胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞多耐药基因1和P-糖蛋白的表达

目的:探讨胃上皮永生细胞、胃腺癌细胞和胃腺癌淋巴结转移细胞中多耐药基因1(mdr1)和P糖蛋白(P gp)的表达。方法:常规培养胃上皮永生细胞系(GES-1)、胃腺癌细胞系(BGC823)和胃腺癌淋巴结转移细胞系(SGC7901)细胞,用RT PCR和原位杂交检测此3种细胞的mdr1mRNA表达,用免疫印迹和免疫组化检测它们的P gp表达,用流式细胞仪检测阿霉素在细胞内的蓄积以判断它们的P gp功能状态。结果:在原位杂交的标本上,杂交信号呈紫蓝色颗粒,分布于胞质。GES1细胞颗粒数量少,BGC823颗粒数量多,细胞轮廓十分明显;SGC7901颗粒细小而少,少数细胞杂交信号丰富。免疫印迹显示GES1P gp的表达较BGC823和SGC7901弱;GES1P- gp积分光密度为46.36±19.24,BGC823为61.32±28.46,SGC7901为50.45±21.36,BGC823的P gp表达强于SGC7901和GES1(P<0.05),SGC7901和GES1的差异无统计学意义(P>0.05)。GES1阿霉素特异荧光强度为10.12±4.18,BGC823为27.44±7.06,SGC7901为35.88±14.55,3者相比差异有统计学意义(P<0.001)。结论:在胃癌的发生发展中,细胞对抗肿瘤药的反应性不同,随着细胞恶性变,P gp介导的耐药性增加。

P-糖蛋白170在原发性肾病综合征患儿糖皮质激素耐药中的作用

目的探讨原发性肾病综合征(PNS)患儿治疗前外周血单个核细胞(PBMC)P-糖蛋白170(P-gp170)与糖皮质激素(GC)耐药的关系。方法采用流式细胞仪(FCM)检测30例PNS患儿PBMCP-gp170的表达,并分析其与复发次数、24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分的关系。根据随访结果分成激素耐药型肾病综合征(SRNS)和激素敏感型肾病综合征(SSNS)2组,各15例。10例健康体检儿童作为正常对照组。结果SRNS组患儿PBMCP-gp170的表达量显著高于SSNS组患儿(P均<0.05)。PNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与复发的次数呈正相关(r=0.399,P<0.05);SRNS患儿激素治疗前PBMCP-gp170的表达量与24h尿蛋白定量(24hUTP)及肾脏病理积分均呈正相关(r=0.576、0.529,P均<0.05)。结论PBMCP-gp170表达增高可能与PNS患儿GC耐药有关,可作为PNS患儿GC耐药的标志之一。PBMCP-gp170表达增高与PNS活动、复发及病理有关,可做为临床判断预后的指标。

多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)高表达与类风湿性关节炎患者甲氨蝶呤耐药有关

目的研究类风湿性关节炎(RA)患者甲氨蝶呤(MTX)耐药性与外周血单个核细胞(PBMC)多药耐药性基因1/P糖蛋白(mdr1/P-gp)的表达的相关性。方法根据符合纳入标准的RA患者依据服用MTX后28个关节疾病活动度评分(DAS28)的情况,将RA患者分为MTX敏感组及耐药组,健康人群为正常对照组。采用实时定量PCR检测mdr1 mRNA的表达,流式细胞术检测PBMC的P-gp的水平及功能,比较mdr1/P-gp在各组中的表达情况。结果与正常对照组相比,MTX敏感组及MTX耐药组P-gp表达及功能增强;与MTX敏感组相比,MTX耐药组mdr1 mRNA水平增加,且P-gp表达及功能增强。结论 RA患者mdr1/P-gp高表达与MTX耐药相关。

多药耐药基因及P-糖蛋白在正常涎腺组织的表达

目的 探讨多药耐药基因 (mdrl)与P -糖蛋白 (P - gp)在正常涎腺组织的表达与功能。 方法 采用PCR和免疫组化法对 15例正常涎腺组织进行mdrlmRNA及P -gp的检测。 结果 mdrlmRNA阳性率为 40 % ,IOD均值为 0 .2 45 ;P - gp阳性率为6 6 .7% ,定位于正常涎腺的分泌管。结论 P - gp可能参与了涎腺的正常生理功能 。

