曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞恶性行为、耐药蛋白及巨噬细胞极化的作用机制的研究

目的探讨曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞恶性行为、耐药蛋白及巨噬细胞极化的作用机制。方法取K-ras突变直肠癌细胞HCT116,将其随机分为HCT116组(HC组)、西妥昔单抗+HCT116组(CE组)、低剂量曲美替尼+HCT116组(LT组)、中剂量曲美替尼+HCT116组(MT组)、高剂量曲美替尼+HCT116组(HT组),Transwell实验及划痕实验检测细胞恶性行为,MTT法检测药物敏感性,RT-PCR法检测耐药蛋白表达,免疫印迹法检测巨噬细胞极化相关指标。结果与HC组相比,其余四组细胞侵袭、迁移及GST-π、P-gp、TopoⅡ、CD163表达显著降低(P<0.05),CD40蛋白表达显著升高(P<0.05);与LT组相比,MT组、HT组细胞侵袭、迁移及GST-π、P-gp、TopoⅡ、CD163表达显著降低(P<0.05),CD40蛋白表达显著升高(P<0.05),且HT组比MT组变化明显(P<0.05);HCT116细胞对西妥昔单抗与曲美替尼均敏感,但与西妥昔单抗相比,曲美替尼的IC_(50)明显更低(P<0.05)。结论曲美替尼对K-ras突变直肠癌细胞具有显著疗效,可显著改善其恶性行为,抑制耐药蛋白表达,抑制巨噬细胞M2极化。

耐药蛋白P-gp、BCRP及LRP在乳腺癌原发灶和腋淋巴结转移灶中表达的比较

目的研究P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、乳腺癌耐药蛋白(breast cancer drug resistance protein,BCRP)和肺耐药蛋白(pulmonary resistance protein,LRP)在乳腺癌原发灶和腋淋巴结转移灶中表达的差异。方法采用免疫组织化学染色法检测126例乳腺癌患者的原发灶和66例腋淋巴结转移灶中P-gp、BCRP、LRP的表达。结果 (1)P-gp、BCRP及LRP在乳腺癌原发灶中的阳性表达率分别为41.27%(52/126)、38.89%(49/126)、65.87%(83/126),在腋淋巴结转移灶中阳性表达率分别为59.09%(39/66)、63.64%(42/66)、60.61%(40/66)。P-gp、BCRP在乳腺癌淋巴结转移灶中的表达高于原发灶(P<0.05),LRP在原发灶和淋巴结转移灶之间的表达差异无统计学意义。(2)P-gp、BCRP在乳腺癌原发灶和腋淋巴结转移灶中表达差异没有统计学意义(P<0.01),Kappa值分别为0.276、0.356;LRP在原发灶和淋巴结转移灶中的表达差异没有统计学意义(P>0.05)。(3)乳腺癌原发灶中2个耐药蛋白共表达率为35.71%(45/126),3个耐药蛋白同时表达的阳性率为15.08%(19/126),有2个或3个耐药蛋白共表达率为50.79%(64/126),高于单独阳性表达率33.33%(42/126,P<0.05)。腋淋巴结转移灶中2个耐药蛋白共表达率为53.03%(35/66),高于单独阳性表达率(27.27%[18/66],P<0.05);3个耐药蛋白同时表达的阳性率为16.67%(11/66),有2个或3个耐药蛋白共表达率为69.70%(46/66),高于单独阳性表达率(P<0.01)。腋淋巴结转移灶中2个耐药蛋白共表达率及2个或3个耐药蛋白共表达率均高于乳腺癌原发灶中的表达(P<0.05)。(4)Kaplan-Meier生存分析结果表明,乳腺癌腋淋巴结转移灶中P-gp、BCRP及LRP阳性表达者5年总生存期较原发灶耐药蛋白阳性者低(P<0.05)。结论在乳腺癌原发灶和腋淋巴结转移灶中的P-gp、BCRP表达差异有统计学意义,LRP表达则没有明显差异;多个耐药蛋白共表达协同作用为耐药的主要特征,腋淋巴结转移灶中可能具有更强的耐药性。

肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义 ,采用半定量逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因 (lungresistanceprotein ,LRP)及多药耐药相关蛋白基因 (multidrugresistanceprotein ,MRP)的表达。结果显示 ,正常对照骨髓细胞LRP表达阴性 ,初治急性髓细胞白血病 (AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高 ,增高的LRPmRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关 ,LRP表达阳性患者的完全缓解率明显低于表达阴性者。经直线相关分析发现 ,LRP表达与MRP表达水平成正相关。结论 :LRP可能是一项新的耐药指标 ,其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关 ,同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗 ,估计预后。

化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白、P-糖蛋白的表达及其与癌干细胞的相关性

目的通过对比化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白(ABCG2)、P-糖蛋白(P-gp)表达差异,探讨其与乳腺癌干细胞(BCSCs)的相关性。方法免疫组织化学检测化疗前乳腺癌组织和化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp及BCSCs标志物CD44及CD24蛋白的表达;免疫荧光检测"BCSCs微球体"细胞中CD44及CD24蛋白表达;有限稀释法检测"BCSCs微球体"细胞单克隆形成能力;Western blot检测"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp、CD44及CD24蛋白的表达。结果与化疗前乳腺癌组织相比,化疗后残存乳腺癌组织ABCG2、P-gp表达与CD44蛋白表达呈正相关(χ2=41.34,r=0.83;χ2=22.81,r=0.61);而其与CD24蛋白表达呈负相关(χ2=-21.25,r=0.72;χ2=-17.26,r=0.65);差异均有统计学意义(P<0.05)。化疗后残存乳腺癌组织中"BCSCs微球体"直径明显增加,且化疗后BCSCs含量是化疗前BCSCs含量的2.5倍;Western blot显示化疗后残存乳腺癌组织"BCSCs微球体"细胞ABCG2、P-gp及CD44蛋白表达明显升高(P<0.05),而CD24蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论化疗赋予残存乳腺癌组织"癌干细胞样"特征,导致乳腺癌多药耐药产生。

急性白血病细胞的乳腺癌耐药蛋白基因表达与化疗耐药的关系

为了探讨急性白血病 (AL)患者乳腺癌耐药蛋白 (BCRP)基因表达与化疗耐药及预后的关系 ,本研究应用半定量逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)的方法 ,以 β2 微球蛋白 (β2 MG)作阳性对照 ,检测了 72例AL患者的白血病细胞及 15名正常对照者白细胞的BCRPmRNA的表达 ,将BCRP/ β2 MG≥ 0 .5定为BCRP基因表达阳性。结果显示 :初治组BCRP基因表达的阳性率为 37.6 % ,BCRP基因表达阳性与BCRP基因表达阴性患者的首次完全缓解 (CR1)率分别为 31.6 %和 79.3% (P =0 .0 0 1) ;临床耐药组 (NR组 )与化疗敏感组 (CR组 )BCRP基因的表达水平分别为 0 .96 2± 0 .4 2 6和 0 .315± 0 .2 96 (P =0 .0 0 0 1) ;复发 /难治组BCRP基因表达水平显著高于初治组 (P =0 0 0 2 5 ) ;正常对照组及长期生存组BCRP基因表达的水平较低 ;BCRP基因表达与FAB分型有关。结论 :BCRPmRNA过度表达可导致临床化疗耐药 ,是AL患者 (除M3 外 )预后的重要不利因素。

^(99m)Tc-MIBI肺显像与肺癌P糖蛋白、多药耐药相关蛋白、肺耐药蛋白表达的关系

目的探讨99m锝甲氧异丁基异氰(99mTc-MIBI)肺显像与肺癌组织中P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白表达的关系。方法对47例原发性肺癌患者术前行早期与延迟99mTc-MIBI显像,应用免疫组化化学方法检测术后标本中多药耐药蛋白P-gp、MRP、肺耐药蛋白的表达水平。比较各多药耐药蛋白阳性组和阴性组间早期摄取比值、晚期摄取比值及放射性清除指数的差异。结果P-gp阳性组晚期摄取比值、清除指数分别为1.27±0.61、0.22±0.19,阴性组晚期摄取比值、清除指数分别为1.95±0.87、-0.17±0.18;两组晚期摄取比值、清除指数差异有显著性(t=2.36、P=0.04)及(t=4.51、P<0.01);而P-gp阳性组与阴性组早期摄取比值差异无显著性(P>0.05)。MRP阳性组与阴性晚期摄取比值分别为1.07±0.32、1.65±0.86,两组晚期摄取比值差异有显著性(t=2.19、P=0.03),而MRP阳性组与阴性组早期摄取比值、清除指数差异无显著性(P>0.05)。肺耐药蛋白阳性组与阴性组早期摄取比值、晚期摄取比值及清除指数差异均无显著性(P>0.05)。结论99mTc-MIBI显像晚期摄取比值与P-gp和MRP表达呈负相关,清除指数与P-gp表达呈正相关,99mTc-MIBI显像具有检测肺癌患者肿瘤组织内P-gp和MRP表达的价值。

