聚丙烯酰胺凝胶快速、高效银染方法的建立

聚丙烯酰胺凝胶电泳目前已经广泛应用在SSR标记、SNP标记以及遗传图谱的构建等过程中,但是一直以来凝胶银染方法由于染色时间长、染色步骤繁琐,使得对于开展大批量的实验研究极为不利。文章通过对常规方法的改良,建立了一个银染步骤只需要10min,整个染胶过程只需约20min的快速、高效的银染方法。

微卫星PCR聚丙烯酰胺凝胶银染法影响因素的分析研究

微卫星PCR结合聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种常用的DNA检测方法。此法分离小于500bP的DNA片段效果很好,分辨率极高,只相差1bp的片段也能分开,且可容纳相对大量的DNA。再结合银染法使该方法得到了广大科研工作着的青睐,本研究通过多方面摸索对该方法进行了总结和改良。

一种快速有效检测SSR标记的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法

聚丙烯酰胺凝胶银染法是一种具有高分辨率检测SSR标记的有效方法，然而传统的银染方法存在操作步骤较多、所需时间较长及试剂种类与用量较多等不足．本研究利用菜心和烟草SSR标记为研究对象，建立一种能快速有效检测其PCR扩增产物的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法．该方法包括染色和显影2个主要操作步骤，整个银染流程耗时6～7min，只需要AgNO3、NaOH和甲醛3种试剂，所检测SSR标记的DNA条带清晰、易辨．与其他银染法相比，本研究建立的银染法具有易于操作、耗时少、所需试剂种类和用量少及检测效果好的优势．

聚丙烯酰胺凝胶柱分离制备高纯度纤维低聚糖的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶柱可分离制备纤维低聚糖。在其它分离条件相同、洗脱速度不同的情况下,完成一次分离需要的洗脱剂用量是不变的,洗脱剂用量对低聚糖的分离没有影响。采用一次分离技术可得到纯度分别为96.67%、68.76%和82.00%的纤维五糖、四糖和三糖组分,纤维低聚糖混合物的回收率为81.38%。将多次分离得到的各低聚糖组分在相同的分离条件下进行二次分离,五糖、四糖和三糖的纯度分别提高到98.45%、98.65%和98.12%,回收率分别为90.91%、47.42%和68.68%。

CoFe2O4纳米粉体的聚丙烯酰胺凝胶法合成、表征及磁特性

采用改进的聚丙烯酰胺凝胶法制备了CoFe2O4纳米粉体。利用TG-DSC、FTIR及XRD等多种手段研究了干凝胶的热分解及CoFe2O4的成相过程。实验表明,以EDTA为配位剂,在500℃的烧结温度下可制备出高纯的CoFe2O4纳米粉体。同时发现,通过改变双丙烯酰胺与丙烯酰胺的比例,可以调控粉体的晶粒尺寸;随着双丙烯酰胺比例的增加,晶粒的平均尺寸逐渐减小。通过改变双丙烯酰胺与丙烯酰胺的比例,制备出了平均晶粒尺寸从45到23 nm的系列CoFe2O4纳米粉体。SEM和TEM观察显示,制得的粉体粒度分布均匀,颗粒近似呈球形。采用振动样品磁强计对样品的磁性进行了测试分析。

聚丙烯酰胺凝胶法制备Li_2O-Al_2O_3-SiO_2微晶玻璃超微粉

以丙烯酰胺、N,N’-亚甲基双丙烯酰胺、碳酸锂、硝酸铝和正硅酸乙酯为原料,首次采用聚丙烯酰胺凝胶法成功地制备出多组分氧化物Li2O-Al2O3-SiO2(LAS)微晶玻璃超微粉末。用TG-DTA,IR,XRD,TEM对热处理产物进行了表征。实验表明:热处理温度在800～1 000℃时,LAS凝胶粉以六方晶系的β-石英固溶体结构析出;热处理温度在1 100℃时。β-石英固溶体开始转变成稳定的四方晶系β-锂辉石固溶体,到1 209℃时已经完全转变为β-锂辉石固溶体。900～1 100℃热处理后所获得的LAS粉末晶粒大小为30～50 nm。与传统方法相比,聚丙烯酰胺凝胶法是一种在低温下廉价地快速制备多组分氧化物微晶玻璃超微粉末的理想方法。