ERCC1基因多态性与大肠癌中肺耐药蛋白和P-糖蛋白表达的相关性

目的:探讨核苷酸切除修复交叉互补基因1(excision repair cross completion gene 1,ERCC1)C19007T位点基因多态性与大肠癌中肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的相关性,以评估ERCC1基因多态性与大肠癌化疗敏感性的关系。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性技术检测86例大肠癌患者ERCC1 C19007T位点基因型;采用免疫组织化学技术检测86例大肠癌中LRP、P-gp的表达情况,分析其与各基因型间的关系。结果:ERCC1 C19007T位点基因型频率分别为C/C型占53.49%、C/T型占40.70%以及T/T型占5.81%。LRP在C/T+T/T基因型组的阳性表达率为90.00%,高于在C/C基因型组的阳性表达率65.22%,差异有统计学意义(P<0.05)。比较P-gp在两组间的表达,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:ERCC1基因多态性与大肠癌化疗敏感性有关,临床检测ERCC1 C19007T位点基因型可能有助于指导大肠癌的化疗。

雄黄微生物提取液对K562/ADM细胞P-糖蛋白和多药耐药基因表达的影响

目的:研究雄黄微生物提取液(RBS)诱导K562/ADM细胞凋亡的作用,并探讨其对P-糖蛋白(P-gp)和多药耐药基因(MDRI)表达的影响。方法:采用"微生物浸出"法制备RBS,并以H3AsO3作为阳性对照,AnnexinV-PI双染法检测细胞凋亡;流式细胞仪检测细胞P-gp表达率;逆转录聚合酶链技术(RT-PCR)检测细胞MDRI mRNA表达水平。结果:RBS可诱导多药耐药白血病细胞发生典型凋亡,抑制P-gp的表达,下调MDRImRNA表达水平。在含砷量相同的条件下,RBS诱导效应明显强于H3AsO3。结论:诱导细胞凋亡、下调P-gp/MDRI蛋白的表达,可能是雄黄逆转白血病耐药的重要分子机制。

P-170糖蛋白在多药耐药(MDR)K562/ADM细胞中的定位研究

目的 :确定P - 170糖蛋白在多药耐药 (MDR)K5 6 2 /ADM细胞中表达的位置。方法 :通过免疫反应并利用流式细胞仪 (FCM )检测表达P - 170糖蛋白细胞的百分含量 ;用免疫电镜技术检测P- 170糖蛋白在细胞中的位置及其表达水平。结果 :敏感株K5 6 2细胞与耐药株K5 6 2 /ADM细胞对P - 170糖蛋白的表达有非常明显的差异 ;不同的K5 6 2 /ADM细胞表达P - 170糖蛋白的量差别较大 ;少量的K5 6 2细胞也有极少的P - 170糖蛋白的表达 ;细胞表达的P - 170糖蛋白位于细胞膜上。结论 :多药耐药K5 6 2 /ADM细胞表达的P - 170糖蛋白最终被镶嵌在细胞膜上 ;在该蛋白质从被表达、修饰和转运到细胞膜上的过程中 ,该蛋白质不具有成熟P -

32例肝癌组织中多药耐药基因及其产物P-糖蛋白的实验研究

探讨肝癌组织中mdr－1（多药耐药基因）mRNA及P－170（P－糖蛋白）的表达水平，采用RT－PCR及免疫组织化学SP法检测32例肝癌组织中mdr－1mRNA和P－糖蛋白的表达．发现不仅肝癌组织中mdr－1和P－糖蛋白的表达显著高于对照组，而且转移组中P－糖蛋白的表达高于非转移组．提示检测mdr－1／P－gp对肝癌制订治疗方案，判断疗效及MDR逆转剂的应用具有重要的临床意义；mdr－1mRNA／P－gp的过表达可能与肝肿瘤的转移预后有关．

海人酸致痫大鼠颞叶、海马区多药耐药基因1、P-糖蛋白的表达及相互关系

目的探讨癫痫大鼠颞叶、海马区多药耐药基因1(MDR1)及P-糖蛋白(Pgp)的表达及其相互关系。方法选择健康清洁级雄性SD大鼠50只。采用随机数字表法将大鼠分为观察组和对照组。观察组大鼠海马区注射海人酸(KA)2μl(含KA 1μg),制作颞叶耐药性癫痫(RE)模型(成功22只),对照组同法注射0.9%氯化钠注射液2μl。两组大鼠饲养、观察1个月后,分别取颞叶、海马区组织,采用免疫组化及实时荧光定量PCR法检测MDR1 mRNA和Pgp表达水平,并分析其相互关系。结果观察组颞叶、海马区的MDR1 mRNA、Pgp表达水平均高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。观察组颞叶、海马区MDR1 mRNA表达水平与Pgp表达水平呈正相关(r=0.55,P<0.05)。结论MDR1、Pgp可能参与RE的发病机制,可为开发相关新的治疗方法或药物提供依据。

