肺炎克雷伯菌江阴分离株抗菌药物耐药元件研究

目的:研究肺炎克雷伯菌江阴分离株抗菌药物耐药元件。方法:收集我院住院患者痰液标本中分离出的40株江阴地区各种耐药肺炎克雷伯菌,并检测菌株对抗菌药物的敏感性。结果:40株江阴地区各种耐药肺炎克雷伯菌对头孢类的耐药率为100%,但敏感率为0.00%;40株菌对于左氧氟沙星、环丙沙星等的敏感率为0.00%,但耐药率为100%。40株江阴地区各种耐药肺炎克雷伯菌均检测出β-内酰胺酶基因,总阳性率为100%。结论:本组40株肺炎克雷伯菌体携带有β-内酰胺酶基因,这也是对β-内酰胺类药物耐药的主要因素。

20株鲍氏不动杆菌获得性耐药元件检测与菌株亲缘关系研究

目的了解鲍氏不动杆菌携带的获得性耐药元件,以及菌株间的亲缘关系。方法收集2015年1-12月医院分离到的20株鲍氏不动杆菌,采用聚合酶链反应(PCR)及序列分析的方法分析31种β-内酰胺类药物获得性耐药基因和12种氨基糖苷类药物获得性耐药基因以及8种可移动遗传元件遗传标记,并对检测结果作样本聚类分析(UPGMA法)。结果本组菌对11种抗菌药物均耐药(100.0%),共检出4种β-内酰胺类药物获得性耐药基因和5种氨基糖苷类药物获得性耐药基因以及5种可移动遗传元件遗传标记,且阳性率较高;每株均能检出β-内酰胺类药物与氨基糖苷类药物获得性耐药基因及可移动遗传元件遗传标记;耐药元件检测结果共分为6种阳性模式;样本聚类分析提示,20株鲍氏不动杆菌呈明显的聚集性,其中2-5-7-8-9-10-13-15-17-20号株(共10株),11-12-16-19号株(共4株),1-4-6号株(共3株)为克隆传播。结论本组菌携带的β-内酰胺类和氨基糖苷类耐药基因和耐药表型一一对应,携带的可移动遗传元件是获得性耐药基因快速传播的原因,特定耐药元件的检测是研究细菌耐药性的一种实用方法。

多重耐药肺炎克雷伯菌支气管肺泡灌洗液分离株耐药元件检测分析

目的 分析1株多重耐药肺炎克雷伯菌耐药基因的存在状况及耐药机制.方法 采用聚合酶链反应（PCR）及序列分析的方法对2012年2月分离白苏州大学附属儿童医院儿科重症监护病房患儿支气管肺泡灌洗液中的1株多重耐药肺炎克雷伯菌进行β-内酰胺酶类、氨基糖苷类、喹诺酮类获得性耐药相关基因、膜孔蛋白基因ompK35、ompK36及PBP2编码基因检测.结果 该株多重耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类药物获得性耐药基因检出 TEM-1和SHV-1;氨基糖苷类药物获得性耐药基因检出 aac（6′）-I b,无16S rRNA甲基化酶基因检出;膜孔蛋白编码基因ompK35和ompK36均呈阴性;碳青霉烯类药物作用靶位PBP2编码基因测序与敏感株相比仅有9个同义突变,但氨基酸序列不变.与敏感株相比,该菌株无氟喹诺酮耐药决定区（QRDR）突变.结论 该株多重耐药肺炎克雷伯菌耐β-内酰胺类、氨基糖苷类及碳青霉烯类药物与细菌产2种β-内酰胺类获得性耐药基因、1种氨基糖苷类获得性耐药基因、膜孔蛋白基因缺陷和PBP2基因同义突变相关.

两所三级医院耐药鲍氏不动杆菌耐药元件检测研究

目的比较两所医院鲍氏不动杆菌临床分离株耐药表型及耐药元件的差异,了解两所医院鲍氏不动杆菌耐药表型及分子流行病学特性。方法收集2011年1-12月患者临床标本中分离的39株耐药鲍氏不动杆菌,其中A1~A19号株分离自浙江省宁波市第二医院(A院),B1~B20号株分离自江苏省无锡市人民医院(B院);先用16S^23SrDNA鲍氏不动杆菌种特异PCR扩增做菌种的分子鉴定,再采用聚合酶链反应(PCR)法分析33种β-内酰胺酶基因、8种氨基糖苷类修饰酶基因、6种16SrRNA甲基化酶基因、12种可移动遗传元件遗传标记、2种氟喹诺酮类药物作用靶位基因,测得结果作样本聚类分析(UPGMA法)。结果 A院菌株对氨基糖苷类药物仍有较高的敏感性,B院菌株对常用药物均耐药;A院19株菌株均检出β-内酰胺类药物获得性耐药基因、可移动遗传元件遗传标记以及氟喹诺酮类药物作用靶位基因均存在突变,只有14株菌株未检出氨基糖苷类药物获得性耐药基因;B院20株菌株均检出β-内酰胺类药物获得性耐药基因、氨基糖苷类药物获得性耐药基因、可移动遗传元件遗传标记以及氟喹诺酮类药物作用靶位基因均存在突变;两所医院菌株耐药元件检测结果的样本聚类分析显示:A、B两所医院的菌株因检出基因不同则分成两簇,A院的14株为同一克隆,而B院的20株为同一克隆。结论可移动遗传元件介导获得性耐药基因可在细菌间传播,两所医院菌株的耐药表型和基因型一一对应,A院5株菌的表型与B院20株菌相同,但获得性耐药基因检测结果不同。

