葛根素对豚鼠耳蜗缺血再灌注损伤时听功能和NF-к Bp65的影响

目的探讨葛根素在豚鼠椎基底动脉缺血/再灌注耳蜗损伤中的保护作用及分子机制。方法纯白雄性豚鼠32只随机分为4组:正常对照组(n=8)、缺血再灌注7d组(n=8)、生理盐水组(n=8)和用药组(n=8)。除正常对照组外的所有豚鼠均进行手术造模。用药组在缺血再灌注开始时,腹腔注射葛根素150mg/(kg·d),每日1次,连用6d。生理盐水组操作同用药组,但以等容量生理盐水代替葛根素。应用听觉脑干反应评价听功能。采用石蜡包埋的免疫组织化学技术,对各组近中轴位切片行NF-кBp65免疫组织化学染色。结果用药组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期明显缩短,阈值降低。正常对照组、缺血再灌注7d组、用药组与生理盐水对照组ABR各波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异有显著性(P<0.01)。正常对照组与用药组ABRⅢ、Ⅳ波潜伏期、Ⅰ～Ⅲ波间期和阈值比较差异无显著性(P>0.05)。用药组NF-кBp65表达与缺血再灌注7d组比较明显下调差异有显著性(P<0.01)。结论葛根素具有保护耳蜗缺血再灌注损伤的作用。其保护作用的机制可能与下调NF-кBp65表达表达有关。

泻火化瘀通窍法对感音性耳聋大鼠HMGB1/RAGE信号通路的影响

目的探讨泻火化瘀通窍法对高迁移率族蛋白B1(highy mobility group proteinboxl,HMGB1)/晚期糖基化终末产物受体(advanced glycation end product receptor,RAGE)介导的耳蜗缺血再灌注损伤(cochlea ischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠的作用效果及机制。方法36只健康SPF级SD大鼠,雌雄各半,平均体质量(220±20)g。采用随机数字表法将大鼠分为假手术组、模型组、泻火化瘀通窍低剂量组(12.5g/kg)、泻火化瘀通窍中剂量组(25.0g/kg)、泻火化瘀通窍高剂量组(37.5g/kg)和地塞米松组(20mg/kg),每组各6只。以血管阻断法建立CIRI大鼠模型,并给予相应药物干预。测定大鼠脑干听觉诱发电位(brainstem auditory evoked potential,BAEP)阈值,苏木精-伊红染色观察大鼠耳蜗组织病变并定量评分,酶联免疫吸附法测定耳蜗组织丙二醛(malondialdehyde,MDA)、过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的含量及活性,蛋白质印迹法检测大鼠耳蜗组织HMGB1、RAGE、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、磷酸化核因子-κB p65(phosphorylation nuclear factor-κB p65,p-NF-κB p65)、胱天蛋白酶-3(caspase-3)及活化caspase-3(cleaved-caspase-3)的蛋白表达情况。结果与假手术组相比,模型组大鼠耳蜗毛细胞变形、缺损严重,苏木精-伊红半定量评分均显著增加(P<0.01),SOD、CAT活性含量均显著降低(P<0.01),而BAEP阈值、MDA含量均显著升高(P<0.01),HMGB1、RAGE、TNF-α、IL-1β、p-NF-κB p65、cleaved-caspase-3/caspase-3蛋白表达均显著增加(P<0.01);与模型组相比,泻火化瘀通窍各剂量组和地塞米松组大鼠的CAT活性含量均显著上升(P<0.01),泻火化瘀通窍中、高剂量组和地塞米松组大鼠的苏木精-伊红半定量评分、BAEP阈值、MDA含量、HMGB1和cleaved-caspase-3/caspase-3蛋白表达均显著降低(P<0.05),泻火化瘀通窍高剂量组和地塞米松组大鼠的RAGE、p-NF-κB p65、TNF-α、IL-1β蛋白表达均显著降低(P<0.05)。结论泻火化瘀通窍法对CIRI大鼠具有改善作用,其作用与抑制HMGB1/RAGE信号通路有关。