Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、耐药表型及AES修正能力评估

目的评估Vitek2 Compact AST-P639中国定制药敏卡(简称中国定制卡)测定金黄色葡萄球菌体外药敏、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、红霉素诱导克林霉素耐药试验及高级专家系统(AES)的修正能力。方法选取2020年5月至2021年9月绍兴市人民医院临床分离的非重复金黄色葡萄球菌100株,分别采用中国定制卡及微量肉汤稀释法测定万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑胺、达托霉素、苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明和利福平的敏感性。分别以微量肉汤稀释法、PCR和D试验为参考方法,评估中国定制卡的可靠性,并对AES修正能力进行评估。结果中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏分类一致性(CA)为95.38%,极大错误(VME)、大错误(ME)、小错误(MIE)分别为0.31%、3.77%、0.54%,其中万古霉素、替考拉宁、替加环素、利奈唑烷、达托霉素CA均为100.00%,苯唑西林、红霉素、克林霉素、左氧氟沙星、复方新诺明、利福平、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验的CA分别为95.00%、95.00%、66.00%、94.00%、98.00%、97.00%、98.00%、97.00%。左氧氟沙星、复方新诺明和利福平均出现了2.00%的ME,红霉素、MRSA、红霉素诱导克林霉素耐药试验出现了1.00%、2.00%、1.00%的VME。AES将4株苯唑西林敏感菌株和28株克林霉素敏感菌株修正为耐药,虽然均消除了1.00%的VME,但均增加了ME(分别为5.00%、34.00%)。PCR和D试验证实,被修正的4株苯唑西林敏感菌株均携带mecA基因,即与AES修正相符;被修正的28株克林霉素敏感菌株中26株D试验阳性,即AES存在7.14%(2/28)的错误修正率。结论中国定制卡对金黄色葡萄球菌体外药敏、MRSA表型、红霉素诱导克林霉素耐药试验的筛选有较高的准确性,AES对苯唑西林、克林霉素的修正结果可以有效的避免抗菌药物的错误选择,可靠性好,但也存在一定的错误率和局限性,应予以关注。

浙江省温州地区老年住院患者耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌药敏、耐药表型及毒力因子研究

目的 探讨浙江省温州地区老年住院患者临床分离耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(CR KP)药敏、耐药表型及毒力因子特点。方法 选取2018年3月至2022年3月在浙江省温州市地区各医院的老年住院患者中分离的CR KP菌株112株,进行药敏试验,拉丝试验测试高黏表型菌株,荧光定量(PCR)检测耐药基因、血清荚膜分型及毒力因子基因。结果 112株CR KP分别来源于6种不同的标本类型,其中以尿液(47.32%)和痰液(42.86%)为主;112株CR KP对亚胺培南、厄他培南耐药率均达98.21%。共检出18株高黏表型CR KP菌株,检出率为16.07%,来自3种不同的标本类型,以痰液为主(61.11%)。CR-HvKP对甲氧苄啶/磺胺甲恶唑、阿米卡星、庆大霉素、妥布霉素具有较好的药物敏感性,分别为72.22%、61.11%、55.56%、55.56%。18株高黏表型CR KP菌株均携带KPC,其中有3株共同携带GES(16.67%),1株共同携带NDM(5.56%);血清荚膜型以K1型(11.11%)、K2型(2株,11.11%)为主,有13株未分型,未见K20、K54、K57型;共有12株高黏表型CR KP菌株携带毒力基因,其中有1株携带Iron基因(5.56%),2株共同携带rmp A、Iron、aerobactin、magA 4种基因(11.11%),1株共同携带rmpA、Iron、aerobactin 3种基因(5.56%),7株共同携带rmpA、Iron 2种基因(38.89%),1株共同携带rmp A、aerobactin 2种基因(5.56%);rmpA携带率为61.11%,Iron携带率为61.11%,携带aerobactin携带率为22.22%,magA携带率为11.11%。结论 高黏表型CRKP菌株在温州地区老年住院患者的检出率较高,标本主要来源于痰液,耐药基因机制可能为产KPC型碳青霉烯酶,血清荚膜型以K1和K2为主,毒力基因以rmpA、Iron基因携带率最高。