多药耐药相关蛋白和肺耐药蛋白在大肠癌中的表达及其意义

目的研究大肠癌中多药耐药相关蛋白(multidrug resistance-associated protein,MRP)和肺耐药蛋白(lung resistance protein,LRP)的表达及其与临床病理学特征间的关系。方法应用免疫组织化学技术检测86例大肠癌组织和52例远端正常组织(距癌灶>10 cm)中MRP、LRP的表达情况,并分析其与临床病理特征间的关系。结果 86例大肠癌组织中,MRP阳性表达率为45.3%,LRP阳性表达率为76.7%,两者在大肠癌组织中表达均高于在远端正常组织中的表达(P<0.05)。MRP的表达与大肠癌分化程度有关,分化较低组的阳性率(61.0%)高于分化较高组的阳性率(31.1%),两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。大肠癌组织中MRP、LRP的表达有相关性(P<0.01)。结论 MRP、LRP在大肠癌中均有不同程度的高表达,可能与大肠癌原发性多药耐药有关。临床检测大肠癌中MRP、LRP的表达,为制定合理的个体化疗方案提供理论依据。

肿瘤耐药蛋白在舌鳞癌中的表达及意义

目的 检测P_糖蛋白 (Pgp) ,多药耐药相关蛋白 (MRP) ,肺耐药相关蛋白 (LRP) ,谷胱苷肽_S转移酶 (GST_π)及DNA拓扑异构酶Ⅱα(TopoⅡα)在舌鳞癌组织中的表达水平及与化疗疗效的关系。方法 采用卡铂、平阳霉素和氨甲喋呤化疗方案对 4 0例舌鳞癌患者进行化疗 ,分别于化疗前和化疗后用免疫组织化学LsAB法检测Pgp ,MRP ,LRP ,GST_π ,TopoⅡα在 80例舌鳞癌组织中的表达 ,其中 4 0例为化疗前 ,4 0例为化疗后。结果 在检测的舌癌组织中 ,化疗前Pgp ,MRP ,LRP ,GST_π ,TopoⅡα的阳性表达率分别为 4 7 5 % ,5 0 % ,35 % ,4 5 % ,82 5 % ,它们的表达与临床病理无关 (P >0 0 5 ) ;Pgp ,MRP化疗前后水平上升 (P <0 0 5 ) ;Pgp,MRP与化疗耐药效果有关 (P <0 0 5 ) ;共表达现象普遍 ,Pgp ,MRP ,GST_π及MRP ,GST_π联合表达率在化疗无效者中为 4 0 %和 5 0 % ,而在化疗有效者中为 0。结论 Pgp ,MRP 。

小儿恶性肿瘤化疗前后外周血多药耐药基因、多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因的变化及临床意义

目的探讨实体恶性肿瘤化疗患儿外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中多药耐药基因(multi-drug resistance1,MDR1)、多药耐药相关蛋白基因(multi-drug resistance-associated protein1,MRP1)、肺耐药蛋白基因(lung resistance protein,LRP)的表达量及其与临床化疗的关系。方法应用实时荧光定量PCR(real-time fluores-cence quantitative PCR,FQ-PCR)技术,检测患儿化疗前后外周血和手术切除新鲜冻存组织,以及对照组外周血中MDR1、MRP1、LRP的mRNA表达量。结果所有化疗患儿外周血MDR1表达量与同期手术切除的肿瘤组织MDR1表达量存在正相关(r=0.894,P=0.000);化疗前后外周血MDR1表达量变化与肿瘤大小变化间存在负相关:神经母细胞瘤(r=-0.733,P=0.000),卵黄囊瘤(r=-0.874,P=0.000),淋巴瘤(r=-0.617,P=0.005);化疗前外周血MDR1表达量与首次化疗后相应肿瘤标志物变化大小呈负相关:神经母细胞瘤尿香草杏仁酸(VMA)(r=-0.440,P=0.046),卵黄囊瘤甲胎蛋白(AFP)(r=-0.831,P=0.000),淋巴瘤乳酸脱氢酶(LDH)(r=-0.495,P=0.031)。随着化疗次数的增加MDR1表达量增加(P<0.05)。结论动态检测患儿化疗前后PBMCs中MDR1mRNA水平对化疗疗效及预后的判定有一定的指导意义,可在一定程度上指导化疗方案的修订。

