耐高糖酵母的筛选鉴定及其产多元醇分析

利用高糖选择性富集培养技术,从天然高糖环境蜂巢和蜂蜜中筛选到99株耐高糖酵母。随后,对随机挑选出的40株分别来自不同分离源的菌株做了摇瓶发酵试验,并且对发酵培养液中的多元醇种类进行了初步鉴定分析,确立了一种简单有效分离底物葡萄糖和多元醇类产物的层析方法,即以微晶纤维素板为展开介质,定性检测的展开剂及其配比为:乙酸乙酯∶吡啶∶冰醋酸∶水=16∶10∶2∶3。实验结果显示,筛选到的菌株以产D-阿拉伯糖醇和甘油的居多。根据形态学观察、生理生化试验和ITS序列的测定分析对试验菌株进行鉴定。鉴定结果表明,所筛选的菌株可被归为3种酵母菌,分别为Lodderomyces elongisporus,Zygosaccharomyces rouxii,Starmerella sp.。通过筛菌实验得到1株高产D-阿拉伯糖醇的菌株Z.rouxii JM-12,经气相色谱法定量分析,得到D-阿拉伯糖醇的产量为(61.33±0.49)g/L,实验结果为进一步研究产D-阿拉伯糖醇耐高渗酵母奠定了基础。

东北黑蜂椴树蜜中耐高糖酵母菌分离鉴定及透射电子显微镜观察

从东北特产椴树蜜中分离1株酵母菌,将初筛得到的酵母菌经过向发酵液中加入不同克数的葡萄糖发酵试验性能测定的比较,筛选出1株适合用于蜂蜜酿造的具有耐受80 g/100 m L葡萄糖的高糖特性的酵母菌YMI-37,采用透射电子显微镜(transmission electron microscope,TEM)观察酵母菌YMI-37在不同葡萄糖浓度下细胞内部结构变化,并对YMI-37进行生理生化特性和分子生物学的鉴定,根据生理生化和26S r DNA基因测序综合分析,初步鉴定为酵母菌属的酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)。

耐高温耐高糖酵母的筛选与驯化

从南疆水果表皮上筛选到54株耐高温酵母菌,通过富集培养、高温高糖驯化与筛选,得到3株优良菌株,在45℃高温、20%糖度条件下,其发酵性能均能达到常温(28℃)下酿酒酵母的发酵水平。

耐高糖面包酵母的研究

实验表明 ,蔗糖酶活力低的菌株 ,在高糖面团中发酵力较好 ;而麦芽糖适应性好的菌株 ,在无糖面团中起发速度较快。从 12株原始菌株中选出蔗糖酶活力最低 ,且麦芽糖适应性较好的BY 6菌进行DES诱变 ,以葡萄糖氧化酶 辣根过氧化物酶 邻联茴香胺偶联反应平板作为初筛平板 ,经蔗糖酶活力复筛得到 4株酶活力降低了的突变株。其中M 2 6菌蔗糖酶活力降低幅度最大 ,比BY 6菌降低了 2 7 0 4 % ,且麦芽糖适应性有所提高。经测定 。

耐高糖酿酒酵母原生质体制备与再生过程研究

对1株耐高糖酿酒酵母的原生质体制备和再生条件进行了研究。结果表明,发酵7h后为对数生长中期,适宜原生质体化;L1(65)确定制备原生质体的最佳条件为蜗牛酶浓度(1.0%)、KCl高渗缓冲液(0.7mol/L)、酶解时间(1.5h)、预处理剂(0.1%β-巯基乙醇)和酶解温度(26℃),在此条件下原生质体形成率和再生率分别为80.84%和36.03%;原生质体形成后在7%蔗糖高渗培养基上夹层培养再生率较高(39.78%)。

耐高糖面包酵母单倍体的分离筛选

以耐高糖面包酵母BY-6为出发菌株进行生孢培养制备单倍体,通过单倍体的分离、配型验证和PCR验证,获得6株α型单倍体,5株a型单倍体。通过比较单倍体菌株的生长和发酵性能,筛选出生长性能较好,在高糖模拟面团中产气量较大,并且在高糖面团中发酵力较高的优良单倍体菌株70a和24α,这为后续通过基因工程改造提高面包酵母的高糖耐性奠定了良好的基础。

酿酒酵母菌的耐高糖驯化研究

通过逐步提高培养基中糖的浓度,对实验室保存的3株酿酒酵母菌A1、A2和A3进行耐高糖驯化,并做了发酵力的对比试验。结果表明,菌株A1和A3通过驯化能耐35°Bx的糖度,并且具有良好的遗传稳定性。

细菌L-乳酸发酵的研究——耐高糖高酸菌株的选育

本文主要研究了L -乳酸发酵中耐高糖高酸菌株的选育及所选菌株的发酵特性情况。结果表明 ,出发菌株经离子注入诱变后 ,其生长的临界乳酸和葡萄糖浓度分别为 2 4g/L和 15 0g/L ,并经耐高糖高酸的选育和驯化后 ,得到一株在产酸速率和最终L -乳酸产量方面都比原始对照菌株高的目的菌株LB1- 1,其最终L -乳酸产量达到 70g/L ,出发菌株为 4 3g/L。