ICU多重耐药肺炎克雷伯菌易感因素分析及耐药表型与基因关系研究

目的 分析重症监护室(intensive care unit, ICU)多重耐药肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)的易感因素及耐药表型与基因关系,为临床制定综合防治措施提供依据。方法 选取2021年1月—2023年1月收治于岳池县人民医院ICU病房的180例KP感染患者作为研究对象,根据药物敏感性试验结果分为多重耐药组(n=80)和非多重耐药组(n=100),比较2组耐药表型及易感因素。用多因素Logistic回归分析影响ICU多重耐药KP易感因素,并建立列线图模型,分析KP基因组特征及相关的毒力因子。结果 多重耐药组中鉴定出的显著高表达的基因是决定O-抗原脂多糖血清型的血清抗性因子基因,决定多糖胶囊(K抗原)类型的是免疫逃避因子、胶囊合成调节、外排泵表达和肠杆菌素,这些基因与KP的感染方式及院内感染密切相关。多重耐药组的ICU住院时间、机械通气方式、机械通气时间、使用碳青霉烯类史、碳青霉烯类使用时间、输血史、使用肠外营养史、吸痰史、使用血管导管史均高于非多重耐药组(P均<0.05)。ICU住院时间≥19 d、机械通气≥7 d、使用有创机械通气、使用碳青霉烯类史、碳青霉烯类使用时间≥7 d、吸痰史是影响患者ICU多重耐药KP易感的独立危险因素。基于危险因素建立的列线图模型结果提示存在上述危险因素的患者ICU多重耐药KP易感的风险较高。模型内部验证结果显示,验证前后的校正曲线与理想曲线拟合良好。多重耐药组的KP基因测序结果显示,最丰富的质粒复制子类型是Col和Inc家族。结论 ICU中多重耐药KP感染与长时间住院、机械通气、使用碳青霉烯类史、吸痰史、特定基因表达和质粒复制子类型等因素密切相关,这些因素共同增加了患者感染风险。

云南昭通某屠宰场猪源沙门氏菌的分离鉴定及耐药表型分析

为了解昭通一屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况,随机对58头屠宰后猪胴体进行无菌采样,通过细菌分离培养、生理生化鉴定、染色镜检、16S rRNA基因鉴定及药敏试验分析对屠宰场屠宰胴体沙门氏菌带菌情况进行分析。结果显示:58份样品中共分离出13株沙门氏菌(22.41%),药敏试验显示,6株沙门氏菌对多粘菌素B敏感,4株对头孢曲松敏感,3株对氨苄西林、环丙沙星和复方新诺明敏感,其余均为中度敏感和耐药。多重耐药情况严重,有12株沙门氏菌呈现多重耐药(3重~6重),4和6重耐药最多,占比高达30.77%,其次是3重和5重分别占比15.38%。实验结果表明,该批屠宰的猪存在沙门氏菌污染,且多重耐药情况严重。