大肠癌组织中肺耐药蛋白和多药耐药相关蛋白的表达及临床病理意义

目的 :检测肺耐药蛋白 (LRP)和多药耐药相关蛋白 (MRP)在 6 0例大肠癌组织中的表达 ,探讨其与组织学类型、浸润深度、淋巴结转移的关系。方法 :应用免疫组化S -P法 ,检测 6 0例大肠癌组织 ,10例正常大肠粘膜中MRP和LRP的表达情况。结果 :MRP、LRP在 6 0例大肠癌组织中的阳性表达率分别为 6 8.3%和 70 % ,均高于正常大肠粘膜中阳性表达率 (P <0 .0 5 ) ,在各组织学类型之间的表达无明显差异 (P >0 .0 5 ) ,不同浸润深度及是否有淋巴结转移间表达率无差异 (P >0 .0 5 )。结论 :MRP、LRP在大肠癌中均呈高表达 ,在大肠癌原发性多药耐药中起重要作用 ,这可能是大肠癌对化疗不敏感的原因之一。

多药耐药相关蛋白基因、肺耐药蛋白基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的 研究多药耐药相关蛋白基因 (MRP)和肺耐药蛋白基因 (LRP)在肝细胞癌 (HCC)中的表达及其与临床的关系。方法 采用SP免疫组化和PCR技术检测 5 4例HCC和 2 4例癌旁组织及 1 2 例肝炎后肝硬化组织中的两种基因表达。结果 MRP和LRP在 3种组织中均有表达,HCC组织中其基因表达显著高于其他组织 (P< 0. 0 5 )。HCC中两种基因表达呈正相关 (r= 0. 3 1 2, P <0. 0 5; r= 0. 3 2 8, P< 0. 0 5 );其表达与HCC的分化程度有关 (P< 0. 0 5 )。并且其表达阳性组患者化疗后AFP有效率和平均生存期分别高于和长于阴性组 (P< 0. 0 5 ),但LRP与平均生存期无关 (P> 0. 0 5 )。结论 HCC多药耐药 (MDR)与两种基因表达有关,起源于内源性耐药;检测其表达对预测化疗耐药具有指导意义;MRP可能与预后有关。

非小细胞肺癌中肺耐药蛋白、酸性谷胱甘肽-S-转移酶的协同表达及其临床意义

目的 探讨肺耐药蛋白 (LRP) 和酸性谷胱甘肽- S- 转移酶 (GST-π) 在非小细胞肺癌 (NSCLC) 中的协同表达及其临床意义。方法 用SP免疫组化方法检测62例术前均未进行化疗的NSCLC组织中LRP、GST- π蛋白的表达情况。结果 在NSCLC中LRP、GST-.π蛋白表达的阳性率分别为75. 8% (47/62); 66. 1% (41/62)。LRP蛋白表达与肿瘤分化程度相关。GST -π蛋白表达与肿瘤组织类型、分化程度、有无淋巴结转移相关。LRP与 GST π阳性表达之间存在正相关关系。结论 LRP、GST -π在不同类型的NSCLC中均可表达, 但水平不同。

乳腺癌耐药蛋白——肿瘤多药耐药研究新进展

乳腺癌耐药蛋白(breastcancerresistanceprotein,BCRP)是近年发现的与肿瘤多药耐药有关的新的药物排出泵。BCRP是含655个氨基酸残基的跨膜蛋白,属于ABC转运蛋白超家族的成员。BCRP仅有6个跨膜区和1个ATP结合位点,故被称为不完整转运分子,推测BCRP通过组成同二聚体或异二聚体构成跨膜通道而发挥功能。过表达BCRP的肿瘤细胞株对米托蒽醌、阿霉素、柔红霉素、鬼臼乙叉甙、拓扑替康、CPT-11等产生交叉耐药,而对长春新碱、紫杉醇无交叉耐药。GF120918和FumitremorginC能有效逆转过表达BCRP的肿瘤细胞株的耐药性,并与细胞内药物蓄积量呈正相关。人体正常组织中胎盘合体滋养层细胞、小肠和结肠粘膜上皮细胞、胆小管膜、乳腺小叶及血管内皮细胞和干细胞均能检测到BCRP的表达;推测BCRP具有抑制消化道吸收某些外源性物质(包括抗癌药和有毒物质),参与形成胎盘屏障等生理功能。BCRP与急性髓性白血病、非小细胞肺癌、乳腺癌等多种肿瘤的临床化疗敏感性有关。

