耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的判定标准与抵抗耳中毒的能力

目的建立耳蜗外毛细胞(OHC)静纤毛束变异的判定标准,观察毛细胞静纤毛束变异对庆大霉素耳中毒的抵抗能力。方法对豚鼠测定听性脑干反应(ABR)阈值和畸变产物耳声发射(DPOAE)振幅后,选取静纤毛束正常和变异豚鼠各5只,连续肌注庆大霉素(grntamicin,GM)12d后,测定ABR阈值,扫描电镜观察耳蜗外毛细胞静纤毛束变异情况,耳蜗铺片计数毛细胞的损失数。结果耳蜗底回第一排外毛细胞静纤毛束转位超过45°、“W”变形数超过10%,作为豚鼠耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的判定标准。5只静纤毛变异豚鼠GM注射12d后平均ABR阈值51.0±8.76dBSPL,外毛细胞损失约16%～39.96%,柯替器受损程度较轻;而外毛细胞(OHC)正常豚鼠GM注射12d后ABR阈值上升到58.4～100dBSPL,OHC基本消失,柯替器毛细胞破坏较为严重。结论耳蜗外毛细胞静纤毛束变异豚鼠较OHC正常者对GM中毒具有较大的耐受能力。

链霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞钙敏感外向钾电流的影响

目的 :研究链霉素对豚鼠耳蜗外毛细胞底侧膜 K+ 电流的影响 ,以进一步揭示氨基甙类抗生素耳毒性的离子机制。方法 :全细胞膜片钳制技术。结果 :记录到 Ca2 + 敏感的外向 K+ 电流 [Ik(Ca) ];分别观察了 0 .1,1,10 ,10 0 ,10 0 0 μm ol/ L 链霉素对 Ca2 +敏感的外向 K+电流的影响。在指令电位 + 80 m V时 ,链霉素的抑制率分别为 0 ,(6 .72± 4.42 ) % ,(15 .5 4± 5 .43) % ,(18.0 2± 5 .32 ) % ,(30 .86± 11.2 1) %。结论 :链霉素以浓度依赖方式抑制 Ca2 +敏感的外向 K+电流 ,这可能是其急性耳毒性机制之一。

硝普钠对豚鼠单离耳蜗外毛细胞全细胞电流的影响

目的研究并探讨硝普钠(sodiumnitroprusside,SNP)对豚鼠耳蜗外毛细胞(outerhaircells,OHC)全细胞电流的影响及其作用机制。方法利用急性分离的OHC和特异性的离子通道阻断剂作为工具药,通过膜片钳电压钳记录技术观察了SNP对豚鼠耳蜗OHC全细胞电流的影响,结果①在以+40mV的指令电压刺激时,10-3mol/L的SNP抑制15.34±6.59%的细胞电流(n=5);②SNP对全细胞电流的抑制作用有电压依赖性,在刺激高于0mV时作用明显,10-2mol/L的SNP在+10mV时抑制率为4.97±1.74%,而在+40mV时的抑制率为33.82±1.61%;③SNP对全细胞电流的抑制呈量效关系,在浓度大于10-3mol/L时,抑制作用逐渐明显,10-1mol/L的SNP时接近达到最大抑制效应;④分离离子电流成分后,SNP仅对Ca2+电流有抑制作用。结论SNP对豚鼠耳蜗外毛细胞的全细胞电流的抑制作用,主要通过抑制细胞外Ca2+的内流,进而影响Ca2+依赖性K+通道而实现。

豚鼠耳蜗外毛细胞的急性分离及钾离子通道的研究

本文对豚鼠耳蜗离体外毛细胞的细胞活性及底侧膜处电压依赖性钾离子通道进行了研究，结果表明：（１）离体外毛细胞悬液保存在４℃时，可延长存活时间达７ｈ以上。（２）外毛细胞的静息电位：应用电流钳方法，在刚形成全细胞方式时其细胞内静息电位为－７３．７±６．９ｍＶ，２ｍｉｎ后为－９４．８±４．１ｍＶ（ｘ±ｓ，ｎ＝１０）。（３）全细胞方式记录到的电压依赖性外向Ｋ＋电流是由快钾电流和延迟整流钾电流两部分组成，快钾电流的激活电位为－６０～－５０ｍＶ，延迟整流钾电流的激活电位为－４０～－３０ｍＶ，电流－电压关系曲线呈“Ｓ形上升”趋势。外向Ｋ＋电流被ＴＥＡ（２０ｍｍｏｌ／Ｌ）阻断后。