95个猪场大肠杆菌耐药表型及氨基糖苷类药物耐药基因型调查

为调查我国规模化猪场大肠杆菌细菌耐药性及其氨基糖苷类药物耐药基因的流行状况,采用K-B(Kir-by-Bauer)法检测2006-2007年从四川、重庆、湖北等19个省95个规模化猪场分离的480株大肠杆菌对19种抗生素的耐药性。结果表明:仅有多黏菌素B(85.6%)、头孢噻肟(85.3%)、阿米卡星(84.8%)和大观霉素(65.0%)相对敏感。480株大肠杆菌以多重耐药菌株为主,其中13、14、15、16和17重耐药较多,并且有26株18重耐药,14株19重耐药。采用WHONET5.4软件分析大肠杆菌耐药性,对阿米卡星、头孢噻肟和多黏菌素B耐药的猪场相对较少,分别是29、26和24个。采用PCR方法检测氨基糖苷类相关耐药基因,耐药基因检出率分别是aadA1(65.89%)、aaC2(52.35%)、aaC4(12.91%)和aphA3(10.95%)。耐药基因型检出率较高的是aadA1/aaC2(29.61%)、aadA1(18.04%)。Excel软件统计相关耐药基因的猪场分布,表明耐药基因型aadA1/aaC2(43)、aa-dA1/aaC2/aaC4(20)和aadA1/aaC2/aaC4/aphA3(20)在猪场分布较普遍。耐药基因和耐药性比较表明大肠杆菌对氨基糖苷类药物耐药表型与耐药基因型符合率较高的是阿米卡星(68.39%)。本研究表明猪肠道内常在大肠杆菌菌群不仅产生较高的多重耐药性,也成为耐药基因的储存库,对猪场环境中耐药基因在致病菌和非致病菌间传播发挥重要作用,能够作为检测细菌耐药性的指示菌。

结核分枝杆菌北京基因型菌株与耐药表型的关系

目的研究我国结核分枝杆菌北京基因型菌株的分布以及与耐药表型的关系。方法2008年4～12月从我国6个区域收集痰涂片阳性的结核病患者的临床分离株,每一患者的一份分离株经生化方法鉴定为结核分枝杆菌复合群。收集患者的性别、年龄、病史、菌株耐药谱和菌株来源资料。药物敏感性实验采用比例法。运用间隔区寡核苷酸分型方法或基因dnaA～dnaN之间插入序列IS6110鉴定北京基因型菌株。结果在410份结核分枝杆菌分离株中,67.1%(275/410)的分离株属于北京基因型菌株,东北部区域感染北京基因型菌株患者的比例高于中西部区域(χ2=20.50,P=0.000)。患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关。在耐多药菌株和耐利福平菌株中,北京基因型菌株的比例显著高于非北京基因型(P=0.002,P=0.005)。结论患者的年龄、性别和治疗史与感染北京基因型菌株无关,东北部区域北京基因型菌株分布比例显著高于中西部区域。北京基因型菌株与利福平耐药和耐多药有关。

98株鸭源致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因型与耐药表型的比较

旨在调查鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷修饰酶耐药基因(AMEs基因)的携带情况,探讨耐药基因与氨基糖苷类抗生素耐药表型的相关性。对98株鸭致病性大肠杆菌采用了K-B法,选用氨基糖苷类抗生素链霉素、新霉素、庆大霉素、阿米卡星、大观霉素和卡那霉素进行药敏试验,用建立的检测氨基糖苷类AMEs主要基因的四重PCR方法对上述菌株进行分子检测,并随机选取耐药基因ant(3″)-Ⅰa、aac(3)-Ⅱa和aph(3′)-Ⅱa各3个阳性扩增进行克隆测序,对药敏试验结果和基因检测结果进行比较分析。结果表明,98株鸭致病性大肠杆菌有67株对上述氨基糖苷类药物中的一种或多种耐药,耐药率为68.4%(67/98);有49株扩增出AMEs基因,AMEs基因的检出率为50%(49/98),其中ant(3″)-Ⅰa的检出率为30.6%(30/98),aac(3)-Ⅱa为13.3%(13/98),aph(3′)-Ⅱa为3.1%(3/98),ant(3″)-Ⅰa+aac(3)-Ⅱa为2.0%(2/98)、aac(3)-Ⅱa+aph(3′)-Ⅱa为1.0%(1/98),未检出aac(6′)-Ⅰb基因;序列分析结果表明,扩增产物与GenBank中的相应序列有很高的同源性(>99%);AMEs耐药基因与耐药表型的符合率为73.1%(49/67),符合率从高到低依次为大观霉素60%(3/5)、庆大霉素55%(11/20)、链霉素33.3%(22/66)、卡那霉素19%(4/21)、新霉素12.5%(1/8)、阿米卡星0%(0/3)。另外有4株细菌检测到相关耐药基因但耐药表型为敏感,而有22株耐药表型为耐药却未检测到相关耐药基因。鸭致病性大肠杆菌氨基糖苷类耐药基因以ant(3″)-Ⅰa和aac(3)-Ⅱa两种为主,耐药性与相关耐药基因的检出率基本呈正相关。