表面活性剂和碱对Cr^(3+)聚丙烯酰胺凝胶成胶效果的影响及作用机理

在三元(或二元)复合驱过程中,调剖剂不可避免与表面活性剂和碱接触,因此碱和表面活性剂的性能可能会对调剖剂的性能造成影响。室内采用黏度计、动态光散射仪、扫描电镜和驱油实验装置,研究了碳酸钠、石油磺酸盐和脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚对Cr^(3+)聚合物凝胶调剖剂的黏度、分子聚集体尺寸、分子聚集体形态和调剖效果的影响。结果表明,石油磺酸盐和脂肪醇聚氧乙烯聚氧丙烯醚对Cr^(3+)聚丙烯酰胺凝胶的黏度和分子聚集体尺寸几乎不影响;而Na_2CO_3的加入使Cr^(3+)聚合物凝胶不成胶,且Cr^(3+)聚丙烯酰胺凝胶成胶后加入Na_2CO_3会发生破胶现象,分子聚集体尺寸大幅下降,聚集体形态从大的团块状变成小的团块状,驱油过程中封堵效果明显变差。进一步分析发现,在碱性条件下,Cr^(3+)聚丙烯酰胺凝胶难以发生交联反应,即使发生了交联也会发生解交联。

聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的改进及其在cDNA-AFLP分析中的应用

利用电解质梯度变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统对稻纵卷叶螟取食的水稻叶片进行cDNA-AFLP分析,结果表明产生的cDNA条带比普通变性聚丙烯酰胺凝胶电泳系统大约增加30%,解决了传统的聚丙烯酰胺凝胶电泳在同一块胶板中大片段DNA条带堆积而小片段DNA条带间距过大,且读带数量有限的问题..

河南不同产地与年限桔梗的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

目的鉴定河南省内不同产地与年限的桔梗药材。方法利用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,作蛋白质、过氧化物酶同工酶、酯酶同工酶分析。结果各样品的蛋白质电泳图谱基本一致,同工酶酶谱有共有带,但酶带数量与活性强度却有差异。结论PAGE分析快速、灵敏、技术简单,可用于桔梗药材的鉴定与质量评价。

聚丙烯酰胺凝胶柱分离制备低聚果糖单组分

利用聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel P-2)柱分离高纯度低聚果糖制备单一组分,结果表明,在1.6 cm×100 cm的玻璃柱上最佳的层析条件是洗脱速度0.2 mL/min、上样量0.5 mL(样液质量浓度0.4 g/mL)、柱温40℃。以Megazlaae公司的标准品为对照,经HPLC和MS分析,证明层析分离所得组分峰4、峰3和峰2分别是蔗果三糖、蔗果四糖和蔗果五糖。而且经HPLC面积归一化法定量分析,证明分离产品蔗果三糖、蔗果四糖、蔗果五糖蔗和果六糖的含量分别为99.91%、99.94%、99.33%和97.89%,表明其纯度很高,可以作为低聚果糖定量分析的标准品使用。

聚丙烯酰胺凝胶结构非均匀性的动态光散射研究

利用动态光散射技术研究了聚丙烯酰胺 (PAAm)凝胶结构的非均匀性 ,分析了PAAm凝胶结构非均匀性的形成原因及凝胶动态光散射的数据处理方法和分析结果的物理意义 .研究结果表明 ,PAAm凝胶中含有动态相关长度 (LC)不同的两相 ,其中 ,LC 为 10～ 2 0nm的区域是聚合物稀疏相 ,LC 为 85nm左右的区域是聚合物密集相 ,两相的不均匀分布形成了PAAm凝胶结构的非均匀性 .分析表明 ,PAAm凝胶存在两相主要是由于单体和交联剂的溶解度存在差异所致 .随交联度增大 。

聚丙烯酰胺凝胶法制备氧化锌铝(AZO)粉体

采用聚丙烯酰胺凝胶法制备Al掺杂ZnO(AZO)前驱体,在500和600℃下煅烧获得AZO粉体。采用DSC、XRD、SEM、UV-vis吸收和荧光发光(PL)对粉体进行表征,研究Al掺杂浓度对AZO粉体光学性能的影响。结果表明:在600℃煅烧温度下,Al3+的固溶度可高达8%(摩尔分数),掺杂后的AZO粉体晶粒尺寸明显减小;随着掺杂浓度提高,AZO粉体的紫外吸收波长先"蓝移"而后"红移",当Al掺杂浓度为5.5%(摩尔分数)时,紫外吸收波长最短,为367 nm(3.38 eV);未掺杂与Al掺杂的ZnO粉体均具有406 nm的近边紫外峰和430 nm的蓝光发射峰。

从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA小片段的两种方法比较

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段是分子生物学中的常用技术,尤其针对于DNA小片段的回收。本试验对比了两种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA小片段的方法(煮沸法和水浴法),并用无水乙醇和3mol/L醋酸钠共沉淀纯化DNA小片段。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测回收结果,通过紫外检测进行定量分析,结果显示:水浴法比煮沸法的回收率高。水浴法结合乙醇沉淀法还具有经济和操作简单的优点,可以广泛应用。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳4种染色方法的比较研究

[目的]比较SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)中蛋白质的染色方法,建立美洲大蠊抗肿瘤活性部位SDS-PAGE后更为合适的染色方法。[方法]以牛血清白蛋白(BSA)为标准品,采用考马斯亮蓝染色法、氯化钾染色法、钙染色法和银染色法进行比较,在此基础上,将样品美洲大蠊抗肿瘤活性部位进行SDS-PAGE电泳和染色。[结果]结果表明银染法能够准确、快速、简便的对美洲大蠊抗肿瘤活性部位的SDS-PAGE进行染色。[结论]为美洲大蠊药用价值的研究奠定了基础。

聚丙烯酰胺凝胶中DNA的银染方法

The methods of Ultrasensitive silver staining for DNA in Polyacrylamide gels were described. In contrast to traditional radioisotopic methods, these silver -staining protocols are simple, quick and safety. The developmpnt and application are reviewed in this paper.