Tup1基因缺失对酿酒酵母耐高糖性状的影响

研究Tup1基因对酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)细胞耐高糖性状的影响。利用Cre/loxP系统对单倍体细胞中的转录因子Tup1基因进行敲除,单倍体细胞复倍后研究基因缺失菌株的性状变化。结果表明,Tup1基因缺失虽然减弱了菌株的呼吸能力,但却增强了菌株在高浓度葡萄糖培养基中的生长和发酵能力。Tup1基因可能通过调节酿酒酵母细胞呼吸强度来调控细胞的高糖应激反应。

耐高糖产香酵母菌的分离鉴定及其应用

酵母由于其富含多种营养物质且安全性高而被广泛应用于食品行业。该文为筛选1株具有耐高糖产香的菌株,以在多种糖的高糖培养基上生长,对发酵液风味物质进行测定等方法,筛选得到1株耐高糖产香的菌株,能在550 g/L葡萄糖、600 g/L蔗糖、600 g/L果糖、650 g/L麦芽糖、120 g/L NaCl的培养基上分别生长,并且发酵后由于产生乙酸甲酯,苯乙醇,苯乙醛等挥发性物质使发酵液具有玫瑰、风信子、果香等香气特征。通过18S rDNA序列比对鉴定其为鲁氏酵母Zygosaccharomyces rouxii,并命名为JNBZR01。将其添加入酱油、醋等发酵产品中有明显的提鲜作用。结果表明,筛选获得的该株鲁氏酵母在食品行业尤其是发酵食品中有潜在的应用价值。

耐高糖面包酵母发酵工艺优化

为了优化耐高糖酵母发酵工艺,基于培养温度、摇床转速、装液量、初始p H、菌体接种量五个因素的单因素实验的结果,之后对装液量、初始p H、菌体接种量进行响应面优化实验。结果表明,最佳工艺条件为:培养温度30℃,摇床转速200 r/min,装液量8.4%,p H4.7,接种量7.4%,在此条件下,酵母细胞干重提高了55.72%。同时,利用5.0 L机械搅拌罐以溶氧反馈流加、恒速流加、间歇流加三种糖蜜补充方式进行酵母细胞培养,绘制生长曲线,发现以溶氧反馈流加方式补充糖蜜更有利于酵母繁殖,最大酵母湿重达到143.95 g/L,达到了耐高糖面包酵母高密度发酵的实验水平,确定了酵母最佳的流加补料方式。

白酒酿造过程中耐高糖酵母的筛选及发酵产多元醇分析

为了解白酒甜味物质来源,从衡水老白干生产大曲和发酵酒醅中筛选的30株酵母为出发菌株,由耐高糖实验筛选出12株酵母,通过高效液相色谱-蒸发光散射检测法(HPLC-ELSD)定性、定量分析酵母发酵液多元醇。结果显示,12株酿造酵母均具有产多元醇能力,发酵液测得酵母所产多元醇分别为核糖醇、赤藓糖醇、甘油、甘露醇、D-阿拉伯糖醇,12株酵母都产甘油,且其中11株酵母均产三种多元醇,菌株Y2产多元醇的总量最多,为16.97 g/L,除甘油外,以D-阿拉伯糖醇最为常见且产量最高。

基于转录组学分析耐高糖酿酒酵母耐受脱氢乙酸钠胁迫的分子机制

该研究采用0.3 g/L脱氢乙酸钠处理处于对数生长期的耐高糖酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)BH1,以未处理组为对照,通过核糖核酸测序(RNA-Seq)技术对其进行测序及分析,并探究其耐受脱氢乙酸钠的分子机制。结果表明,与对照组相比,处理组有723个差异表达基因,其中表达上调基因253个,表达下调基因470个;通过基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析发现,上调基因集中在核糖体、氨基酸的合成与代谢、碳代谢、氧化磷酸化和糖酵解等代谢途径中,会导致蛋白合成与能量代谢受阻;下调基因集中在泛素依赖的蛋白水解途径和三磷酸腺苷(ATP)结合盒(ABC)转运体,有助于酵母水解受损蛋白和排出胞内脱氢乙酸钠;另外还有一组与铁离子稳态相关的差异表达基因(FIT2、FIT3、LOS1、SIT1、ARN1、TIS11、ISU1)显著上调,表明脱氢乙酸钠可能引起了酵母细胞内铁的缺乏。

耐高糖酵母的筛选及其在黄酒中的应用研究

从蜂蜜、葡萄、面包3种原料中提取天然酵母进行梯度驯化,再通过紫外诱变育种,筛选出具有耐高糖性质的酵母并对其相关特性进行研究,将筛选出的菌株应用于黄酒酿造过程。结果表明,筛选出的酵母可耐受的糖度、pH值、酒精度分别为40%,1.5和10%Vol,将其应用于黄酒发酵中,经过7 d发酵后,菌株降糖能力较传统菌株提高了20 g/L,酒精度提高了0.4%Vol,糖类物质转化率达到11%。采用自然驯化和紫外诱变育种相结合,得到适用于黄酒酿造生产的耐高糖酵母菌株。

