聚丙交酯-乙交酯微球搭载鹿茸多肽联合骨髓间充质干细胞对大鼠坐骨神经损伤的修复作用及其机制

目的:观察聚丙交酯-乙交酯(PLGA)微球搭载的鹿茸多肽(VAP)联合骨髓间充质干细胞(BMMSCs)对大鼠坐骨神经损伤的修复作用,探讨其相关作用机制。方法:横断法复制大鼠外周神经损伤模型。60只大鼠随机分为坐骨神经横断对照组(对照组)、VAP微球组(VAP组)、BMMSCs移植组(BMC组)和VAP微球联合BMMSCs移植组(VAP-BMC组),每组15只。造模7d后,对照组大鼠在横断坐骨神经区域注射PBS溶液,VAP组大鼠在相同位置注射含有载药PLGA微球的PBS溶液,BMC组大鼠注射含有BMMSCs的PBS溶液,VAP-BMC组大鼠注射含有载药PLGA微球和BMMSCs的PBS溶液。3个月后采用Basso、Breattie和Bresnahan (BBB)运动评级量表评估各组大鼠的神经功能,HE染色检测各组大鼠坐骨神经组织形态表现,Western blotting法检测各组大鼠坐骨神经组织中二硫键异构酶(PDI)、葡萄糖调节蛋白78 (GRP-78)和半胱胺酸蛋白酶12 (Caspase-12)蛋白表达水平。结果:BBB运动评级量表评估,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠BBB评分升高(P<0.01),以VAP-BMC组大鼠BBB评分升高最明显。HE染色,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠坐骨神经纤维更粗,轴突直径更长(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,VAP组、BMC组和VAP-BMC组大鼠坐骨神经组织中PDI和Caspase-12蛋白表达水平明显降低(P<0.01),VAP-BMC组大鼠坐骨神经组织中GRP-78蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:PLGA微球搭载VAP联合BMMSCs可促进受损坐骨神经的修复,其作用机制可能与抑制内质网应激有关联。

重组人生长激素聚乙交酯-丙交酯微球体外释放度研究

目的 研究重组人生长激素(rhGH)聚乙交酯-丙交酯共聚物微球体外释放规律,并考察附加剂对药物释放的影响。方法 以分子排阻色谱法测定34 d释放液中rhGH含量。考察①不同有机溶剂;②不同比例PLGA;③外水相中加入缓冲盐;④内水相中加入乳化剂;⑤rhGH投入量不同对微球释放的影响。结果制备载生长激素聚乙交酯-丙交酯(PLCA)微球时,采用醋酸乙酯或二氯甲烷做溶剂对微球中药物释放没有显著性影响;采用不同比例PLGA对微球释放有显著性影响,其中以乙交酯:丙交酯=75:25比例的PLGA累积释放量最高;外水相中加入缓冲盐,内水相中加入乳化剂使累积释药量降低;随着生长激素投药量的增加,累积释药量增加。结论 重组人生长激素聚乙交酯-丙交酯共聚物微球体外释放有显著的长效作用,释放速度受到前面5种因素的影响。

聚丙交酯(PL)/丙交酯-聚乙二醇共聚物(PLEG)共混微球的制备、表征及释药行为

PL 与 PL EG是生物降解、生物相容的高分子材料 ,利用它们作为药物控释载体已引起人们广泛的重视。我们合成了含不同 PEG链段长度的 PL EG共聚物 ,并利用 PL 与 PL EG这两种材料各自的优点制备载有人绒毛促性腺激素 (h CG)的共混微球以提高 h CG在微球中的包埋率 ,结果表明采用 P(L- co- PEG6 0 0 0 ) (90 :10 )与 PL共混制备得到的微球中 ,h CG的包埋率高于单独用 PL 或 PL EG制得的微球。h CG的体外释放为突破 -缓释过程 。

一阶导数光谱法测定聚丙交酯微球中5-氟尿嘧啶或醋酸地塞米松的含量

二氯甲烷-无水乙醇混合溶剂溶解聚丙交酯微球,一阶导数紫外分光光度法测定5-氟尿嘧啶或醋酸地塞米松的含量。以一阶导数光谱5-氟尿嘧啶277nm和醋酸地塞米松266nm波长处的零谷距作为定量指标,线性关系良好,测定方法简便、快捷、准确。

全反式维甲酸聚丙交酯乙交酯微球的制备

全反式维甲酸（ａｌ－ｔｒａｎｓ－ｒｅｔｉｎｏｉｃａｃｉｄ，ＡＴＲＡ）对白血病细胞具有诱导分化、成熟作用，已被广泛使用于治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）。但是ＡＴＲＡ给药次数多（每日口服３～４次），峰浓度高，不良反应大。本研究以聚丙交酯乙交酯［ｐｏｌ...