食源性沙门氏菌耐药表型与耐药基因的研究

为了解食源性沙门氏菌(Salmonella)的耐药状况以及耐药基因与耐药表型的关系,从基因水平上探究Salmonella的耐药机制。本研究对215株分离自1 093份市售新鲜肉类中的Salmonella进行了耐药状况检测,设计了16种引物对耐药基因进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增,并对扩增产物进行克隆测序。结果显示,分离株对磺胺异恶唑耐药率最高(71.7%),其次为四环素(69.8%)、甲氧嘧啶(67.9%)和复方新诺明(52.8%),分离株对环丙沙星、呋喃妥因和头孢类比较敏感。三重及以上耐药的菌株占60.5%,最多可以耐受13种抗生素;PCR共扩增到10种耐药基因,测序结果表明扩增到的序列与Gen Bank上相应参考序列的相似性均在99%以上;β-酰胺类以及四环素类的耐药基因检出情况与耐药表型具有很高的一致性,符合率均在90%以上,其次为磺胺类(81.6%)。说明本研究中的食源性Salmonella分离株的耐药率高,多重耐药情况较为严重,耐药表型与耐药基因检测结果基本一致。

产超广谱β-内酰胺酶肠杆菌科细菌医院感染与耐药表型分析

目的 探讨产超广谱β 内酰胺酶 (ESBLs)肠杆菌科细菌的医院感染和耐药现状。方法 采用双纸片协同试验及纸片确证试验检测医院感染病例中产ESBLs菌 ,采用纸片扩散法测定产ESBLs菌和不产ESBLs菌的耐药率并加以比较。结果 12 5株肠杆菌科细菌检出产ESBLs菌共 4 1株 ,产酶率为 32 .8% ,产酶株均为大肠埃希菌(16株 )和肺炎克雷伯菌 (2 5株 ) ,耐药表型结果显示产ESBLs菌对抗生素耐药率明显高于非产ESBLs菌。结论 产ESBLs是肠杆菌科细菌对 β 内酰胺类抗生素耐药的重要机制 。

猪链球菌对大环内酯类抗生素的耐药性及耐药表型

采用琼脂两倍稀释法和改良的双纸片法 ,测定了兽医临床分离的 4 0株猪链球菌对部分大环内酯类抗生素、克林霉素、林可霉素、青霉素的体外最小浓度及红霉素耐药菌的耐药表型。实验结果显示 ,猪链球菌对红霉素、罗红霉素、泰乐菌素及替米考星的耐药率分别达 72 5 % (2 9/ 4 0 )、 6 7 5 % (2 7/ 4 0 )、 72 5 % (2 9/ 4 0 )和 6 2 5 % (2 5 / 4 0 ) ,对林可霉素和克林霉素的耐药率高达 6 5 % (2 6 / 4 0 )和 6 2 5 % (2 5 / 4 0 ) ,对青霉素耐药率为 4 0 % (16 / 4 0 ) ;青霉素耐药菌株对其他药物的交叉耐药率显著地高于青霉素敏感株 (P <0 0 5 )。在红霉素耐药菌株中 ,以内在型耐药表型为主 ,占 5 8 6 % (17/2 9) ,诱导型及M型耐药表型各占 2 4 1% (7/ 2 9)和 17 2 % (5 / 2 9) ,而 4 0 % (2 / 5 )的M型耐药菌、 5 8 8% (10 / 17)的内在型耐药菌及 5 7 1% (4/ 7)的诱导型耐药菌同时对青霉素耐药。

