一种快速有效检测SSR标记的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法

聚丙烯酰胺凝胶银染法是一种具有高分辨率检测SSR标记的有效方法，然而传统的银染方法存在操作步骤较多、所需时间较长及试剂种类与用量较多等不足．本研究利用菜心和烟草SSR标记为研究对象，建立一种能快速有效检测其PCR扩增产物的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法．该方法包括染色和显影2个主要操作步骤，整个银染流程耗时6～7min，只需要AgNO3、NaOH和甲醛3种试剂，所检测SSR标记的DNA条带清晰、易辨．与其他银染法相比，本研究建立的银染法具有易于操作、耗时少、所需试剂种类和用量少及检测效果好的优势．

从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA小片段的两种方法比较

从聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA片段是分子生物学中的常用技术,尤其针对于DNA小片段的回收。本试验对比了两种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收DNA小片段的方法(煮沸法和水浴法),并用无水乙醇和3mol/L醋酸钠共沉淀纯化DNA小片段。采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测回收结果,通过紫外检测进行定量分析,结果显示:水浴法比煮沸法的回收率高。水浴法结合乙醇沉淀法还具有经济和操作简单的优点,可以广泛应用。

聚丙烯酰胺凝胶结构非均匀性的动态光散射研究

利用动态光散射技术研究了聚丙烯酰胺 (PAAm)凝胶结构的非均匀性 ,分析了PAAm凝胶结构非均匀性的形成原因及凝胶动态光散射的数据处理方法和分析结果的物理意义 .研究结果表明 ,PAAm凝胶中含有动态相关长度 (LC)不同的两相 ,其中 ,LC 为 10～ 2 0nm的区域是聚合物稀疏相 ,LC 为 85nm左右的区域是聚合物密集相 ,两相的不均匀分布形成了PAAm凝胶结构的非均匀性 .分析表明 ,PAAm凝胶存在两相主要是由于单体和交联剂的溶解度存在差异所致 .随交联度增大 。

从非变性聚丙烯酰胺凝胶回收纯化DNA样本

介绍一种从非变性聚丙烯酰胺凝胶中回收和纯化目标DNA片段的方法,经比较回收纯化前后PCR产物的电泳结果,表明该方法具有简单快捷和效率高的优点。

碱性强弱染色非变性聚丙烯酰胺凝胶对微卫星DNA检测效果的影响

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳常用于分离不同分子质量和空间构象的DNA或RNA等生物大分子,由于分辨率可以达到2个碱基对,因此非变性聚丙烯酰胺凝胶对于微卫星DNA有很好的检测效果。利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳对黄牛微卫星DNA的检测表明:碱性强弱的控制对于染色的效果和效率有显著的影响。弱碱性环境下,具有背景浅、条带明显和检测灵敏度高的优势,但是染色过程较复杂繁琐,适合于少量样品的精细检测;在强碱性环境下,对于微卫星DNA的灵敏度相对弱碱性环境下降低,但是染色过程简便、快捷且成本相对较低,适合于大规模样品的检测。

非离子型瓜尔胶/淀粉接枝聚丙烯酰胺二元体系在新闻纸应用效果的研究

研究了非离子型瓜尔胶(NGG)与淀粉接枝聚丙烯酰胺(St-PAM)二元体系,对新闻纸浆料及成纸性能的影响。通过与空白样及只添加非离子瓜尔胶的纸样进行对比,分析得出非离子型瓜尔胶与淀粉接枝共聚物二元体系可以明显提高纸浆的滤水性能,提高浆料的Zeta电位;并可以提高纸张的抗张指数、碳酸钙的留着率和紧度,但会降低撕裂指数。NGG/St-PAM二元体系是一种可获得更优性能的助剂添加方式。

从非变性聚丙烯酰胺凝胶中快速高效回收DNA片段

获得特异性的DNA是开展多种分子生物学试验的前提,具有高分辨率的聚丙烯酰胺凝胶电泳是纯化特异性DNA的首选。借助液氮对凝胶的固化作用,介绍了通过研磨破坏聚丙烯酰胺凝胶结构回收纯化DNA的方法。将通过该方法回收纯化的DNA和采用琼脂糖凝胶电泳回收纯化的DNA,经由聚丙烯酰胺凝胶电泳的进一步检测,结果显示,该方法与琼脂糖凝胶电泳回收法相比,所获得DNA的纯度高,特异性好,且效率相当。在提高DNA特异性的同时也兼具了经济高效耗时少等优点,可以广泛应用。

