应用超薄层平板聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分析伊氏锥虫可溶性抗原的初步研究

将广西骡株伊氏锥虫通过生物增殖，ＤＥＡＥ纯化，反复冻融，１００００ｒ／ｍｉｎ离心３０分钟，得到伊氏锥虫可溶性抗原（ＳＡｇ），在１０℃，１５００Ｖ，３ＯｍＡ，２５Ｗ的条件下进行起薄层聚丙烯酰胺凝胶电泳分离，考马斯亮蓝Ｒ２５０染色，结果出现１８条蛋白带。各自的等电点为４．６２、４．８２、４．９６、５．０３、５．１０、５．１３、５．２２、５．３２、５．４４、５．５１、５．６５、５．７２、５．９６、６．０２、６．０９、６．３０、６．５６、７．３。各条蛋白带的绝对含量为０．０２、０．０４、０．０２、０．０４、０．７１、０．０２、０．８０、０．４２、６．００、１０．５４、９．９７、７．９２、１１．８４、１５．１８、９．７８、３．４３、３．０６、３．１８μｇ。等电点在５．４４～６．０９之间的蛋白分子是伊氏锥虫可溶性抗原的主体。

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法——超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦的产品 (如BIO- RAD公司的 model1 1 1 Mini IEF Cell)相比 ,具有以下优点 :实验操作灵活 ,用途更广 ;谱带清晰 ;每次可实验的样本量大 ;电泳所需时间短 ;实验费用低 ;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析 ;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存 ;样本用量少。

聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定烟草品种

在本实验条件下 ,得到的 8个烟草品种种子的可溶性蛋白质的 SOD-聚丙烯酚胺凝胺电泳 ( SDS- PAGE)和聚丙烯酚胺等电聚焦电泳 ( IEF- PAGE)图谱 ,分辩率高 ,重复性强 ,其多态性条带分别占 6 1.5 %和 5 2 .6 % ,各品种的电泳图谱可以相互区别 ,表明种子的可溶性蛋白的 SDS- PAGE和 IFF-

全唾液中蛋白质含量检测及其等电聚焦、聚丙烯酰胺凝胶电泳分析

目的 :探讨唾液成分的变化 ,观察其与疾病发生、发展的关系。方法 :收集无口腔疾患的健康人 10 3例、牙周炎患者 2 6例、口腔颌面部恶性肿瘤患者 41例全唾液标本 ,采用Lowry法、等电聚焦 (IEF)和聚丙烯酰胺凝胶 (SDS PAGE)电泳方法进行分析。结果 :①正常人组、牙周炎和肿瘤组全唾液中蛋白质含量 (mg/ml)分别为 1.0 9± 0 .2 4、1.11± 0 .0 9和 1.0 5± 0 .0 5(P >0 .0 5) ,牙周炎组及肿瘤组与正常人组相差不显著。②肿瘤组蛋白质等电点区带较正常人组数量略有增加 ,但其区带的分布与正常人组未见明显差异 ;正常人组和牙周炎组蛋白质的等电点区带总数分别为 3 0条和 3 9条 ,其等电点区带与正常人在数量和区带分布上均不相同。当pH偏酸或偏碱的情况下 ,其数量均相应发生变化 ,其中 pH偏碱时表现更为显著 ,少量增加表现在 pH偏酸区域。③正常人与肿瘤全唾液的SDS PAGE样本区带数量分别为 6.4和6.2 4,其区别主要在于 50 0 0 0～ 52 0 0 0、770 0 0、3 80 0 0等不同相对分子质量区域以及 3 0 0 0 0以下相对分子质量附近区域可见新的区带分布。结论 :牙周炎状态以及肿瘤发生时 ,唾液蛋白质总含量虽变化不显著 ,但SDS PAGE、IEF图谱蛋白质区带的等电点及相对分子质量的分布区域发生改变 ,表明唾液分泌蛋白质?

用等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳测定恶性疟原虫磷酸葡糖异构酶的变异体

以前测定恶性疟原虫磷酸葡糖异构酶变异体常用淀粉凝胶电泳,乙酸纤维素电泳。本文用敏感的等电聚焦和聚丙烯酰胺凝胶电泳对来自世界不同地区的恶性疟原虫磷酸葡糖异构酶变异体作了检测。

三种聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳在蛋白质提纯中的应用

目的探讨3种聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳在蛋白质提纯中的应用。方法用普通聚丙烯酰胺凝胶提纯电泳(PAGE)、等电聚焦提纯电泳(IEF)和等速提纯电泳(ITP)对样品进行分离。结果3种提纯电泳均可分离蛋白质。PAGE的区带分辨率低,加样量不高;IEF的区带分辨率最高,可分离同种蛋白的亚成分,加样量最小;ITP区带分辨率较高,可将样品分成单一成分,加样量最大。结论低离子强度提纯电泳是可行的,分离效果令人满意。

用聚丙烯酰胺薄层平板等电聚焦测定明胶等电点分布的研究

通过对聚丙烯酰胺薄层平板等电聚焦电泳的系统研究,建立了一套适合于分析明胶等电点分布的薄层平板等电聚焦电泳技术。实验结果表明,明胶等电聚焦要求相当低的凝胶浓度、较高的电功率和较长的电泳时间,这是由于明胶中含有较大的分子量级分及其松散的构象所致。在建立方法的基础上,测试了大量的照相明胶等电点分布,发现明胶分子等电点分布是由一系列不连续级分所组成,其中含量最大的主级分则对明胶的等电点及分布起主导作用。

