐药白假丝酵母菌MDR外排功能的影响;采用二氢罗丹明检测AG单用及联合FLC对耐药白假丝酵母菌活性氧(ROS)的影响;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AG联合FLC对耐药白假丝酵母菌外排泵相关基因CDR1、CDR2和MDR1表达的影响。结果 AG联合FLC抗耐药白假丝酵母菌呈相加作用;AG对CDR外排功能无影响;AG可抑制MDR外排功能;AG联合FLC能显著提高耐药白假丝酵母菌细胞ROS水平;AG与FLC联合作用于耐药白假丝酵母菌可下调CDR1和MDR1的表达量,上调CDR2的表达量。结论 AG联合FLC抗耐药白假丝酵母菌具有相加作用,其机制可能与抑制外排泵及相关基因表达,提高胞内ROS水平有关。