DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳三种银染方法比较

目的 探讨DNA聚丙烯酰胺凝胶电泳 (PAGE)三种银染方法的特点及其适用性。方法 采用非变性PAGE垂直板对不同稀释度的 pBR 32 2MspⅠ分子量标准进行电泳分离 ,利用二种硝酸银染色法和一种银氨染色法染色 ,分析其灵敏度和噪声。结果 分子量Marker的所有条带都能染出灵敏度均为 2 5ng。在至少一个条带能染出的灵敏度方面 ,银氨染色法 ( 6 .2 5ng)低于其他两种方法。结论 时间方面Carlos等所建立的银染方法最快 ,仅需 2 0min。银氨法的噪声最低 ,结果易于保存。

检测SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇蛋白的新方法——海波银染法

介绍一种检测SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳中家蝇幼虫蛋白的新方法———海波银染法。该方法对传统银染方法中的试剂与步骤加以改进 ,省略了乙醇固定与洗涤步骤 ,只需 2 0min即可完成全部染色过程 ,且仅在国产分析纯试剂及普通操作条件下 。

SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染色新方法的研究

通过几种金属盐溶液对 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳染色的实验表明 ,0 .2 5 mol/L的Ca Cl2 和 Mg Cl2 溶液能够对蛋白质进行有效的染色 ,经这 2种溶液染色的蛋白质都能够从凝胶中洗脱回收。尤其是 Ca Cl2 法灵敏度更高 ,而且蛋白质条带形成之后也十分稳定。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法

目的建立一种操作简便、快速、灵敏度高、无毒的蛋白质电泳染色方法。方法利用考马斯亮蓝G-250(CBB G-250)在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后对蛋白质条带进行染色,对不同染色条件进行探讨,并与考马斯亮蓝R-250(CBB R-250)染色法进行比较。结果 CBB G-250染色法试剂无毒,背景浅,经改良其灵敏度与CBB R-250染色法相当,达到0.1～0.5μg。结论 CBB G-250染色方法简单经济,灵敏度能够满足一般要求,适用于蛋白质电泳结果的快速分析。

两种染色方法对聚丙烯酰胺凝胶电泳回收蛋白的影响

以牛血清白蛋白(BSA)为材料进行十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE),分别采用考马斯亮蓝(CBB)G-250染色和咪唑-Zn反染,用电洗脱仪回收。它们的灵敏度分别为500ng和5ng;蛋白质回收率分别为37.9％和74.4％。

聚丙烯酰胺凝胶电泳前活性染料与蛋白质共价染色的条件探索

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳前染色法,考察了多种类型活性染料与牛血清白蛋白共价染色的条件。实验发现,活性蓝KN-R型标记效果最佳,其优化标记条件为:pH10.0,60℃,50min,蛋白检出限达200ng,重复性和测试范围内的定量性较好,可在电泳时直接实时观测,作为蛋白标示剂有一定的应用前景。

聚丙烯酰胺凝胶电泳中超微量蛋白的考马斯亮兰——银染色检测法

本文介绍一种聚丙烯酰胺凝胶电泳中超微量蛋白质检测的银染色新方法,它使蛋白质的最小检出量达到1ng。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳染色方法的改进

针对常规的SDS-PAGE染色脱色耗时长,还需使用甲醇的缺点,对传统的SDS-PAGE染色脱色进行了改进,用无毒的乙醇替代有毒的甲醇.改进后的SDS-PAGE染色脱色具有耗时短,且不需要使用甲醇的优点.

脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法的建立与应用

目的 :建立脲酶聚丙烯酰胺凝胶电泳活性区带染色方法用于测定脲酶分子量和纯度鉴定。方法 :建立十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳 (SDS -PACE)梯度凝胶体系和电泳条件等 ,根据不同来源脲酶活性染色区带位置 ,鉴定出PAGE蛋白区带中脲酶区带位置 ,进一步测出脲酶的相对分子量。结果 :用新建立的SDS -PAGE脲酶活性区带染色方法 ,应用于不同来源的脲酶相对分子量测定和纯度鉴定 ,结果准确 ,重复性好 ,与凝胶过滤法测定分子量的结果相关性好。结论 :我们建立的SDS -PACE脲酶活性区带染色方法 ,应用效果良好 ,有推广价值。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳快速染脱色方法的比较研究

本文对几种SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)快速染脱色方法进行了比较研究,从蛋白质回收,染色时间及其灵敏度的角度对它们的优缺点进行了比较,并且阐述了它们各自的染色机理。与常规考马斯亮蓝染色法相比,这几种方法染脱色的清晰度稍差,但是灵敏度相当,在实践上均是可行的。尤其是CaCl2、KCl法的灵敏度更高,染色时间短,

改良聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA

本文介绍了应用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的改进方法。与以往方法相比,本方法从配制凝胶储备液,无需封口的水平灌胶,适当地提高电泳的电压梯度,采用改良银染法检测,省却凝胶固定,银染法DNA的纯化方法,及溴化乙锭染色法的操作等一系列改进措施,使聚丙烯酰胺凝胶电泳检测DNA的操作得到简化,更便捷,并减小了对人与环境的毒害作用。

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术研究进展

双向聚丙烯酰胺凝胶电泳按等电点和分子量对蛋白质进行分离，具有很高的分辨率，已经成为蛋白质组研究中的核心技术之一。本文对双向聚丙烯酰胺凝胶电泳技术的原理、检测步骤进行介绍，并对其存在问题与发展进行简要介绍。

聚丙烯酰胺凝胶电泳检测水稻SSR标记

以水稻为试验材料,提取水稻基因组DNA,选择多态性SSR标记,并将标记产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,最后硝酸银染色,试图建立了一种行之有效、简便、快捷的应用于水稻SSR标记的PAGE银染检测方法。

SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法改进

[目的]改良SSR标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术,提高大规模SSR分子标记分析的工作效率。[方法]在利用SSR标记构建中国春/兰考大粒F2群体遗传图谱的基础上,对变性PAGE点样方法进行改进,并对中国春/兰考大粒筛选的122对差异引物进行组合分析。[结果]试验表明,引物扩增条带特异性强、覆盖范围不大即可采用两次点样法分析;两次点样和单次点样的凝胶扩增条带均清晰可辨;分析相同数量的样品,两次点样法较单次点样法节约了41%的试验时间,节约了50%的试剂用量。[结论]两次点样法简化了试验步骤,节约了试验成本,加速了试验进程,更适用于遗传作图。

聚丙烯酰胺凝胶中超微量蛋白的尿素——银染色检测法

本文介强一种聚丙烯酰胺凝胶电泳中蛋白质检测的高灵敏度的方法，它使蛋白质的最小检出量达到0．01ng。

蛋白质凝胶电泳的高灵敏度染色法——复合银染

本实验以牛血清白蛋白为样品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，然后用考马斯亮兰Ｒ－２５０和银染法分步染色。这种复合银染法的灵敏度比单独使用银染法提高约１０００倍，比单独使用考马斯亮兰Ｒ－２５０染色法提高约１０６倍。它在１ｍｍ厚的聚丙烯酰胺凝胶上至少可检测出５ｐｇ／ｍｍ２的蛋白质。在没有放射性防护设施的任何一个生物实验室中，采用复合银染法基本上能够达到或接近放射性标记检测的灵敏度。相比之下，它不仅省去了繁琐的各式各样的标记过程及其放射性污染，同时还具有很高的灵敏度，因此复合银染具有广泛的应用性。

蛋白质凝胶电泳银染色法的改进

目的探索一种快速、灵敏的蛋白质凝胶电泳银染色方法。方法对蛋白质凝胶电泳银染色过程中的多种因素进行了实验探索,在此基础上探索出一种改良的蛋白质聚丙烯酰胺凝胶电泳银染色法。结果改进方法灵敏度为CoomassieBrilliantBlueR-250法的100倍以上,对牛血清白蛋白的检测限在0.5ng以下,整个染色过程不超过60min,染色重复性好。结论改进后的方法比以前使用的方法简便、快速、灵敏、成本相对低廉。