聚丙交酯复合乙交酯微球经肝动脉化疗栓塞术治疗肝癌的动物实验

目的 :在肝细胞癌动物模型上观察聚丙交酯复合乙交酯 (PLcG)微球经肝动脉化疗栓塞术 (TACE)治疗肝癌的疗效。方法 :在雄性ACI大鼠 ( 15例 )肝包膜下植入MorrisHepatoma 392 4A肝癌小瘤块 ( 1mm3) ,移植术后 13天时行磁共振检查。再经正中腹切开术和经胃十二指肠动脉逆行插管进行以下介入治疗 :治疗组A( 40mgPLcG + 0 .0 5mg丝裂霉素 ,4例 )、对照组B( 0 .0 5mg丝裂霉素 + 0 .0 4mg碘化油 +肝动脉结扎 ,4例 )和对照组C( 1.5ml生理盐水 ,7例 )。插管术后 13天再次行磁共振术观察肝肿瘤体积变化。结果 :在C组 ,肿瘤体积在实验期间增长 2 7.12倍 ,在B组 ,肿瘤体积增长 3.76倍 ,而在A组 ,肿瘤体积仅增长 2 .87倍。A组与C组肿瘤体积增长率在t检验时均有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 :在动物实验中将PLcG微球运用于TACE可明显抑制肝肿瘤生长。

中心多点等距设计法优化醋酸地塞米松聚丙交酯微球的制备工艺

目的：中心多点等距设计法优化醋酸地塞米松聚丙交酯微球的制备工艺，以提高微球性质的可预测性。方法：微球用溶剂挥发／萃取法制备，自变量为外水相聚乙烯醇浓度、有机相聚丙交酯浓度和投药比，以微球收率、载药量、包封率、平均粒径和跨距为因变量对自变量的各水平进行多元线性回归和二项式拟合，因变量面法选取较佳工艺条件并于较优区进行预测分析。结果：载药量和包封率可用线性模型拟合，复相关系数γ２分别为０９８６和０９９１；载药量、粒径和跨距可用二项式拟合，复相关系数γ２分别为０９９８，０９１２和０９３５，包封率、平均粒径和跨距的预测值与实测值的偏差分别为－４０９％，－５１８％和－８３３％。结论：中心多点等距设计法优化处方与制备工艺有使用方便，预测性良好的特点，值得推广应用。

脉冲电刺激对改性纳米羟基磷灰石／聚丙交酯-乙交酯复合材料表面成骨细胞增殖及成骨活性的影响

背景:目前,骨组织工程的研究主要集中在成骨细胞特性研究和骨修复材料研制两大领域,而对细胞与细胞外材料的相互作用,尤其是调节和促进两者间相互作用的相关研究尚未给予足够的重视。目的:在低聚乳酸接枝纳米羟基磷灰石/聚丙交酯-乙交酯(Hydroxyapatite nanocrystals surface-grafted with L-lactic acid oligomer/Poly(lactide-co-glycolide),op-HA/PLGA)复合材料上接种成骨细胞,观察脉冲电场刺激对成骨细胞增殖和成骨相关基因表达的影响。设计、时间及地点:对比观察实验,于2008-05/2009-01在中国科学院长春应用化学研究所高分子物理与化学国家重点实验室完成。材料:op-HA和PLGA由中科院长春应用化学研究所制备。方法:实验分为PLGA无电刺激组、op-HA/PLGA无电刺激组、PLGA电刺激组和op-HA/PLGA电刺激组。将op-HA/PLGA和PLGA氯仿溶液分别于盖玻片表面铺成薄膜,并接种兔成骨细胞,体外培养7d。电刺激组刺激电压为2V,频率为1Hz,占空比为20%,每天刺激1h。主要观察指标:流式细胞仪检测细胞周期,Real-time PCR检测骨形态发生蛋白2、Ⅰ型胶原蛋白、骨连接蛋白的表达。结果:脉冲电刺激组op-HA/PLGA上生长的成骨细胞S期细胞百分比明显高于其他组(P<0.05)。op-HA/PLGA与PLGA比较能上调骨形态发生蛋白2、Ⅰ型胶原蛋白、骨连接蛋白3种基因表达量,并且施加脉冲电刺激组骨形态发生蛋白2、Ⅰ型胶原蛋白、骨连接蛋白3种基因表达量高于未加电刺激组。结论:op-HA/PLGA复合材料是一种很好的骨修复材料,脉冲电刺激能促进成骨细胞在材料上的增殖能力,提高成骨活性相关基因的表达水平。

