联合细胞培养在组织工程血管化中的应用

自从1987年正式提出组织工程这一概念来以来,培养具有生物学活性组织器官替代物始终是组织工程学的发展方向。目前,虽然一些工程化组织如皮肤、软骨等已被成功构建,并应用于临床,但其他工程化组织如心脏、骨骼肌、肝脏等体积大、功能复杂,移植后难以及时建立血液供应。而及时建立的血管网络对组织器官的存活与功能实现至关重要。为此,国内外一些实验室采用联合细胞培养的方法,观察不同细胞间的相互作用对血管形成的影响。结果表明,联合细胞培养在血管的形成、稳定和成熟方面起着重要作用。

联合细胞培养在组织工程中的研究进展

组织器官是由多种细胞构成的,各细胞之间相互作用、相互影响,共同承担复杂组织的结构和功能.近年来,学者们越来越发现单一种子细胞难以完成构建复杂组织的需要.比如构建骨骼既要赋予支架材料成骨活性又要促进支架材料的血管化；

嗅鞘细胞和骨髓基质细胞的联合培养研究

目的探讨体外联合培养嗅鞘细胞(OECs)和骨髓基质细胞(BMSCs)的可行性及形态学观察。方法将原代培养的OECs和BMSCs消化制成细胞悬液,以相同比例接种,接种密度为104/ml。10 d后将联合培养的细胞置于倒置相差显微镜下进行形态学观察,并于鉴定前2 d加入细胞掺入剂BrdU,应用P75抗体和BrdU抗体对联合培养的细胞进行免疫荧光鉴定。结果联合培养的细胞在24 h内均完全贴壁,培养5 d后镜下可见细胞形态主要有3种:①双极、三极或多极形;②短梭形,突起较短;③扁圆形或不规则形。到第10天时部分细胞相互编织成网,部分细胞生长呈条索状,相互平行。荧光鉴定显示:荧光双标阳性者(既发红色荧光又发绿色荧光)为OECs,只发红色荧光而不发绿色荧光者为BMSCs。结论OECs与BMSCs在体外可以很好的联合培养,生物学特性均保持不变,为体内联合移植奠定了基础。

枯否细胞在大鼠烫伤早期肝损伤中的作用

目的 探讨枯否细胞在烧伤后对肝细胞的作用。方法 以 30 % 度烫伤大鼠为模型 ,采用枯否细胞与肝细胞联合培养体系 ,检测培养上清中 MDA、TNF、AL T、L DH的变化及添加 TNF单抗的影响。结果 烧伤后活化的枯否细胞与正常肝细胞及烧伤后受损肝细胞联合培养组上清中 AL T、L DH、MDA、TNF含量显著增高 ;在培养上清中加入 TNF- α单抗后培养上清中 TNF含量较对应组显著下降 ,但 AL T、L DH却无明显改变。结论 烧伤后肠源性内毒素等可激活枯否细胞 ,而活化后的枯否细胞在体外亦能持续合成并分泌毒性介质 (如氧自由基、TNF等 ) ,从而介导肝细胞的损害 ,且这种损伤作用对受损的肝细胞更明显 ;TNF对肝脏无直接损害效应 ,必须依赖于其他因素 ,如