用梯度聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳法对雌、雄梭鱼血清蛋白的研究

实验采用梯度和单一浓度聚丙烯酰胺凝胶垂直板型电泳的方法,对梭鱼血清蛋白进行分析,其中梯度浓度(4.75％+7％)凝胶分离梭鱼血清蛋白得30条区带,比单一浓度(4.75％、7％、10％)凝胶分离的效果好,区带清晰,带数明显增加。同时发现0号、2号、5号、8号和12号雌梭鱼血清蛋白电泳图型中发现有一明显深带,此深带在雄鱼的血清蛋白电泳图型中则没有发现。在数次的重复实验中,结果完全一致。作者认为此深带可能与雌性特异血浆蛋白有关。

聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳凝胶的干膜制作法

聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)操作简单,分辨率高,是生物化学技术和医学检验中常用的一种电泳方法。为便于电泳毕标本保存,一般将电泳毕凝胶制成干膜。具体制作方法文献中未见介绍。若制作不当,膜易发生皱缩、干裂。本人在工作中试验出一种凝胶干膜制作法,操作简单易掌握。制成的膜美观、光滑、平整。现介绍如下。

轮状病毒性腹泻的快速诊断——聚丙烯酰胺凝胶电泳检测病毒核酸方法的改进

作者对 Herring 氏等(1982)和江杰元等(1985)报道的聚丙烯酰胺凝胶垂直板连续电泳作轮状病毒感染快速诊断方法加以改进。把聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳改为聚丙烯酰胺凝胶柱圆盘电泳;把电极缓冲液由 Tris--磷酸缓冲液改为Tris—甘氨酸缓冲液,使电泳时间由17小时缩短至70分钟,银染时间由2小时缩短至30分钟;又制备聚丙烯酰胺凝胶柱比制备凝胶垂直板方法简单,且可节约胶料一半。结果,除保持诊断的正确性和检出率外,核酸线条更为清晰,我们用改进的方法和 Herring 氏等报道的方法同时检测了42份仔猪腹泻粪样,12份犊牛腹泻粪样,28份婴儿腹泻粪样和4株猪轮状病毒的细胞培养毒,两者阳、阴性的符合率达100%。

全血LDH同功酶聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳

LDH（乳酸脱氢酶）在糖类的同化和异化过程中都起着重要的作用。近些年,在运动医学方面,关于LDH的研究日渐增多。用电泳法可将正常人LDH分成多条区带（LDH1—LDH5）。其中LDH1起乳酸脱氢酶而LDH5起丙酮酸还原酶作用。通常,医学临床上多采用血清或血浆样品进行同功酶分析。这样,即使采用微量毛细管取血技术,一次满意的分析也需要取血100微升左右。故在运动生化检验中普遍应用有一定局限。为此,我们以全血样品代替血清或血浆样品进行LDH同功酶聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果良好。

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析方法对中国卤虫(Artemia)同工酶变异的研究

本文提出运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法,对我国山东半岛几个盐场中的卤虫的十一种同工酶变异进行分析。其中三种同工酶,乳酸脱氢酶(LDH),苹果酸脱氢酶(MDH),以及四唑氧化酶(TO),表现为多态酶,并且存在盐场内和盐场间的相对变异。该项技术将有助于基础科学的研究以及在水产养殖中用来筛选和辨别卤虫的不同品系。

聚丙烯酰胺凝胶制板少量分离胶预先快凝防漏方法

利用聚丙烯酰胺凝胶制板新旧玻璃板和密封垫,预先快凝少量分离胶堵漏方法(DIY)各30次制胶效果比较,并用DIY制胶进行了Jurkat和A549细胞株蛋白样本电泳、转膜染色和Actin抗体反应实验,发现新玻璃板和密封垫制胶优于部分和全旧的器具(P <0.05),而旧玻璃板和密封垫的DIY制胶与新器具没有区别(P>0.05),且在后期的蛋白质样本分析中发现凝胶及其转膜蛋白染色正常,两种细胞的Actin蛋白表达灰度值显示没有统计学差异(P>0.05)。因此DIY方法延长了玻璃板和密封垫的有效使用期,节约了经费,成为一种简便实用的聚丙烯酰胺凝胶板制备方法。

一种改进的蛋白质超薄凝胶电泳方法

介绍了一种将聚丙烯酰胺凝胶固定在电泳夹板上的蛋白质电泳方法.通过此方法蛋白质电泳可以在04mm厚的聚丙烯酰胺凝胶上进行.实验证明,经此方法处理的玻板结合凝胶非常牢固,在电泳后的所有处理步骤中都不会发生凝胶脱落现象.

简易凝胶电泳法检测新生儿腹泻粪便中轮状病毒RNA的研究

轮状病毒(简称Rs)是婴幼儿腹泻的主要病原。用聚丙烯酰胺凝胶电脉(简称PAGE)法可捡测轮状病毒RNA的11条片段，按其第10、11片段在PAGE上的移动快慢可进行电泳分型，这一检测法对明确病因、及时治疗、开展预防及对流行病学研究有着重要意必。国外学者以“半波”原理研制了简易电泳仪，对病毒RNA进行电泳得到满意结果。为此我们用国产原件装置了简易电泳系统，对35例新生儿腹泻。

玉米蛋白质凝胶电泳中易出现的问题分析

玉米盐溶蛋白电泳法是快速鉴定玉米种子纯度的一种方法。其原理是从玉米种子中提取盐溶蛋白在聚丙烯酰胺凝胶的浓缩效应、分子筛效应和电泳分离的电荷效应作用下．得到良好的分离．通过染色显示蛋白质谱带类型。不同玉米品种，由于遗传组成的不同，种子内所含的蛋白质种类有差异．这种差异可利用电泳图谱加以鉴别．