槲皮素对HepG2细胞的抑制作用及对耐药基因和P-糖蛋白的影响

目的观察槲皮素(Que)在体外对肝癌细胞株HepG2细胞的抑制作用及对多药耐药基因(MDR1)和P糖蛋白(P-gp)的影响,研究其作用机制,对其能否改善肝癌的化疗疗效提供初步依据。方法采用体外细胞毒性试验检测Que对肝癌细胞株HepG2细胞生长的抑制作用;凋亡检测法观察Que诱导肝癌细胞HepG2细胞凋亡情况;免疫组织化学法及实时荧光聚合酶链反应检测其对HepG2细胞P-gp、MDR1表达的影响。结果 Que对HepG2细胞生长的抑制作用呈浓度和时间依赖性;Que可诱导HepG2细胞凋亡;Que能抑制肝癌细胞株HepG2细胞MDR1mRNA的表达,并呈浓度依赖性;Que对HepG2细胞P-gp的抑制作用呈浓度依赖性。结论 Que可能通过诱导凋亡而抑制HepG2细胞生长;Que可通过抑制MDR1mRNA的表达而抑制P-gp的表达,提高细胞内抗癌药物浓度,改善化疗疗效。

P-糖蛋白抑制剂HZ08对裸鼠体内肿瘤多药耐药逆转以及对大鼠肝P450酶影响(英文)

目的:考察P-糖蛋白抑制剂HZ08对K562/ADM接种裸鼠体内肿瘤多药耐药的逆转作用及HZ08对大鼠肝P450酶亚型的影响。方法:K562/ADM接种的裸鼠尾静脉注射HZ08和阿霉素4周,与对照组和阳性药组比较瘤重;HZ08与CYP450亚型特异性底物在大鼠肝微粒体中温孵,与对照组比较测定HZ08对于CYP450亚型的影响。结果:HZ08可显著减小裸鼠体内的瘤重,并对大鼠肝微粒体CYP3A4有较弱的抑制作用,对其他P450酶亚型无显著抑制作用。结论:HZ08在裸鼠体内具有较好的逆转P-糖蛋白介导的肿瘤多药耐药的作用,并且在体外实验中对P450酶具有较小的影响。

人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达变化及意义

目的观察人脑胶质瘤组织中耐药相关基因蛋白O6-甲基鸟嘌呤-DNA-甲基转移酶(MGMT)、拓扑异构酶(Topo-Ⅱ)、谷胱甘肽转移酶(GST-π)、P-糖蛋白(P-gp)的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用免疫组化法检测330例人脑胶质瘤组织及20例正常脑组织中的MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp蛋白。结果正常脑组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp均无表达,人脑胶质瘤组织中MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的阳性表达率分别为43.9%、24.3%、49.8%、48.2%;MGMT的表达与胶质瘤病理分级无关(P>0.05),Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp的表达与胶质瘤病理分级有关(P均<0.05)。结论人脑胶质瘤组织中不同程度地表达耐药相关基因蛋白MGMT、Topo-Ⅱ、GST-π、P-gp,可据此制订个体化的胶质瘤化疗方案。

P-糖蛋白和多药耐药相关蛋白在胃癌中的表达及其与化疗敏感性的关系

目的 :分析胃癌组织P 糖蛋白 (P Glycoprotein ,P gp)和多药耐药相关蛋白 1(MRP1)的表达及其与肿瘤化疗敏感性和化疗方案选择的关系。方法 :将 4 0例胃癌标本 (标本组 )行肿瘤细胞化疗敏感性测定 (H3 TDR法 ) ,并分析其与肿瘤P gp、MRP1表达的关系 ;另随访P gp、MRPI阳性表达率相近的 30例 (化疗组 )术后化疗的胃癌患者 ,了解化疗效果与P gp、MRP1表达的关系。结果 :4 0例胃癌标本P gp表达阳性率 4 7.5 % (19例 ) ,阴性率 5 2 .5 % (2 1例 ) ;MRPI阳性率 2 2 .5 % (9例 ) ,阴性率 77.5 % (31例 )。化疗组 30例 ,P gp阳性率 4 0 % (12例 ) ,阴性率 6 0 % (18例 ) ;MRPI阳性率 2 3.3% (17例 ) ,阴性率76 .7% (2 3例 )。化疗药物对胃癌细胞均有一定的抑制生长作用。MDR1表达会影响肿瘤细胞对ADM和VP 16的敏感性 ;MRP1表达会影响肿瘤细胞对ADM和 5 Fu的敏感性。随访的 30例胃癌术后化疗患者 ,死亡 11例。P gp和MRP1均阴性者存活期最长 ,其次为其中一个阳性表达 ,P gp和MRP1均阳性者无存活。结论 :P gp和MRP1表达对化疗的效果有重要影响 。