中蜂蜜与意蜂蜜中的耐高糖酵母菌种鉴定

用加了抗生素的PDA培养基,分别分离中蜂蜜和意蜂蜜中的耐高糖酵母,再进行菌种鉴定。结果显示,中蜂蜜与意蜂蜜中的耐糖酵母为同一种,都为鲁氏接合酵母。

酵母菌高糖耐受机制的研究进展

在酒精浓醪发酵生产中,酵母菌在高糖度、高渗透压等恶劣环境下发酵产生乙醇的性能与其耐受机制有密切的联系。该文以酵母菌高糖耐受机制为切入点,介绍了耐高糖酵母菌的来源,高糖胁迫下酵母菌的应激反应,归纳已公开报道的与酵母菌高糖耐受机制可能有关的基因,借鉴真菌及细菌在转录组学与蛋白质组学水平上耐受性能及机制的研究,为基因水平上酵母菌高糖耐受机制的相关研究提供参考。

酸菜源耐高糖乳酸菌的筛选及其驯化

从内蒙古传统酸菜汁中分离出34株乳酸菌,经不同糖浓度MRS改良培养基中的耐糖筛选,获得1株耐糖能力较强的乳酸菌NMS5-1,其耐糖浓度可达48%。通过对菌株NMS5-1的耐高糖驯化,使其耐糖浓度可提高到55%,并且其活菌数达到3.6×108cfu/mL。通过L9(33)正交试验,菌株NMS5-1的最佳培养条件为培养温度35℃、初始pH值6.5、培养时间33 h,在此培养条件下其活菌数可达到8.3×108cfu/mL。

利用GS技术选育耐高温高糖葡萄糖酸盐生产菌

以Aspergillus niger-ZBY-7为出发菌株,用亚硝基胍-紫外复合诱变的方法分别获得了9株能够耐受高温和高浓度初始葡萄糖的菌株。通过GS(Genome Shuffling)技术,获得一株能耐受高温和高初始葡萄糖性状进一步提升的菌株,命名为Aspergillus niger-GS-30,其发酵温度从30℃提高到37℃,初始葡萄糖耐受浓度从10%提高到30%,葡萄糖消耗速率提高28.12%。通过5 L发酵罐水平实验表明,Aspergillus niger-GS-30在30%葡萄糖浓度、37℃条件下较出发菌株Aspergillus niger-ZBY-7适应期缩短2 h,发酵周期缩短3 h,转化率和产率都略有提高。

紫外-硫酸二乙酯复合诱变选育耐高渗(高糖)酵母菌

从内蒙古锡林郭勒酸马奶中分离筛选出一株酵母菌A9,通过A9的紫外(UV)诱变、硫酸二乙酯(DES)单因素实验,确定最佳诱变参数。结果表明,最佳紫外诱变参数为于30 W紫外灯下、距灯30 cm处、紫外照射75 s时,紫外诱变的致死率为78.9%;最佳的硫酸二乙酯诱变参数为将加入1%DES的菌悬液、在35℃的水浴恒温振荡箱中、振荡15 min,硫酸二乙酯诱变的致死率为76.1%。经过3轮连续复合诱变,筛选出4株突变菌株,与出发菌株A9共同进行耐高渗(高糖)实验,当耐高渗(高糖)培养基中的葡萄糖浓度为65%时,出发菌株A9的生长完全被抑制,而突变菌株A9-2在此条件下依旧生长,A9-2的耐高渗(高糖)性能明显高于A9,最终筛选出A9-2为最佳耐高渗(高糖)菌株。通过酒精发酵实验,突变菌株A9-2的10代发酵液,其CO2的总失重量为13.20 g,残糖量为13.9°Bé,酒精度5.1%(v/v),与3代发酵液各项指标相似,确定遗传性能稳定,且菌株发酵力、酒精度明显高于出发菌株A9。

树莓酵素中耐高渗酵母菌的分离鉴定及生长特性研究

从树莓酵素中分离酵母菌,通过形态学特征、生理生化指标及26S r DNA序列分析进行鉴定,并对其生长特性进行研究,以期为植物酵素食品生产提供酵母菌资源。鉴定结果表明:分离出的Y1、Y2、Y3三株菌形态学特征相似,且均可在高糖环境下生长,26S r DNA序列与鲁氏接合酵母的同源相似性均高于99%,确定Y1、Y2、Y3均为鲁氏接合酵母(Zygosaccharomyces rouxii,Z.rouxii);生长特性研究结果表明:当培养基初始葡萄糖含量为300、450、600、750 g/L时,该菌种均可生长,延滞期分别为12、12、36、60 h,葡萄糖初始含量为900 g/L,生长缓慢;当培养基初始pH为1.5和2.0时,菌种的生长受到抑制,当pH为2.5、3.0、3.5时,菌种可以生长,延滞期分别为96、48、48 h。鲁氏接合酵母为树莓酵素中的优势酵母,具有耐高糖、耐低pH等耐高渗特性。