CpG ODN、氢氧化铝和大肠埃希菌不耐热肠毒素无毒突变体联合佐剂对猪轮状病毒△VP8亚蛋白免疫效果的影响

目的评价Cp G ODN、氢氧化铝[Al(OH)3]和大肠埃希菌不耐热肠毒素(heat-labile enterotoxin,LT)无毒突变体联合佐剂对猪轮状病毒(porcine rotavirus,PRV)△VP8*亚蛋白免疫效果的影响。方法将LT A亚基上63位丝氨酸突变为赖氨酸,构建LT的无毒突变体重组表达质粒p ET-30a(+)-LTK63,于E.coli表达重组蛋白LTK63,并进行纯化。将小鼠随机分为LTK63+Al(OH)3组、Cp G ODN+Al(OH)3组、Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组及Al(OH)3对照组,将P2-SB-1AΔVP8*抗原蛋白分别与各组相应佐剂共同免疫小鼠,均经颈部皮下注射,隔2周免疫1次,共3次,于每次免疫后14 d采血,分离血清,间接ELISA法检测血清抗体效价及Ig G亚型;末次免疫2周后,MTT法检测小鼠特异性淋巴细胞的增殖。结果经双酶切及测序鉴定,重组质粒p ET-30a(+)-LTK63构建正确;表达和纯化产物经SDS-PAGE及Western blot分析,均可见相对分子质量约33 000(A亚基)和13 000(B亚基)的目的蛋白条带。二免后,Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组的抗体滴度显著高于LTK63+Al(OH)3组、Cp G ODN+Al(OH)3组和Al(OH)3对照组(P<0.05);末次免疫后2周,Cp G ODN+Al(OH)3组抗体滴度显著高于Al(OH)3对照组、Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3组和LTK63+Al(OH)3组(P<0.001);Cp G ODN+LTK63+Al(OH)3和LTK63+Al(OH)3组小鼠血清中Ig G2a和Ig G1水平相当,Cp G ODN+Al(OH)3组血清抗体以Ig G2a为主,Al(OH)3对照组血清Ig G以Ig G1为主;Cp G ODN+Al(OH)3组小鼠特异性淋巴细胞的增殖能力最强。结论 Cp G ODN+Al(OH)3联合佐剂表现出明显的协同效应,可显著提高小鼠对PRV△VP8*亚蛋白的体液免疫和细胞免疫应答。

铝佐剂的作用机制研究进展

随着亚单位疫苗、合成肽疫苗等新型疫苗的出现,免疫佐剂的研究也逐渐得到人们关注,铝佐剂作为唯一被应用于人用疫苗的佐剂,其作用机制尚未完全明确。随着研究的深入,早期的部分理论也面临诸多质疑。本文结合近年来对铝佐剂自身性质、作用机制等研究数据进行论述,以求促进对铝佐剂作用机制的深入了解和应用。

免疫佐剂的联合应用研究进展

佐剂通过调节或增强机体对抗原的免疫应答来提高疫苗的效力,同时可减少抗原用量,提高疫苗的安全性.随着对佐剂的研究,人们发现两种或两种以上佐剂联合应用时可通过激活多种免疫机制发挥协同作用.对于一些难以清除的病原体和免疫系统功能低下的人群来说,更为迫切需要高效力的疫苗,而这可通过佐剂的联合应用予以解决.对一些新型佐剂及其联合应用进展进行综述,包括脂质体、免疫刺激复合物、Montanide油佐剂、聚阳离子肽IC31、纳米乳佐剂和AS佐剂系统等.