多药耐药肺炎克雷伯菌耐药元件检测的样本聚类分析

目的：研究多药耐药肺炎克雷伯菌（MDRKP）的菌株亲缘性，为临床预防其感染提供参考依据。方法收集2008年8月－2010年5月浙江省杭州市和湖州市6所医院共47株 MDRKP ，进行102种耐药元件的 PCR 法检测，包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类、四环素、利福平与磺胺甲噁唑／甲氧苄啶药物耐药相关基因及可移动遗传元件，并对检测结果作样本聚类分析。结果47株 MDRKP 中共检出34种耐药元件，检出阳性率为2．1％～100．0％；样本聚类分析1、6和13～15号菌株为杭州市 A 医院的克隆传播；18～20号菌株为源自杭州市B 医院的克隆传播；29、32和31、33号菌株为杭州市 D 医院的克隆传播；35、37、38号菌株为湖州市 E 医院的克隆传播；39～42、45～47号菌株为杭州市 F 医院的克隆传播。结论对耐药元件检测结果进行样本聚类分析，是对跨地区和（或）跨年度的菌株进行亲缘关系研究的一种简捷方法，为追溯耐药菌传播途径提供了有效手段。

鲍氏不动杆菌获得性耐药元件检测及样本聚类分析

目的：探讨临床分离的20株鲍氏不动杆菌（ABA ）耐药性，研究其获得性耐药基因与可移动耐药元件的携带特点，为临床预防与治疗医院感染提供科学依据。方法20株ABA分离自2012年1月-2012年12月医院感染患者的临床标本，药敏试验采用K-B法；β-内酰胺类、氨基糖苷类获得性耐药基因和可移动耐药元件的遗传标记均采用PCR法；样本聚类分析采用UPGMA法。结果20株ABA对碳青霉烯类、头孢类、氨基糖苷类、氟喹诺酮类药物的耐药率均＞80．0％；ABA对碳青霉烯类、头孢类药物耐药与携带 blaT EM、blaA DC、blaOX A-23群、blaOXA-51群β-内酰胺酶基因相关；氨基糖苷类药物耐药与携带 aph（3′）-Ⅰ、aac（6′）-Ⅰ b氨基糖苷类修饰酶基因相关；并在国内首次检出 blaA DC-17型C类β-内酰胺酶基因；样本聚类分析显示，1～19、7～10～20、2～6～8～9～12～14～15～17～18号株分别携带完全相同的耐药基因，具有亲缘性，该3个克隆可能存在医院感染。结论 ABA的多药耐药性与其携带多种获得性耐药基因及可移动遗传元件有关，研究医院流行细菌的同源性和启动预防控制机制很有必要。

耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌耐药元件与耐药基因定位研究

目的研究本院耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CRKP)的耐药元件及耐药基因。方法收集2018年2月-2019年2月本院临床送检的各类标本中分离的非重复性CRKP 60株。采用改良Hodge试验和EDTA纸片协同试验耐药菌检测;采用PCR扩增法检测β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药基因及可移动遗传元件标记基因;采用质粒结合试验和质粒酶切图谱分析研究耐药机制。结果本院CRKP均检出β-内酰胺酶、氨基糖苷类相关耐药基因,喹诺酮类药物作用靶位gry A基因均存在突变;aac(3)-Ⅱ是氨基糖苷类相关耐药的主要原因,gyr A基因突变是喹诺酮类相关耐药的主要原因;β-内酰胺类相关耐药基因以blaKPC-2为主,且多属于同一克隆型。膜孔蛋白编码基因Omp K36和插入序列ISEcp1、ISKpn6阳性率较高,均超过90%。质粒接合试验和酶切试验结果显示耐药菌株携带丰富的可接合性质粒,耐药菌株携带的质粒大小为40 kb^330 kb。结论本院出现CRKP的耐药基因型为blaKPC-2,通过耐药元件在可接合性质粒中的插入,实现快速传播。

沙门氏菌抗生素抗性机理研究进展

沙门氏菌的多重耐药性问题已经成为世界范围内的公共卫生和经济问题。目前沙门氏菌抗生素抗性机理的研究主要集中以下方面:(1)基因突变与抗生素抗性;(2)外排泵与抗生素抗性;(3)耐药基因编码的钝化酶和灭活酶引起的抗生素抗性;(4)可移动的细菌遗传耐药基因元件及其转移与抗生素抗性。本文基于以上几个方面综述了与沙门氏菌抗生素抗性机理研究相关的研究动态和研究进展。