聚丙交酯-乙交酯共混膜与梯度膜的体外降解特性研究

以聚丙交酯-乙交酯(PLGA)50/50与75/25为原料,采用流延法制成薄膜,其中包括PLGA50/50单成分膜、PLGA75/25单成分膜、两者的共混膜以及成分非均匀分布的梯度膜,将4种不同类型的膜浸泡在37℃、pH=7.4的磷酸盐缓冲液中进行体外降解实验。对4种膜降解过程中的分子量、质量损失、吸水率、pH值以及表面形貌等性能进行分析。结果表明,PLGA梯度膜具有最平稳的降解特性。

聚丙交酯-乙交酯聚合物(PLGA)涂层体外降解行为研究

为了防止心血管支架植入后再狭窄的发生,目前采用将抑制平滑肌细胞生长的药物通过高分子载体涂在支架表面。由于支架植入体内后,涂层受到血液冲刷作用。本工作采用可降解高分子材料PLGA作为载体,将PLGA薄膜置于体外循环冲刷装置中,在37℃、pH7.4的Hank’s模拟体液、模拟血流冲刷作用下的体外降解,并与静态降解作为对比。采用SEM、GPC1、H-NMR和DSC技术研究了聚合物在降解过程中形貌、分子量及分子量分布、失重率、组成和热性能的变化,并对降解机理进行探讨。与静态降解相比较,在流动体液中,高分子载体表面形貌、失重率以及分子量变化均较慢。上述结果与表面微环境有关。

玻璃体内注射用醋酸地塞米松聚丙交酯缓释微球

目的 研制玻璃体内注射用醋酸地塞米松聚丙交酯微球 (DA PL MS)及其相关性质 ,并在家兔玻璃体内注射 ,观察治疗实验性增殖性玻璃体视网膜病变 (PVR)的效果。方法 溶剂挥发 萃取法制备DA PL MS ,考察微球的粒径大小与分布、载药量、包封率和体外释放特性 ,用差示扫描量热分析和X 射线粉末衍射分析鉴别物相 ,并考察眼内安全性及组织中的分布。观察巨噬细胞造型白化家兔眼 ,确定玻璃体内注射微球后对PVR的防治效果。结果 微球的平均几何粒径为 6 2 94μm ,跨距为 0 92 ,载药量为 17 5 0 % ,包封率 86 5 2 % ,体外 90d释放约 90 % ,比原药延长约一倍。空球组对治疗PVR无效 ;原药组对治疗PVR有短期作用 ,作用时间为 42d ;微球组药效持久 ,84d时眼底仍清晰 ,无明显增生与牵拉 ,且未发现明显的刺激性及毒性。结论 DA PL MS玻璃体内注射给药有较高的安全性 。