基于离子液体协同法的双交联结构细菌纤维素/聚丙烯酰胺凝胶聚合物电解质构建

为实现凝胶电解质性能间的平衡,以氧化细菌纤维素为基体,分别采用3种阴离子类咪唑型离子液体与其实现离子交联,同时将丙烯酰胺在交联体中进行原位自由基聚合,制备细菌纤维素/聚丙烯酰胺双交联结构的凝胶聚合物电解质。其中阴离子类咪唑型离子液体分别是1-乙基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐(EMIMBF_(4))、1-乙基-3-甲基咪唑六氟磷酸盐(EMIMPF_(6))和1-乙基-3-甲基咪唑双三氟甲磺酰亚胺盐(EMIMTFSI),在构筑双交联结构凝胶聚合物电解质中起到了关键的协同作用。结果表明:在以EMIMBF_(4)为协同剂时,制备的凝胶聚合物电解质具有最优的力学性能和离子电导率;断裂伸长率为38.36%,拉伸强度为175.25 kPa,离子电导率达到20.16 mS/cm。

一种高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法的建立——以水稻为例

非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染技术已广泛用于DNA片段检测。介绍一种本实验室改进的高效省本的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染方法,该法将固定和染色两步骤合并,整个银染过程只需16 min即可完成。同时,该法无需使用无水乙醇和冰乙酸,减少了硝酸银、氢氧化钠及甲醛的使用量。

聚丙烯酰胺凝胶过程的影响因素

探讨了在高浓度氧化剂溶液中使用三价铬离子作交联剂制备聚丙烯酰胺凝胶的影响因素。研究了聚丙烯酰胺的用量、交联剂的配制、交联温度的影响、成胶粘度的变化等相关因素。

复合聚丙烯酰胺凝胶体系的研究

通过大量实验室静态试验 ,研究了以聚丙烯酰胺 乳酸铬为主体的复合凝胶体系 ,考察了阴、阳离子聚丙烯酰胺浓度、两性聚丙烯酰胺浓度、交联剂浓度、体系PH值、温度各项实验条件下体系的成胶情况 。

水溶性酚醛交联聚丙烯酰胺凝胶体系耐盐老化性研究

采用动态光散射、原子吸收光谱等方法对水溶性酚醛交联部分水解聚丙烯酰胺（Resol—HPAM）凝胶体系的耐盐老化性进行了研究，测定了Ca^2＋，Mg^2＋，Na^＋环境中凝胶的黏度、离子络合浓度及流体力学半径的变化情况。结果表明，与HPAM凝胶相比，Resol—HPAM凝胶的高温耐盐性有所提高；盐离子对凝胶体系稳定性的影响由强至弱依次为Ca^2＋，Mg^2＋，Na^＋；老化时间为5～20d时，Resol—HPAM凝胶与Mg^2＋的络合程度在14％～26％内变化，与Ca^2＋的络合程度则在22％-40％内变化；丙烯酰胺-丙烯酸（AM—AA）低相对分子质量齐聚物可使Resol—HPAM凝胶的离子络合程度降低至约10％。

复合聚丙烯酰胺凝胶性能的研究

通过大量的实验室静态实验 ,研究了阴离子聚丙烯酰胺与阳离子聚合物在抗沉淀剂存在条件下的复合凝胶体系。考察了聚合物浓度、交联剂浓度和体系pH值对凝胶性能的影响。该凝胶体系的成胶时间在不同的条件下从几小时至几十小时的范围内变化。

非离子型凝胶球在水中的溶胀行为

以过硫酸铵和N,N,N’,N’,-四甲基乙二胺氧化-还原体系引发丙烯酰胺聚合,制备球状非离子型水凝胶。利用带刻度的显微镜记录了凝胶球在水中的溶胀扩散过程,采用Tanaka-Fillmore凝胶溶胀动力学模型进行数学处理,得到凝胶网络扩散系数。在此基础上,进一步考察了交联剂、引发剂、单体浓度对凝胶网络扩散系数的影响,结果表明:随着交联剂用量的提高,扩散系数先变小后增大;增加引发剂﹑单体浓度,扩散系数均增大。对凝胶网络扩散系数-温度理论模型进行修正,更加符合实验结果,可用于凝胶网络扩散系数的预测。

聚丙烯酰胺与高价金属离子交联机理研究

对聚丙烯酰胺（ＰＡＭ）与高价金属离子（Ｃｒ（Ⅲ）或Ｚｒ（Ⅳ））的交联机理进行了实验研究。结果表明，ＰＡＭ水解度对成冻有着重要的影响：非水解ＰＡＭ不能与Ｃｒ（Ⅲ）或Ｚｒ（Ⅳ）形成冻胶；水解度太大的ＰＡＭ则容易产生沉淀；ＰＡＭ与Ｃｒ（Ⅲ）（即Ｃｒ（ＮＯ３）３）或Ｚｒ（Ⅳ）（即ＺｒＯＣｌ２）的交联特征几乎一样，只是它们成冻时对ＰＡＭ水解度大小的要求不同而已；