噪声性听力损失与耳蜗外毛细胞Prestin蛋白的相关性分析

目的探讨噪声性听力损失(NIHL)与耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达的关系。方法将60只成年豚鼠随机分5组,除对照组外分别予以不同噪声声压级(85、95、105、115 d B SPL)的高斯白噪声暴露(28 d,6 h/d),而后检测听性脑干反应(ABR)以确定听阈位移水平,同时进行耳蜗病理学检查,采用免疫组化法分析耳蜗外毛细胞Prestin蛋白表达水平。结果各组豚鼠平均永久性听阈位移水平变化随着噪声暴露声压级的增强而增加(F=308.655,P<0.01),强噪声声压级组(>105 d B SPL)豚鼠的病理形态学显示明显的毛细胞损失,Prestin蛋白表达水平在高于95 d B SPL时随着噪声暴露声压级的增加而上调(F=700.072,P<0.01)。结论耳蜗外毛细胞Prestin的表达增高,与耳蜗外毛细胞损失程度有关。

应用显微荧光测钙技术研究乙酰胆碱对豚鼠耳蜗外毛细胞内游离钙的影响

介绍了应用显微荧光测钙技术研究豚鼠耳蜗外毛细胞（OHC）内游离钙浓度（[Ca^(2+)]i）变化的方法。该技术以钙敏感染料Fura－2作为胞内Ca^(2+)的指示剂，装载进入细胞后，与胞内游离Ca^(2+)结合，在特定波长光的激发下可发出荧光，由此可推算[Ca^(2+)]i的变化。结果发现乙酰胆碱（ACh）在含钙的细胞外液中可引起［Ca^(2+)］i升高。对显微荧光测钙技术在研究耳蜗毛细胞中的应用以及ACh引起［Ca^(2+)］i升高的机制进行了讨论。

豚鼠耳蜗单离外毛细胞和Deiters细胞的钾离子电流及其生理功能

目的 研究豚鼠耳蜗单离外毛细胞 (OHC)和Deiters细胞的钾离子电流及其特性 ,观察乙酰胆碱(ACh)和三磷酸腺苷 (ATP)对离子电流的影响。方法 运用全细胞膜片钳技术 ,分别记录单离OHC和Deiters细胞的离子电流。结果 OHC的长度不同 ,其钾离子电流表达具有差异性 ,短OHC具有较大外向电流和内向电流。ACh对短OHC钾离子电流的影响较大 ,其作用是使OHC超极化。ATP介导的OHC内向电流是非选择性的阳离子电流。ATP介导Deiters细胞出现内向离子电流。结论 K+ 电流在OHC的电谐振中非常重要。Deiters细胞能够通过减少K+ 外流、增加K+ 内流来缓冲周围环境中K+ 浓度的变化。

豁痰祛瘀法对糖尿病大鼠早期耳蜗毛细胞凋亡的影响

目的:探讨中医豁痰祛瘀法对四氧嘧啶糖尿病大鼠早期内耳病变中细胞凋亡的防护作用。方法:采用四氧嘧啶腹腔注射诱发糖尿病内耳病变大鼠模型,同时用中药复方高、低剂量灌胃治疗,并设立正常对照组、模型对照组、西药都可喜组(都可喜灌胃)、西药都可喜+优降糖组(二者混合灌胃),应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端技术(TUNEL)试剂盒进行测试。结果:TUNEL显示糖尿病大鼠耳蜗毛细胞、螺旋神经节细胞、血管纹内皮细胞出现凋亡细胞,而正常对照组无阳性凋亡细胞,模型对照组TUNEL阳性细胞数均明显高于中药复方组(P<0.05)。结果:豁痰祛瘀中药能够抑制糖尿病导致的耳蜗外毛细胞、螺旋神经节细胞等细胞的凋亡,改善听功能。

庆大霉素及其代谢产物对外毛细胞内游离钙浓度的影响

目的 探讨庆大霉素（ＧＭ）耳毒性与耳蜗外毛细胞（ＯＨＣ）内游离钙（［Ｃａ２＋］ ｉ）之间的关系。方法 离体耳蜗ＯＨＣ经钙荧光指示剂Ｆｌｕｏ－３负载后，用激光扫描共聚焦显微镜测定高钾溶液、ＧＭ、ＧＭ代谢产物等对ＯＨＣ［Ｃａ２＋］i的影响。结果ＧＭ使［Ｃａ２＋］i短暂下降，并阻滞高钾溶液引起的钙内流；ＧＭ代谢产物则使［Ｃａ２ ＋］ｉ持续升高，对高钾引起的钙内流无明显影响。结论 ＧＭ耳毒性与外毛细胞［Ｃａ２＋］i持续升高有关。