聚丙交酯-乙交酯支架结合脂肪源性干细胞构建组织工程尿道

背景:生物电喷雾与静电纺丝技术的结合能促进活细胞和支架材料的直接整合,可将细胞均匀地分布在支架纤维间,是制备含细胞支架的一种很有前景的替代方法。目的:分析多方法结合制备富含脂肪源性干细胞(adipose derived stem cells,ASCs)的聚丙交酯-乙交酯[(poly(lactide-co-glycolide)),PLGA]三维支架作为尿道组织重建材料的可行性。方法:采用静电纺丝和细胞生物电喷雾相结合的方法将ASCs整合到PLGA中得到支架PLGA-ASCs,采用静电纺丝技术制备单纯PLGA支架,检测两种支架的微观结构、体外降解性能、机械性能与残留溶剂含量,MTT法检测PLGA-ASCs支架中的细胞活性。将PLGA-ASCs支架培养于37℃细胞培养箱内,培养1,7,15 d后,采用MTT法检测细胞活性,扫描电镜观察和共聚焦显微镜观察支架上的细胞生长与扩散。结果与结论:①扫描电镜显示,两种支架的纤维表面光滑,其中ASCs随机分布在PLGA-ASCs支架上,PLGA-ASCs支架的纤维平均直径、支架厚度大于PLGA支架;PLGA-ASCs支架内的细胞存活率为(87.0±4.4)%,支架中的细胞整合效率为28%;②体外降解实验显示,PLGA支架的重均分子质量在前15 d下降较快,PLGA-ASCs的重均分子质量在15-45 d下降更快,至45 d时两组支架的重均分子质量无差异;③PLGA-ASCs支架的杨氏模量、最大载荷及最大延伸率低于PLGA支架;④在培养的1-7 d内,PLGA-ASCs支架内的细胞数量逐渐增加,在7-15 d内细胞数量无明显增加;⑤扫描电镜观察和共聚焦显微镜显示,随着培养时间的延长,PLGA-ASCs支架内的细胞数量逐渐增加并与支架整合;⑥结果表明,PLGA-ASCs具有良好的理化性能与生物活性,可作为尿道组织重建材料。

聚丙交脂-乙交酯纤维的温压成形

通过溶液沉析纺丝法制备聚丙交酯乙交酯(PLGA)纤维,观察纤维的形貌并对其进行XRD和SEM表征。采用纤维温压成形法控制压力和温度得到条形的PLGA材料结合试样断口分析,研究成型压力与温度对PLGA材料的力学性能的影响。研究结果表明:非晶多孔结构的PLGA纤维可通过溶液沉析纺丝的方法获得,其孔径为0.1～1.0μm;压制压力和压制温度对材料的力学性能影响较大,材料的抗弯强度、剪切强度和抗弯模量均随着温度和压力的增大而先增大后降低;在压制压力为105MPa,压制温度为160℃时,试样的力学性能比较理想,此时,其抗弯强度可达到187.3MPa,剪切强度达到100.1MPa,抗弯模量达到2.5GPa,可望作为非承重部位骨折愈合内固定材料。

氟尿嘧啶聚丙交酯微球的制备及体外特性

目的:制备缓释1月以上的氟尿嘧啶(Fu)聚丙交酯微球。方法:溶剂挥发法制备Fu聚丙交酯微球,比较外水相Fu饱和与否,有机相Fu/聚丙交酯投料比对载药量及包封率的影响。光学及电子显微镜下对微球的外观形态进行考察,并对其体外释放进行初步探讨。结果:制得的微球光滑圆整。Fu饱和外水相后可以提高其载药量及包封率,投料比对载药量、微球的粒径和跨距影响不大,包封率随投料比增大而减小。Fu从聚丙交酯微球中4周时约释放总量的65％,符合一级动力学,没有明显的突释效应。结论:外水相Fu饱和后可减少Fu向外水相的逸失,制得的微球可作为每月1次的给药系统。

聚己内酯-b-丙交酯共聚物微球免疫避孕体系的研究

目的:初步探讨含β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)的可生物降解嵌段共聚物聚己内酯-b-丙交酯(PCL-b-DLLA)微球作为免疫避孕释放体系的可行性。方法:采用双乳溶剂挥发法(W1/O/W2),用共聚组成为40/60的PCL-b-DLLA嵌段共聚物制备含β-hCG的可生物降解微球,表征微球的粒径大小及分布、表面形态等性能,建立毛细管电泳测定微球中β-hCG含量的方法,初步考察聚合物微球在小鼠体内的免疫效果。结果:微球表面平整光滑,粒径呈正态均匀分布;平均粒径为6.45m,载药量为1.49%;微球在动物体内一次注射,不经强化即可在相当一段时间内产生相应抗体。结论:聚合物微球对β-hCG具有佐剂效应,该嵌段共聚物有望用作免疫避孕疫苗β-hCG的释放载体。