瓦他拉尼对乳腺癌耐药蛋白介导的肿瘤多药耐药的逆转研究

目的观察新型激酶抑制剂类抗癌药瓦他拉尼(vatalanib)逆转肿瘤细胞多药耐药(MDR)的效果,研究其对乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)的作用,探讨其作用机制。方法应用MTS法或SRB法检测瓦他拉尼对耐药细胞与敏感细胞的细胞毒性和逆转MDR的效果;分别以罗丹明(Rh-123)、米托蒽醌(MX)、阿霉素(ADR)为P-gp、BCRP、MRP1的荧光底物,应用流式细胞术检测该药对P-gp、BCRP、MRP1外排功能的影响;应用Western blot检测该药对耐药细胞中BCRP蛋白表达水平的影响,并研究其对细胞增殖相关信号分子的影响;应用qRT-PCR检测其对耐药细胞中BCRP基因表达水平的影响;通过超速离心法制备BCRP转运蛋白的粗膜,检测瓦他拉尼对BCRP的ATPase活性的影响。结果无毒剂量的瓦他拉尼(5μmol·L-1)可有效逆转BCRP高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCG2对MX、ADR和托泊替康(TOPT)的耐药,而对P-gp高表达的肿瘤细胞株K562/A02和MRP1高表达的肿瘤细胞株HEK293/ABCC1的耐药无逆转作用。该药能够下调耐药肿瘤细胞的BCRP基因和蛋白的表达水平,并具有时间和剂量依赖效应,但对BCRP外排MX的功能无明显抑制作用。该药可以激活BCRP的ATPase活性,但并不改变BCRP的构象,对耐药和敏感细胞中AKT和ERK的表达及其磷酸化水平也均无明显影响。结论瓦他拉尼可有效、特异地逆转BCRP介导的肿瘤MDR,其机制可能是通过下调耐药肿瘤细胞中BCRP基因和蛋白的表达来达到逆转MDR的效果。

多药耐药蛋白对大鼠皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠影响的研究

目的观察多药耐药蛋白(multidrugresistance-associatedprotein,MRP)拮抗剂丙磺舒对大鼠大脑皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠含量的影响,证明MRP能够减少皮层内抗癫痫药物的浓度,探讨脑内表达MRP和难治性癫痫多药耐药的关系。方法在健康大鼠大脑皮层内安置微透析探针,腹腔注射卡马西平(20mg/kg)和苯妥英钠(50mg/kg),在给药后不同时间点收集透析液,并用高效液相检测其中的药物浓度,通过微透析探针局部给于丙磺舒,观察后者能否提高大鼠大脑皮层细胞外液卡马西平和苯妥英钠的浓度。结果丙磺舒升高了皮层细胞外液中卡马西平和苯妥英钠的药物浓度,前者在给药后45min～120min显著增高(P<0.05),后者在给药后30min～150min显著增高(P<0.05)。结论MRP具有限制卡马西平和苯妥英钠通过血脑屏障的作用,引起抗癫痫药物在大鼠大脑皮层细胞外液中分布减低,MRP表达增加可能参与了难治性癫痫多药耐药机制的形成。

乳腺癌组织中乳腺癌耐药蛋白的表达与新辅助化疗疗效的相关性

目的探讨乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的表达在新辅助化疗前后的变化及其与化疗疗效的关系,评价BCRP对新辅助化疗疗效的预测价值。方法应用免疫组织化学方法检测同一乳腺癌病例新辅助化疗前后癌组织中BCRP的表达,分析其与新辅助化疗疗效及临床病理指标的关系。结果①BCRP在新辅助化疗前的阳性表达率为52. 3%,化疗后其表达与化疗前差异有统计学意义(P<0. 05);②新辅助化疗后有效组中化疗前BCRP的阳性表达率较无效组的阳性表达率低,差异有统计学意义(P<0. 05)。③BCRP在HER-2阳性组中阳性表达率最高,与Luminal型和三阴型相比差异有统计学意义(P<0. 05)。④BCRP的阳性表达率在腋窝淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组(P<0. 05)。结论 BCRP的表达在新辅助化疗前后有一定的变化,其表达水平与新辅助化疗的临床疗效及临床病理指标有关,对乳腺癌新辅助疗的疗效有预测价值。