阳离子聚丙烯酰胺PG-1稠化的土酸有机酸混合酸化液的性能

以煤油为外相进行反相乳液聚合，合成了AM／DMDAAC共聚物，将反应后的反相乳液干燥、洗涤，得到了粉末状酸液稠化剂PG-1，并用于稠化土酸有机酸混合酸。该酸液组成如下：7％～10％盐酸＋2％氢氟酸＋5％-8％乙酸。与国内常用酸液增稠剂CT1—6相比，在该混合酸液中PG-1的增稠性较好，耐温性略好，抗剪切性基本相同，缓速性略好，热稳定性和耐盐性良好。1.5％PG-1稠化混合酸的黏度（30℃，170s^-1）为34。6mPa·s；在90℃加热2h后和在30℃、1701／s剪切2惦，黏度均大于25mPa·s；在60℃、90℃加热4h后，黏度保留度分别为88．7％、81．2％；在60℃、90℃与孤南24块砂岩岩屑反应的有效时间超过12h。用矿化度40g／L的标准盐水配制的PG-1稠化混合酸在90℃放置4h或在常温放置15d，外观无显见的异常。图4表2参6。

海水基聚丙烯酰胺高温冻胶体系的研制与性能评价

南海A油田注气开发中,油井气油比急剧增大,气窜明显,为此开展了海水基高温冻胶封窜体系研究。选用非离子聚丙烯酰胺(NPAM)和酚醛体系作为主剂和交联剂,探索增大聚合物浓度、加入除氧剂和高温稳定剂3种方式增强冻胶高温稳定性效果;形成了海水基高温冻胶体系配方,并考察了其对天然气的耐受性和封堵能力。结果表明:尽管采用高浓度聚合物能够增强冻胶热稳定性,但在125℃下,即使采用高浓度(0.8%)NPAM,冻胶老化48 h后脱水率在90%以上;除氧剂的加入也难以显著改善冻胶热稳定性;高温稳定剂可明显增强冻胶的耐温性,是构筑海水基高温冻胶体系的关键组分。优化形成的海水基高温冻胶体系配方为:0.4%NPAM+0.3%乌洛托品+0.3%间苯二酚+0.8%稳定剂。该体系在125℃下的成胶时间为10~12 h,60 d内仍能维持较好冻胶状态,不破胶;弹性模量大于1500 mPa,脱水率小于10%。冻胶能在高温高压环境下与天然气稳定共存,不破胶;冻胶能对岩心形成良好封堵,稳定残余阻力系数210,封堵率99.5%,且耐冲刷性较强。

凝胶结构非均匀性的静态光散射研究

提出了一种利用同一角度静态光散射测量来研究透明聚合物凝胶结构非均匀性的新方法 ,并以聚丙烯酰胺凝胶为例 ,研究了聚合物凝胶结构的非均匀性及交联度对凝胶结构的影响。研究结果表明 ,聚合物凝胶具有明显的非均匀性 ,且随交联度的增大 ,其结构的非均匀性聚随之增强。

阳离子对HPAM/Cr(3＋)弱凝胶性能的影响

为揭示相同价态阳离子对弱凝胶成胶性能的影响规律,研究了Mg^(2+)、Ca^(2+)、Na^+、K^+四种常见阳离子对部分水解聚丙烯酰胺(HPAM)/Cr^(3+)弱凝胶成胶黏度和稳定性的影响。结果表明,阳离子浓度过低或过高均会抑制HPAM/Cr^(3+)体系的成胶;HPAM质量浓度为3 g/L时,利于HPAM成胶的单一阳离子浓度适宜范围分别为Mg^(2+)0.4数9 g/L、Ca^(2+)1.2数18 g/L、Na^+9数30 g/L、K+16数55 g/L;阳离子半径越小、对凝胶成胶黏度和稳定性的影响越大;四种阳离子对弱凝胶成胶黏度的影响顺序为Mg^(2+)>Ca^(2+)>Na+>K+,对弱凝胶稳定性的影响顺序为Mg^(2+)>Ca^(2+)、Na^+>K^+。

Cr(Ⅲ)离子形态及其对凝胶反应的影响

本文对Cr(Ⅲ )离子在水溶液中的存在形态及其对部分水解聚丙烯酰胺 (HPAM ) /Cr(Ⅲ )凝胶反应的影响进行了简要概述 .在水溶液中Cr(Ⅲ )单体之间会发生低聚化反应 ,成胶速率随低聚物形体的增大而增加 。