悬浮聚合法制备聚丙交酯微球

以丙交酯单体为主要成分,在疏水性分散剂硅油中经悬浮聚合制备了聚丙交酯微球。该微球不仅能够缓慢降解,而且由于表面有活性基团一羟基,可以络合药物分子,可作为缓释药物的载体,如与磁性粒子复合,亦可作为靶向缓释药物的载体。

水溶性药物聚丙交酯微球的研究

目的 考察内相乙醇加入量及其他制备因素对聚丙交酯微球性质的影响。方法 以水略溶性药物氟尿嘧啶和水溶性药物地塞米松磷酸钠为模型药物,乳化/溶剂挥发法制备微球。维持其他制备条件不变,改变内相乙醇加入量、理论载药量、聚丙交酯浓度、溶剂挥发时间及聚丙交酯分子质量,考察微球载药量、包封率、粒径和释放的影响。结果 随着内相乙醇加入量的增多,微球形成加快,微球的粒径减小,模型药物的载药量及包封率略有升高,但乙醇加入量太多时载药量及包封率均明显降低。内相聚丙交酯浓度越大,形成的微球粒径越大,载药量及包封率也愈大。理论载药量对微球粒径影响不大,地塞米松磷酸钠的包封率随理论载药量的增加而减小,而氟尿嘧啶为理论载药量为15％时,包封率最大。溶剂挥发时间在0.5～3h,微球的性质无明显变化。分子质量愈小,微球的粒径愈小,载药量及包封率亦随之减小。结论 内相中加入一定量乙醇可以提高药物的包封率,并减少有毒含氯溶剂的用量。

悬浮聚合法制备可降解磁性聚丙交酯微球

为了制备以纳米Fe3O4复合聚丙交酯得到聚合物微球,采用丙交酯和纳米级Fe3O4粉为基体,通过悬浮聚合制备可降解磁性聚丙交酯微球,并对其性能进行分析。实验表明通过悬浮聚合方法,合成了聚合物微球。该微球通过红外光谱、电镜、熔点测定等方法表征,确定该产物为目标产物,其粒径为30～50μm,熔点为67℃,分子量为12825。比磁饱和强度бs为17.70emu.g-1,其降解速率测定得知其在20d仍未全部降解,可以作为靶向缓释药物载体使用。

比较电纺β-磷酸三钙/明胶引导组织再生膜与聚乳酸、聚丙交酯/乙交酯膜的生物相容性

背景:以往有很多学者通过发泡法将β-磷酸三钙与明胶复合得到引导组织再生材料,但将其采用静电纺丝技术制成纤维膜的报道很少。目的:制备新型引导组织再生膜,并比较其与聚乳酸,聚丙交酯/乙交酯膜的细胞毒性。方法:采用静电纺丝法制备β-磷酸三钙/明胶引导组织再生膜,通过扫描电子显微镜对纤维膜表面进行观察。通过MTT实验对电纺β-磷酸三钙/明胶膜与聚乳酸,聚丙交酯/乙交酯膜的细胞毒性进行对比。结果与结论:新型电纺β-磷酸三钙/明胶膜为多孔状,β-磷酸三钙颗粒呈结节状附着在明胶纤维表面,纤维直径平均为400～500nm,分布比较集中,大多在200～500nm之间。与聚乳酸,聚丙交酯/乙交酯膜及阴性对照之间细胞毒性差异无显著性意义(P>0.05)。说明新型电纺β-磷酸三钙/明胶引导组织再生膜细胞毒性较低,基本符合生物材料安全性的要求,有望成为新型的引导组织再生膜材料之一。

可注射聚丙交酯多孔微载体制备及与骨髓基质干细胞共培养研究

目的采用双乳化溶剂挥发技术制备聚丙交酯(PDLLA)多孔微载体。方法通过改变内水相中碳酸氢铵溶液浓度,调节微载体的孔径和孔隙率,并研究了微载体的制备条件对其粒径和形貌的影响。结果SEM观察及粒度分析显示:微载体具有表面开孔、内部相互连通的孔结构,粒径在335μm±65μm范围内,内部孔径20μm左右,孔隙率达80％以上。体外细胞培养显示骨髓基质干细胞在微载体表面及内部能有效黏附并均匀生长。结论相对于实心微球,这种表面和内部具有多孔结构的微载体更有利于细胞的黏附和生长,并可通过注射方式将细胞运载到组织缺损部位以促进组织修复和再生。