乳腺癌耐药蛋白基因的转录调控机制

乳腺癌耐药蛋白(Breast cancer resistance protein,BCRP),又名ABCG2,是ATP结合盒(ATP-binding cas-sette,ABC)转运蛋白超家族成员之一,在肿瘤多药耐药中具有十分重要的作用。BCRP基因启动子区无TATA盒,含CAAT盒、AP1位点、AP2位点以及CpG岛下游的多个Sp-1位点。近年来的研究发现,转录因子孕激素受体(PR)、雌激素受体(ER)、核因子-κB(NF-κB)、缺氧诱导因子(HIF)、Nrf2、芳香烃受体(AhR)、过氧化物酶体增殖活化受体(PPAR)和KLF5等可与BCRP启动子或增强子区的特定反应元件结合进而激活BCRP的转录。促炎细胞因子、生长因子、同源盒基因MSX2、Sonic hedgehog信号通路、Notch信号通路和RAR/RXR信号通路等均参与了BCRP的转录调控。此外,启动子甲基化和组蛋白乙酰化在BCRP转录调控尤其是药物诱导BCRP表达中发挥重要作用。文章综述了这一研究领域的进展,着重讨论了转录因子及表观遗传学在BCRP转录调控中的作用。

原发性肝癌中多药耐药蛋白谷胱甘肽转移酶及拓扑异构酶Ⅱ的表达与临床病理指标的相关性

目的探讨原发性肝癌中谷胱甘肽转移酶(GST-π)及拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)的表达与临床病理指标的相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测GST-π及Topo-Ⅱ在原发性肝癌患者病理组织中的表达情况,分析GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与临床病理指标之间的关系,评价其临床意义。结果原发性肝癌患者肝癌组织中GST-π的阳性表达与术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期及病灶个数无关(P>0.05);Topo-Ⅱ的阳性表达与患者术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、TNM分期、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄及病灶个数无关(P>0.05)。结论 GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与肝癌患者临床病理指标密切相关,可作为判断肝癌患者预后的客观评价指标。

糖尿病对乳腺癌耐药蛋白表达和功能的组织特异性损伤作用

首先从在体水平研究糖尿病能否导致大鼠皮层、海马、肝、肠黏膜和肾中乳腺癌耐药蛋白(BCRP)的功能和表达发生改变以及胰岛素治疗能否逆转糖尿病引起的这种改变;进一步通过体外Caco-2和HepG-2细胞模型研究糖尿病血清中是否存在异常成分影响BCRP的功能和表达。通过单次给予链脲菌素(65 mg/kg,ip)诱导糖尿病模型,三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2)/BCRP的表达分别由QT-PCR和Western blot实验测定,体外通过测定Caco-2和HepG-2细胞中哌唑嗪的摄取研究BCRP的功能改变。在体QT-PCR分析结果表明:5周和8周糖尿病大鼠的皮层、肝和肠黏膜中,ABCG2的表达均显著降低,而在海马和肾中其表达却显著增加。Western blot实验结果在大部分组织中与QT-PCR结果相一致。离体实验结果表明在Caco-2和HepG-2细胞中,高胰岛素和高血糖均可以抑制BCRP的功能。由此证明糖尿病对ABCG2/BCRP的表达和功能具有组织特异性的损伤作用,并且在大鼠肝和肠黏膜中,BCRP功能的改变可能是由高血糖水平引起的。

柴贝止痫汤影响大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白、核因子p65表达的研究

目的探索中药柴贝止痫汤对离体大鼠脑微血管内皮细胞乳腺癌耐药蛋白(breast cancer resistance protein,BCRP)和核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)p65表达的影响。方法培养原代大鼠脑微血管内皮细胞,传至3代时分为正常组、模型组和中药组,正常组常规培养,模型组用100 nmol/L的地塞米松作用细胞24小时,诱导细胞膜上BCRP表达增加;中药组在造模基础上分别用柴贝止痫汤四个浓度(10μg/ml、100μg/ml、500μg/ml、1 mg/ml)干预模型细胞24小时。Western blot检测各组细胞BCRP、NF-κB p65的表达,差异比较采用方差分析;Real-time PCR检测Bcrp mRNA的扩增,相对定量法比较各组间扩增差异。结果柴贝止痫汤10μg/ml、100μg/ml组BCRP表达及Bcrp mRNA的扩增均较模型组降低(P<0.05);柴贝止痫汤1 mg/ml组NF-κB p65的表达较模型组降低(P<0.05)。结论柴贝止痫汤可以下调地塞米松诱导的大鼠脑微血管内皮细胞BCRP及Bcrp mRNA的表达;可能对NF-κB p65的表达有下调作用。