迟钝爱德华氏菌耐药表型及4种耐药基因检测

从7起牙鲆迟钝爱德华氏菌感染病例中分离到130株致病菌,每个病例挑选5株共计35株,用K-B纸片扩散法检测其耐药表型;用PCR方法检测!-内酰胺类TEM基因、氨基糖苷类ant（3＂）-Ⅰ基因、磺胺类Sul3基因和四环素类tet（A）基因,分析耐药基因与耐药表型间的关系,以查明牙鲆源致病性迟钝爱德华氏菌不同类型常见耐药基因的携带状况,探讨耐药基因与耐药表型之间的相关性。结果显示,所检的35株迟钝爱德华氏菌均携带TEM基因和ant（3＂）-Ⅰ基因,62.9%（22/35）携带Sul3基因,未检出tet（A）基因;所有菌株均具有多重耐药性,大部分菌株耐抗菌类药物达7~9种;耐药基因的携带与耐药表型间存在较密切的相关性,但并非完全对应。

禽源致病性沙门氏菌耐药表型与耐药基因的分析

为了解江苏苏中地区禽源沙门氏菌耐药现象及耐药基因的存在情况，采用K—B法对22株沙门氏菌分离株进行12种抗菌药物敏感性试验，并通过PCR方法检测了12种耐药基因的存在情况。结果显示，所有菌株对甲氧胺嘧啶、阿米卡星、庆大霉素、萘啶酮酸、诺氟沙星的耐药率均在72．73％～100％之间；存在着5种耐药表型，每个耐药表型均在4重或4重以上，耐药最多菌株可耐受10种药物；扩增出9种耐药基因，与GenBank中的参考序列同源性均在98％以上；耐药表型与耐药基因的存在基本一致，但无绝对相关性。本研究结果表明苏中地区沙门氏菌耐药现象非常严重，且耐药基因广泛存在。

鸡源致病性沙门菌耐药表型与耐药基因、血清群的相关性研究

为研究沙门菌分离株耐药表型与耐药基因和血清群之间的关系,对血清型鉴定为B群和D群的29株鸡源致病性沙门菌,采用ATB VET药敏试剂条法对19种抗菌药物进行敏感性测定,应用PCR对这些抗菌药物19种相关耐药基因进行检测。结果表明,29株沙门菌分离株中,青霉素、苯唑西林的耐药率最高（100%）,耐药率超过50%的还有磺胺甲恶唑（82.76%）、链霉素（75.86%）、恶喹酸（75.86%）、氟甲喹（65.52%）、恩诺沙星（55.17%）、四环素（55.17%）、阿莫西林（51.72%）,而对大观霉素、庆大霉素、安普霉素、多黏菌素E没有出现耐药性。所有29个分离株至少对6种抗菌药物具有耐药性,以6重~7重耐药为主（占51.73%）,最高可达14重耐药（占3.45%）。所检测的19种耐药基因中,共检测到14种耐药基因,其中blaTEM检出率最高（100%）,检出率超过40%的还有aadA1（62.07%）、Sul2（62.07%）、Sul3（51.72%）、tetA（48.28%）、qnrA（44.83%）,而blaPSE、aadA2、tetG、tetM、tetX未能检出。所有29个分离株至少携带2种耐药基因,以携带4种~6种耐药基因为主（占79.31%）,最多者携带10种耐药基因（占3.45%）。B血清群和D血清群的耐药表型和耐药基因携带率没有明显差异。结果表明,广西鸡源致病性沙门菌耐药性及多重耐药性非常普遍,耐药表型与相关耐药基因检出率呈正相关,而与血清群之间无明显的相关性。

黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌临床分布和耐药表型分析

目的了解黏液型和非黏液型铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,PAE)的临床分布及耐药性特点,为临床合理选择抗菌药物和预防控制院内感染提供依据。方法对2010-2013年济南军区总医院黏液型和非黏液型PAE的临床分布、耐药表型及药敏结果进行回顾性分析。结果 4年内共分离出1 465株PAE,黏液型PAE共44株(占3.0%),非黏液型PAE共1 421株(占97.0%);44株黏液型PAE除1例来自尿液外,其余均来自痰液标本,74.9%的非黏液型PAE标本分离自痰液;黏液型菌株医院感染患者的基础疾病主要是慢性呼吸系统疾病,占64.5%;非黏液型菌株则多见于术后感染和呼吸系统疾病患者,分别占25.8%、19.6%。44株黏液型PAE中,多重耐药菌占11.4%;而非黏液型PAE中多重耐药菌为19.0%;黏液型PAE对部分原本敏感的抗菌药物逐年产生耐药性,且各药的耐药率呈逐年上升趋势,但耐药率均较低;而非黏液型PAE的耐药率自2011年起逐年降低。结论 PAE分离标本以痰液为主,阳性感染者多为慢性呼吸系统疾病患者,与非黏液型PAE相比,黏液型PAE对抗菌药物的耐药性逐年增强。

全自动微生物分析仪检测细菌耐药表型性能评价

目的探讨VITEK2 Compact全自动微生物分析系统检测细菌耐药表型的准确性和可靠性。方法选取经法国生物梅里埃ATB Expression细菌鉴定/药敏系统验证的菌株,且头孢西丁筛选、诱导克林霉素耐药(D-试验)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)K-B纸片法检测均为阳性,耐药基因经PCR检测确认,其中携带mecA基因甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌(MRSA)30株,D-试验阳性、携带erm基因金黄色葡萄球菌31株[甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)23株],以携带TEM或CTX-M型基因的ESBLs阳性大肠埃希菌30株作为对照菌株,采用VITEK2 Compact AST-GP67(革兰阳性菌)、AST-GN13(革兰阴性菌)药敏卡进行药敏测定和耐药表型确定,对比分析测定结果和验证试验结果。结果 30株头孢西丁筛选阳性金黄色葡萄球菌、31株诱导克林霉素耐药菌株和30株ESBLs阳性大肠埃希菌VITEK2 Compact检测均为阳性,符合率为100%,耐药表型在12h内完成检测。结论 VITEK2 Compact筛选MRSA及检测诱导克林霉素耐药和ESBLs的灵敏度、特异度较高,能对致病菌的耐药表型进行快速、准确测定,是临床微生物检测的有利工具。

VITEK2 Compact全自动微生物分析仪专家系统细菌耐药表型检测能力的评价

目的评价VITEK2 Compact全自动微生物分析仪检测细菌耐药表型的性能。方法随机选择该院2011年1月至2012年6月分离所得后保存的金黄色葡萄球菌60株,大肠埃希菌和肺炎克雷伯杆菌共60株,分别以检测耐药基因、检测常规耐药表型和VITEK2 Compact全自动微生物分析仪3种方法,分析比较结果。结果 VITEK2 Compact检测耐药表型结果与耐药基因检测、常规耐药表型检测结果差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VITEK2 Compact筛选MRSA及检测诱导克林霉素耐药和ESBLs的灵敏度、特异度较高,能对致病菌的耐药表型进行快速、准确测定,是临床微生物检测的有利工具。

