两种豚鼠听毛细胞分离法比较

目的对耳蜗灌注法和酶解加机械分离法的结果进行比较，并观察单离毛细胞的形态和存活情况。方法用耳蜗灌注法及酶解加机械分离法分离豚鼠听毛细胞，并在倒置相差显微镜下观察单离毛细胞。结果用耳蜗灌注法，７只豚鼠，７耳，平均每耳可分离出长于３０μｍ的外毛细胞１７３个（１１６～３３９），短于３０μｍ的外毛细胞１３０个（５０～４４７），内毛细胞０～１０个。室温下短期培养６ｈ后，长于３０μｎ的外毛细胞有１２３个（５８～３３６），短于３０μｍ的外毛细胞有１０３个（２０～２９６）。用酶解加机械分离法，７只豚鼠，７耳，平均每耳可分离出长于３０μｍ的外毛细胞７２个（２１～１５２），而短于３０μｍ的外毛细胞及内毛细胞则未能分离出。室温下短期培养６ｈ后，长于３０μｍ的外毛细胞有３０个（８～５６）。毛细胞损伤表现为细胞扭曲，细胞顶部表皮板脱落。细胞变性表现为细胞膜不平，细胞水肿，随时间变化逐渐加重。死亡表现为细胞核不被中性红染色。结论用耳蜗灌注法分离毛细胞简便易行，能提供足够量的存活时间较长的外毛细胞，而用酶解加机械分离法分离的毛细胞数相对较少，存活时间相对较短。