糖尿病对听力及耳蜗形态学结构影响的相关因素

背景:糖尿病是多种病因引起以高血糖为特征的代谢紊乱内分泌性疾病,由于患者长期高血糖状态可引起微血管病变,导致患者听力下降、耳鸣。糖尿病与听力损伤的关系密切,糖尿病听力损伤的发病机制可能与糖尿病引起的微血管病变和代谢紊乱有关。目的:从耳蜗微循环、细胞稳态、遗传及衰老等方面了解糖尿病听力损伤的原因,来揭示目前尚未完全明确的糖尿病听力损伤机制,为临床治疗方案的选择和预后的判断提供根据。方法:糖尿病与听力损伤的关系密切,糖尿病听力损伤的发病机制可能与糖尿病引起的微血管病变和代谢紊乱有关。从耳蜗微循环、细胞稳态、遗传及衰老等方面了解糖尿病听力损伤的原因,来揭示目前尚未完全明确的糖尿病听力损伤机制。结果与结论:糖尿病患者听力损伤属于糖尿病微血管病变,耳蜗微循环在听觉生理中起着十分重要的作用,内耳许多疾病与微循环障碍有关,耳蜗微循环障碍引起耳蜗缺血和缺血后再灌注损伤是导致听力损伤的重要原因。

耳蜗微音器电位临床操作要点

耳蜗微音器电位(cochlear microphonics,CM)是来源于耳蜗外毛细胞的一种突触前电位,波形随刺激声的波形变化而变化,特点是完全复制刺激声的声学波形[1]。CM可通过耳蜗电图诱发,也可通过分离ABR波形获得。本文简述临床上耳蜗微音器电位检查的操作要点,供同行参考。

耳蜗切除与下丘核—耳蜗声信号通路重塑

下丘核（inferiorcolliculus，IC）是最重要的听中枢皮层下汇聚站，在声信号处理过程中起着至关重要的作用。它主要通过内侧橄榄-耳蜗系统（medialolivocochlearsystern，MOC）和外侧橄榄-耳蜗系统（1ateralolivocochlearsystem，LOC）与耳蜗外毛细胞（OHC）以及内毛细胞（IHC）发生功能联系，并受高一级中枢和听皮层的调控。IC通过调控MOC和LOC神经元影响外毛细胞和内毛细胞，并抑制蜗神经的输出，同样耳蜗结构和功能的变化也通过该通路来影响IC的结构和功能。本文中，我们将就耳蜗切除后如何影响下丘核-耳蜗声信号通路的重塑进行综述。

丹参对低气压噪声暴露豚鼠耳蜗一氧化氮合酶活性的影响

目的探讨丹参对低压及噪声环境下豚鼠耳蜗诱导型一氧化氮合酶(iNOS)活性的影响。方法豚鼠随机分为暴露1 d 及7 d 两大组,又各分为对照、治疗及防治组。3组均置于模拟高原5 500 m 低气压环境,110 dB SPL 白噪声刺激;防治组和治疗组每日肌注丹参注射液(1.3 ml·kg^(-1))。采用免疫组织化学和图像分析半定量法,观察暴露后不同时间各组耳蜗 iNOS 的表达和阳性产物的平均灰度值。结果正常耳蜗未见 iNOS阳性表达。低压噪声暴露后豚鼠耳蜗外毛细胞、内毛细胞、血管纹及螺旋神经节等部位均可见 iNOS 呈棕黄色颗粒的阳性反应。耳蜗 iNOS 阳性反应各组随暴露时间延长逐渐增强。随出舱后时间延长而逐渐减弱。除暴露1 d 组出舱1 d 的对照组与治疗组的灰度值差异不显著(P>0.05)外,其它各组间差别显著(P<0.05)。暴露7 d 组的防治组、治疗组与对照组、防治组与治疗组间差异非常显著(P<0.01)。结论低压噪声暴露后,豚鼠耳蜗内 iNOS 阳性反应随暴露时间延长逐渐增强,随出舱后时间延长而逐渐减弱;丹参的抗氧化反应.可减轻iNOS 对一氧化氮(NO)的生成.可能为丹参对低压噪声暴露后听器损伤具一定保护功能的机理之一。

耳声发射对侧抑制现象与耳鸣关系的研究现状

1978年Kemp首次发现耳声发射（otoacoustic emission，OAE）。这是一种产生于耳蜗，经听骨链及鼓膜传导，释放入外耳道的音频能量，源于外毛细胞的主动活动。耳声发射作为一种客观的听觉功能检查手段，依赖于耳蜗整体功能的完整，与耳蜗外毛细胞的功能密切相关。1990年听力学家Collet首次发现了对侧声刺激对耳声发射的影响，即给予人类单侧耳刺激声可引起对侧耳耳声发射幅值的下降，这种现象称为耳声发射的对侧抑制现象。Grose和Mott在随后的动物实验中同样证明了这个观点。迄今为止，有关耳声发射对侧抑制现象的相关性研究工作已有诸多报道。

畸变产物耳声发射与临床应用

耳声发射（otoacousticemissions，OAE）是一种客观的非损伤的耳蜗功能检查法，OAE测试能反映耳蜗外毛细胞及传音结构的功能状态。本文介绍了耳声发射的类型及其特点，详细介绍了畸变产物耳声发射，结合笔者在临床应用实践，介绍了畸变产物耳声发射测试的优越性及临床应用和意义。