结核分枝杆菌临床分离株利福平耐药表型及rpoB基因型分析

目的分析结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株利福平(rifampin,RFP)耐药表型及rpoB基因突变关系,阐明MTB RFP耐药株rpoB基因突变特征。方法采用改良罗氏培养基比例法检测387株MTB临床分离株对RFP敏感性,并进行rpoB基因测序。对经测序rpoB基因511位和533位密码子突变株进行RFP最小抑菌浓度(MIC)检测。结果比例法检测387株MTB临床分离株中1,98株RFP耐药株,189株RFP敏感株。rpoB基因测序结果表明1,98株比例法RFP耐药株中1,92株(96.97%)发生rpoB基因突变,涉及16种单位点和24种双位点密码子联合突变类型,单位点和双位点密码子联合突变率分别为84.34%(167/198)和12.63%(25/198),其中发现1种单位点和21种双位点密码子联合突变新类型。最常见的突变位点为531位(51.01%)、526位(21.21%)和516位(7.07%)密码子。6株(3.03%)耐药株在rpoB测序范围内未见突变。189株比例法RFP敏感株中,174株(92.06%)在rpoB基因测序范围内未见突变1,5株(7.94%)发生突变,其中7株CTG511CCG(Leu→Pro)突变和6株CTG533CCG(Leu→Pro)突变。511位和533位密码子突变株MIC检测结果提示其突变与低度耐RFP相关。结论所得数据及一些新的发现为进一步研究MTB RFP耐药机制、研制快速新型分子药敏试验方法提供理论和实际应用依据。

酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物耐药表型与基因型研究

目的研究酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药表型与基因型。方法采用琼脂平板稀释法测定97株酿脓链球菌对红霉素、克林霉素、麦迪霉素、阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的敏感性;用双纸片法检测酿脓链球菌耐药表型;用PCR方法检测耐大环内酯的酿脓链球菌携带的耐药基因。结果97株酿脓链球菌中82株表现为对大环内酯类抗菌药物不敏感,其中42株表现为cMLS型耐药,37株为iMLS型耐药,3株细菌为主动外排M型耐药;82株对大环内酯不敏感的酿脓链球菌中77株检测到耐药基因,其中12株具有ermB基因,25株具有ermTR基因,2株具有mefA基因,21株同时具有ermB/ermTR基因,5株同时具有ermB/mefA基因,3株同时具有ermTR/mefA基因,9株同时具有ermB/ermTR/mefA基因,5株未能检测到三种耐药基因。结论酿脓链球菌对大环内酯类抗菌药物的耐药率较高,耐药表型以cMLS和iMLS为主,耐药基因以ermB和ermTR多见。

禽源沙门菌氨基糖苷类耐药表型及耐药基因研究

为调查禽源沙门菌临床分离株对耐药基因的携带情况,探讨氨基糖苷类药物的耐药表型与耐药基因的相关性。试验选用氨基糖苷类代表药物阿米卡星等7种抗菌药物采用K-B法对135株沙门菌进行药敏试验,应用PCR技术进行了7种代表性耐药性基因的检测。结果显示:135株分离株对链霉素、阿米卡星、新霉素、卡那霉素、庆大霉素、大观霉素、妥布霉素的耐药率分别为88.9%、83.0%、54.8%、74.8%、78.6%、66.7%、65.9%;共检测出6中耐药基因,add A1、aph(3′)-Ⅱa、aac C2、ant(3′′)-Ⅰa、arm A、rmt B,阳性率分别为57.8%、17.0%、45.2%、31.9%、16.3%、30.4%;所检沙门菌携带2种或2种以上的菌株占63.7%(86/135),有2株同时携带6种耐药基因;耐药性与耐药基因的检出率基本一致,但无绝对相关性。结果表明江苏地区沙门菌对氨基糖苷类药物耐药现象非常严重,且耐药基因广泛存在。

动物源性耐甲氧西林葡萄球菌耐药表型及基因型鉴定

通过耐药表型及基因型检测对临床分离的41株葡萄球菌进行了鉴定,鉴定出耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)16株,耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)4株。耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)阳性率达到48.8%,这提示兽医临床必须提高对MRS的重视,并为临床鉴定MRS提供了可借鉴的方法。