聚丙烯酰胺凝胶吸水膨胀驱动行为

目的研究聚丙烯酰胺凝胶在吸水膨胀过程中的驱动行为,为实现智能凝胶的精确控制以及进一步应用奠定基础.方法常温条件下制备聚丙烯酰胺凝胶,通过微机控制的力学试验机测试其不同含水量时的应力-应变曲线,采用预压重物的方法测试聚丙烯酰胺凝胶在束缚状态下的吸水膨胀过程及对其外膨胀做功的能力.结果不同初始尺寸的凝胶在实际吸水膨胀过程中与理论预测出现偏差,不同尺寸试样的膨胀驱动做功能力也有显著差异.结论聚丙烯酰胺凝胶在实际应用中的吸水膨胀驱动行为,可看作是在自身重力和外界压力共同作用下的束缚膨胀做功过程,与试样的初始尺寸(长径比)、外界压力有密切关系.

从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本

介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。

纳米晶锌铁氧体的聚丙烯酰胺凝胶法制备、表征及其电磁性能(英文)

采用聚丙烯酰胺凝胶法合成了尖晶石型锌铁氧体(ZnFe2O4),采用差分扫描-热重同步分析仪(DSC-TG),红外光谱(FT-IR),X射线衍射(XRD),透射电镜(TEM)和波导法对干凝胶和产物进行了表征.红外光谱显示当煅烧温度从500,℃升高到700,℃时,铁-氧(Fe—O)键的特征吸收峰从541,cm-1移动到566,cm-1;XRD表明干凝胶为无定形态,在煅烧温度为500,℃、煅烧时间为2,h时,凝胶形成纯相的尖晶石型纳米晶ZnFe2O4;由透射电镜可知煅烧温度为500,℃、600,℃和700,℃时,粉体的平均粒径分别为15nm、35,nm和60,nm;纳米晶体ZnFe2O4在8.2～12.4,GHz的测试频率范围内具有介电损耗和磁损耗.随着热处理温度的升高,介电常数、介电损耗、磁导率和磁损耗明显增大.

马铃薯SSR标记聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

以马铃薯品种早大白、黄麻子、克新13、荷兰15、大西洋为试验材料,提取基因组DNA,进行SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,比较不同电泳参数(聚丙烯酰胺凝胶的浓度、电泳电压、染色方法)对电泳结果的影响。确定了适合马铃薯SSR标记的电泳检测体系,即聚丙烯酰胺凝胶的浓度为12%,电泳电压为170V,染色方法为溴化乙锭染色。

共沉淀法和聚丙烯酰胺凝胶法制备锆掺杂改性Bi_(2)O_(3)的比较研究

以硝酸铋和硝酸锆为起始原料,分别采用共沉淀法和聚丙烯酰胺凝胶法制备系列锆掺杂改性Bi2O3的混合氧化物Bi2-xZrxO3+x/2(x=0～1.0)。采用XRD,FTIR和SEM对样品的结构及微观形貌进行分析。研究结果表明:于650℃焙烧处理后,由以上2种方法制备的纯Bi2O3的主晶相均为单斜晶型α-Bi2O3,其中采用聚丙烯酰胺凝胶法及乙二醇和水混合溶剂反序滴定共沉淀法可制备出纯度较高的单斜相α-Bi2O3。锆掺杂改性制备的系列混合氧化物中,当ZrO2掺杂量(摩尔分数)为10%(x=0.2)时,反序滴定共沉淀法能实现均匀共沉淀,形成了组成为Bi1.8Zr0.2O3.1的类似立方相δ-Bi2O3的单一结构固溶体,顺序滴定共沉淀法会产生相分离,导致四方相Bi7.38Zr0.62O12.31固溶体的出现。然而,当采用聚丙烯酰胺凝胶法时,没有得到类似立方相δ-Bi2O3结构的固溶体,主相结构为单斜相α-Bi2O3以及混合部分四方相Bi7.38Zr0.62O12.31和立方相ZrO2。由此可见:采用反序滴定共沉淀法,在650℃低温及合适条件下,掺杂适量的ZrO2能稳定立方相结构的高温离子传导相δ-Bi2O3。