玉米联合固氮耐铵工程菌Enterobacter gergoviae-7(E7)在不同载体及玉米根际的存活规律

以草炭、腐植酸和水为载体接种玉米联合固氮耐铵工程菌Enterobactergergoviae -7(以下简称E7)制备菌剂 ,在常温条件下放置 5dE7菌数在载体内明显增加 ,1mo后E7菌数略有下降 ,2mo后E7菌数急剧下降 ,半年后E7活菌数降至n(CFU) =5 .0× 10 6～ 93.0× 10 6g- 1 ,3种菌剂中菌数的变化趋势一致 ,E7菌数残留量 :草炭菌剂 >液体菌剂 >腐植酸菌剂 ;用草炭菌剂拌种在生长 2 0d的玉米根区 (包括根系和根际土壤 ) ,E7菌数达到最大值 ,以后E7菌数下降 ,至灌浆期玉米根际未能检测到E7;不同接种方法试验结果表明 ,以草炭菌剂拌种 +种下 2cm穴施使玉米获得最高增产率 .(表 3)

玉米联合固氮工程菌的研究

用分子生物学手段改造玉米联合固氮菌, 解除铵对固氮酶合成的阻遏作用, 以期增加对宿主的氮素供应, 改善与宿主根系的相互关系。经接合转移法把载有组成型表达nifA 基因的pCK3 质粒导入从玉米根分离到的根际联合固氮菌Enterobactergergoviae577,得到耐铵工程菌E7 。E7 在50m mol/LNH+4 下恢复76% 固氮酶活性,接种E7 使玉米固氮率增加14% ,并促进玉米次生根分化及根系生长。E7 的接种效应与玉米品种有关。连续三年在白浆土、砂壤土低产田田间小区接种实验表明,在相同施肥水平条件下接种工程菌E7 比接种野生型菌平均增产8-8 % ,比不接菌对照平均增产12-3% ,生物统计差异显著(P= 0-05) 。在相同产量条件下,接种工程菌E7 比无菌对照节省15% ～20% 氮肥,比接种野生型菌节省15%