聚丙烯酰胺凝胶干板制作的改进方法

聚丙烯酰胺凝胶电泳的垂直板型电泳法是近年来用途较广的一种相对含量的测定方法。它的优点是在同一条件下可以电泳多个样品,便于相互比较;另外还可以制成干板便于扫描、携带和保存。本文拟就干板制作方法的改进和体会作一介绍。

电泳法和田间鉴定法检测白菜种子纯度结果统计分析

利用蛋白电泳方法检测种子纯度，如用醇溶蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定小麦和大麦品种、用SDS-聚烯酰胺凝胶电泳鉴定豌豆属和用超薄层电等电聚焦电泳测定杂交玉米种子纯度的标准方法早已列入国际种子检验规程，在全世界推广应用。我国农业部也于2001年颁布了玉米种子纯度盐溶蛋白电泳鉴定方法（NY／T449-2001）。而在蔬菜杂交种纯度检测方面，国内外尚无标准出台。

新课标生物实验室新增仪器与建设介绍——垂直电泳槽

垂直电泳槽是分子生物学的重要工具，用于制备聚丙烯酰胺凝胶，并在电泳槽内完成整个蛋白电泳过程，是蛋白质检测分析不可缺少的工具。浙版选修一实验：乳酸脱氢酶同工酶的分离以及人教版选修一实验：血红蛋白的提取和分离，都需要用到垂直电泳槽。该仪器配有不同规格的梳子，

患骨肿瘤黑熊血清蛋白的电泳分析

为了黑熊疾病的诊断与治疗,采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳方法分离正常黑熊、患骨肿瘤黑熊个体的血清蛋白,结果表明:从正常黑熊个体血清蛋白中共分离出17条谱带,从患骨肿瘤黑熊个体血清蛋白中共分离出19条谱带;正常黑熊个体和患骨肿瘤黑熊个体的血清蛋白在电泳迁移率为0.21、0.23、0.27、0.29、0.35、0.37、0.43、0.44、0.47、0.54、0.56、0.60、0.62、0.64、0.67位置处的谱带分布一致;正常黑熊个体血清蛋白在电泳迁移率为0.38、0.48位置处有谱带分布,患骨肿瘤黑熊个体血清蛋白在这两处缺失,在电泳迁移率为0.22、0.25、0.26、0.33位置处的谱带为患骨肿瘤个体所特有;正常黑熊个体和患骨肿瘤黑熊个体部分相同谱带血清蛋白的活力存在差异。

鹿鞭的电泳鉴别

本文采用聚丙烯酰胺凝胶电泳对马鹿、梅花鹿、澳大利亚鹿、驼鹿、牛的鞭进行了比较鉴别。为鹿鞭的真伪鉴别提供了依据。

Osborne法分级提取五味子蛋白及抗氧化活性比较

目的:采用Osborne法提取五味子各组分蛋白,并对其体外抗氧化活性比较研究。方法:用Osborne方法分级提取五味子中的蛋白质,得到四种组分蛋白:清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白,对其进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶(sodium lauryl sulfate-polyacrylamide gel,SDS-PAGE)电泳分析,并对不同组分蛋白和总蛋白的体外抗氧化活性进行对比研究。结果:分级提取得到的四种蛋白质,清蛋白亚基分子量分布在15~25 kDa和40~55 kDa,球蛋白分子量大致分布在15~25 kDa和35~55 kDa,谷蛋白亚基分子量在15~20 kDa和30~40 kDa。以五味子总蛋白为参照物,体外抗氧化试验结果表明,总蛋白对羟基自由基和DPPH自由基的清除能力强于各分级蛋白;四种分级蛋白对Fe3+的还原能力强于总蛋白;在ABTS自由基清除试验中含量最高的谷蛋白效果最佳,其清除效果在一定的浓度下与Vc接近,同时,其在羟基、DPPH自由基与Fe3+还原能力的试验中抗氧化活性良好,表明五味子组分蛋白中谷蛋白可作为一种良好的抗氧化潜在物质。

化学沉淀法检测低密度脂蛋白颗粒大小

目的：为建立低密度脂蛋白（LDL）颗粒直径检测的简便方法。方法：超速离心和化学沉淀分别离44例健康人血浆LDL，2％－16％聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳法分析LDL颗粒直径。结果：超速离心法、化学沉淀法测定LDL颗粒直径电泳图谱和扫描图形一致；两法测定44例样本结果分别为（26．69±1．03）nm vs.(26.65±1.07)nm，结果间无差别，高度相关（r=0.96,P＜0．01）。结论：化学沉淀法检测LDL颗粒大小是一种简便有效的方法。

两栖类单殖吸虫蛋白质组分分析方法的探索

文中应用聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳(Disc-PAGE)和垂直板电泳对两栖类单殖吸虫成虫可溶性蛋白质组分进行了分析,探索了适合于两栖类单殖吸虫蛋白质电泳的凝胶浓度、电泳条件以及上样量。

日本对虾成体发育阶段的肌肉同工酶研究

利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析了日本对虾 ( Peneausjaponicus)成体发育过程中 ( 3.5～ 1 1 .5cm) 6种同工酶的变化 . LDH均只有一条酶带 ,但 3.5 cm体长的个体酶量较少 . GDH在 3.5 cm体长的个体只有一条酶带 ,而其他阶段的个体均有 2条酶带 .ADH的表型稳定 ,共有 3条酶带 .EST的变化发生在9.5 cm体长的个体 ,突然出现一条新的酶带 . SOD共有 5条负带 ,但 3.5 cm体长的个体其中 SOD-4酶量减少 .MDH显示的酶带数量较多 ,共 7条 ,主要的差异也出现在 3.5 cm体长的阶段 .总之 ,体长从 3.5 cm到6 .5