应用窄范围两性电解质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦法检验人血痕中的Gc亚型

采用窄范围两性电解质聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦加免疫吸印技术,对人血痕中 Gc 亚型进行分型,并调查了北京地区284名无关汉族群体的 Gc 亚型的分布及基因频率。结果显示:Gc^(IF)0.4287,Gc^(IS)0.2500.Gc^20.3222.观察值与期望值吻合度良好(ΣX^2=0.7530,P>0.80).Gc 的个人识别率为0.6507.且室温下保存7周的血痕可以准确判型。将调查结果与中国其它地区及国外不同人种 Gc 亚型的表型的分布与基因频率进行了比较,发现地理及人种间差异明显。

一种改良的薄层等电聚焦电泳新方法

目的介绍一种高效新颖的IFE方法。方法采用簿层等电聚焦电泳。结果该方法简便实用,并可节省昂贵试剂的用量。结论此方法可用于药物蛋白质成分的研究。

等电聚焦电泳测定糖化血红蛋白

建立超薄层平板聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳（ＰＡＧＩＥＦ）的方法测定糖化血红蛋白（ＨｂＡ１ｃ）。取正常人及糖尿病人血９７例，制成血红蛋白溶液，使用瑞典ＬＫＢ公司等电聚焦电泳及激光扫描设备，用０．５ｍｍ聚丙烯酰胺平板凝胶及两性载体电解质进行电泳分离，凝胶经固定、染色、脱色后，激光扫描定量。糖化血红蛋白对照组平均值ｘ±ｓ＝５．０４％±１．４３％，糖尿病人１１．１７％±２．２５％，Ｐ＜０．０１，血糖值与糖化血红蛋白值有显著相关性，ｒ＝０．９３６，回归方程Ｙ＝０．７６２＋０．９００Ｘ。该法与其他方法相比，标本用量少，分辨率高，重复性好。

小麦叶片蛋白质双向电泳的改良方法

以普通小麦叶片为实验材料 ,在原有双向电泳基础上通过对样品制备、样品溶解、等电聚焦电泳、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳以及染色方法等关键步骤进行改进和优化 ,在小麦叶片可溶性蛋白的分析中获得了满意的双向电泳图谱。

三种分析水稻F_1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较

利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(UTLIEF)研究水稻F1种子萌发过程中的酯酶同工酶多态性变化的结果表明,UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native-PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更清晰,酶带数目和强弱的多态性变化更高,用pH2～9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好。

某些灵长类毛发角蛋白的等电聚焦分析

本文用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(PAGIEF)对分属灵长类的5个科的15种动物毛发角蛋白进行了分析,并用激光光密度计对PAGIEF板进行了扫描。结果表明,各种灵长类毛发角蛋白的PAGIEF谱型均有差异。因此,本方法可以用于灵长类动物之间毛发角蛋白组分的鉴别。

非平衡超薄层等电聚焦同步检测EsD,EAP,ADA同功酶

在超薄层聚丙烯酰胺凝胶溶液中加入生化缓冲剂N-2-羟乙基哌嗪-N’-2-乙磺酸(HEPES)进行等电聚焦,对血样中的酯酶D(Esterase D,EsD),酸性磷酸酶(Acid Phosphatase,EAP)和腺苷脱氨酶(Adenosine Deaminase,ADA)等同功酶同步进行了分型。与普通电泳和常规等电聚焦相比,该法快速,可靠,分辨率高,适合对多个同功酶系统同时进行测定。

单克隆抗体的超薄琼脂糖等电聚焦

单克隆抗体(McAb)lgG和IgM都具有各自不同的等电点(PI)所以测定它们的PI是鉴定和研究McAb性质不可缺少的项目之一。进行等电聚焦(IEF)最常用的抗对流介质虽是聚丙烯酰胺胶,但因该胶的适合分子量超过400KD以上的样品,而McAblgM的分子量约为800KD。

有关植物双向电泳体系建立中几个问题的探讨

双向电泳技术是目前最常用的能够从植物组织中分离出上千种蛋白的技术．因此，需对蛋白样品制备过程、等电聚焦、第二相电泳、染色等进行分析探讨，结果表明，样品制备需根据样品的成分选择不同的裂解液成分（如：CHAPS，TritonX-100和DTT等）；胶条越长要求上样量越大（考染上样量约为银染上样的5倍），等电聚焦电压越大，聚焦过程也越长；SDS-PAGE胶体积分数为10％～15％，常用12％；第二相电泳需选择恒定电流，且先以10mA／胶，跑0．5～1．0h，再以大电流30mA／胶至第二相电泳完成．

不同日龄大鼠肝脏中非组蛋白染色体蛋白(NHCP)两相电泳图谱比较

本文报导了不同日龄大鼠肝脏中非组蛋白染色体蛋白(UP)和(NP),在高分辨率的等电聚焦—SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳图谱上蛋白斑点出现规律性变化。并讨论了这一变化与大鼠不同发育阶段的激素水平和基因调节的关系。