枯草杆菌多重耐药基因bmr的克隆及原核表达

根据B enB ank上已公布的多重耐药基因bm r的编码序列设计1对引物,以枯草杆菌基因组为模板,扩增出1 170bp的DNA片段,将所得片段与pM D-18T载体连接,转化到DH5α大肠杆菌中,成功地筛选到阳性克隆,其扩增片段测序结果与文献报道序列同源性达98.81%。将该片段定向克隆到pET-28a(+)表达质粒中,提取质粒转化到BL 21(DE 3)中,经1 mm o l/L IPTG诱导阳性菌,通过SDS-PAGE检测出bm r基因的表达产物。