肿瘤细胞多药耐药基因及产物p糖蛋白检测方法的研究进展

肿瘤细胞对化疗药物的多药耐药（MDR）是目前肿瘤病人化疗失败的主要原因。肿瘤细胞的多药耐药有多种类型。本文对Mdr1基因及P精蛋白（pgp）的生物学特性及检测方法作一综述。

重组人p53腺病毒在乳腺癌裸鼠体内耐药逆转作用及其对P-糖蛋白表达的影响

目的研究重组人p53腺病毒(rAd-p53)对人乳腺癌MCF-7/ADR裸鼠移植瘤的耐药逆转作用及其对耐药相关P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法建立人乳腺癌MCF-7/ADR裸鼠耐药模型,随机分为对照组、rAd-p53组、阿霉素组、联合组,分别给予不同治疗。观察裸鼠肿瘤体积的变化,western blot检测P-gp蛋白表达情况。结果成瘤后rAdp53组、阿霉素组、联合组抑瘤率分别为42.05%、49.21%、69.97%,各治疗组体积与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),且联合组显著优于rAd-p53组和阿霉素组(P<0.05)。对照组、rAd-p53组、阿霉素组、联合组P-gp表达水平分别为(0.5964±0.0806)、(0.5506±0.0127)、(0.5641±0.0055)、(0.4652±0.0982),联合组P-gp表达水平低于其他各组。结论 Ad-p53对人乳腺癌阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR建立的裸鼠移植瘤具有多药耐药的逆转作用,并可下调P-gp的表达。

肝癌耐药细胞中MDR1 mRNA、P-糖蛋白的表达变化及意义

目的观察肝癌耐药细胞中MDR1 mRNA及P-糖蛋白的表达变化,并探讨其临床意义。方法采用药物浓度递增法,诱导产生对盐酸阿霉素(Adr)具有稳定耐药性的肝癌HepG2细胞(HepG2 Adr);采用RT-PCR及免疫组化SP法,分别检测HepG2、HepG2 Adr细胞中的MDR1 mRNA、P-糖蛋。结果经0.01、0.10、1.00、10.00μmol/L Adr诱导产生的HepG2 Adr细胞中MDR1 mRNA的表达量分别为0.26±0.11、0.56±0.17、10.78±0.2、1.21±0.17,P-糖蛋白阳性表达率分别为15.44%±4.55%、26.76%±5.23%、64.21%±14.22%、90.23%±7.68%;HepG2细胞中MDR1 mRNA、P-糖蛋白分别为0.18±0.08、5.73%±0.52%。肝癌HepG2 Adr细胞与HepG2细胞中MDR1 mRNA、P-糖蛋白表达量比较,P均<0.05;且随着肝癌HepG2 Adr细胞耐药性增高,MDR1mRNA、P-糖蛋白表达量逐渐增高(P均<0.05)。结论肝癌耐药细胞中MDR1 mRNA及P-糖蛋白高表达,二者可能与肝癌多药耐药的产生有关。

多药耐药基因及其表达产物P—糖蛋白在肿瘤研究治疗中的作用

多药耐药性(multidrug resistance,MDRR)是指肿瘤细胞能对多种结构、功能及杀伤机制均不同的化疗药物产生耐受。肿瘤组织多药耐药性的产生主要是由于肿瘤细胞内多药耐药基因的异常扩增和过渡表达所致。目前已分离了两种多药耐药基因:MDR1和MDR3。其中MDR1与肿瘤细胞典型多药耐药有关,目前对MDRl的结构和功能了解较多,它定位于染色体7q21.1,mRNA长度为4.5kb,表达产物是分子量为170KD的糖蛋白(P—glycoprotein,P—GP),又称P1700。