聚乙二醇嵌段树枝状聚赖氨酸共聚物的合成及其基因载体研究

采用液相多肽合成法制备得到窄分子量分布、结构可控的生物相容性聚乙二醇嵌段共聚树枝状聚赖氨酸阳离子功能大分子(PEG-b-Dendritic PLL).运用1HNMR核磁共振、凝胶电泳以及荧光淬灭滴定手段对所得阳离子两嵌段大分子的化学结构及其与质粒DNA(pDNA)结合作用与复合行为进行了研究.结果表明聚乙二醇嵌段树枝状聚赖氨酸与pDNA分子可以在缓冲溶液中形成稳定的胶束,pDNA与阳离子树枝赖氨酸嵌段通过静电相互作用形成胶束核,其水溶性聚乙二醇嵌段形成水溶性胶束壳,提高了阳离子大分子/pDNA复合胶束的稳定性.同时发现随着阳离子嵌段树枝状赖氨酸代数的增加,阳离子两嵌段大分子与pDNA的结合作用增强,有利于其作为基因转染生物功能载体的应用.

树枝状聚酯—聚L-赖氨酸(Z)两嵌段共聚物的合成

由2,2-二羟甲基丙酸与2,2-二甲氧基丙烷经过逐级醇酸缩合、催化加氢和端氨基化后得到端基为氨基的树枝状聚酯分子G3-C3H9N2,以此为引发剂引发ω苄氧羰基L-赖氨酸-N-羧酸酐(ω-Z-L-lysine-NCA)开环聚合得到树枝状聚酯-聚L-赖氨酸(Z)两嵌段共聚物。采用1H-NMR、IR、GPC方法对产物进行表征。结果表明:G3-C3H9N2能有效引发NCA开环聚合,共聚物的分子量可以通过调节单体引发剂比例来控制,所得产物具有较窄的分子量分布系数。

聚乙二醇单甲醚-聚L-赖氨酸嵌段共聚物的合成及其表征

以L-赖氨酸为原料,先制备Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸,光气法合成Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸-N-羧酸酐[Lys-(Z)-NCA]。以聚乙二醇单甲醚(MPEG)为原料,制备了端氨基聚乙二醇单甲醚(MPEG-NH2),并以此为大分子引发剂,在氯仿中引发Lys-(Z)-NCA开环聚合,经无水溴化氢脱苄,合成不同组成和分子量的聚乙二醇单甲醚-聚L-赖氨酸嵌段共聚物。用IR1、H-NMR、GPC、DSC等对共聚物结构进行了表征。结果表明:MPEG-NH2引发Lys-(Z)-NCA开环聚合得到的是嵌段共聚物,通过1H-NMR谱计算得到了共聚物MPEG-PLL-1、MPEG-PLL-2、MPEG-PLL-3、MPEG-PLL-4中PLL链段的摩尔分数分别为0.553、0.795、0.848、0.861,共聚物数均分子量(Mn)分别为2.3×104、6.1×104、8.6×104、9.5×104。

用固体高分辨NMR研究聚(L-丙氨酸)-聚乙二醇单甲醚双嵌段共聚物的微相结构与链段运动

利用固体高分辨 1 3 C CP/MAS及二维 WISE核磁共振技术研究了聚 (L-丙氨酸 ) -聚乙二醇单甲醚双嵌段共聚物 (MPEG-b-PLA)在固态下的微相结构和链段运动行为 .结果表明 ,聚乙二醇链段在形成嵌段共聚物后结晶度明显下降 ,同时存在晶区和非晶区 ,从而表现出两种不同的运动状态 .而聚乙二醇链段的引入对聚 L-丙氨酸链段影响不大 ,嵌段共聚物中聚 L-丙氨酸链段高度结晶 ,同时含有大量的α螺旋结构 ,分子链运动严重受限 ,估计聚 L-丙氨酸链段的相区尺寸很小 .

两亲型聚L-亮氨酸-聚乙二醇单甲醚嵌段共聚物的合成与表征

利用L-亮氨酸和三聚光气反应制备了N-羧基-L-亮氨酸-环内酸酐(NCA)。以聚乙二醇单甲醚(MPEG)为原料，制备了端氨基聚乙二醇单甲醚(MPEG-NH2)，并以此作为大分子引发剂，在溶液中引发NCA开环聚合，合成了不同组成和分子量的新型两亲性聚L-亮氨酸-聚乙二醇单甲醚两嵌段共聚物(PLM)。利用IR、^1H NMR、DSC、GPC等方法对共聚物结构进行了表征。结果表明，MPEG-NH2引发NCA开环聚合得到的是嵌段共聚物，通过^1H NMR谱计算得到了共聚物PLM-1、PLM-2和PLM-3中PL链段的摩尔分数分别为7.9％、14.6％和29.8％，共聚物数均分子量(Mn)分别为6 100、7 190和10 420。吸水实验表明，亲水MPEG链段的引入改善了PL的亲水性能，吸水率由7％(PL)提高到24％(PLM-1)。

叶酸受体靶向的聚L-丙氨酸-聚乙二醇单甲醚嵌段共聚物的合成及表征

以端氨基聚乙二醇单甲醚(MPEG-NH2)为引发剂,聚合N-羧基-丙氨酸-环内酸酐(NCA)得到聚L-丙氨酸-聚乙二醇单甲醚嵌段共聚物(PLAM),并接枝叶酸,制得叶酸偶联的叶酸-聚L-丙氨酸-聚乙二醇单甲醚嵌段共聚物(FOL-PLAM)。利用FT-IR1、HNMR等分析方法确认了聚合物PLAM和FOL-PLAM的结构及分子量。FOL-PLAM有望成为一种抗肿瘤药物靶向输送的新型载体。

聚(N~ε-苄氧羰基赖氨酸)-聚乙二醇-聚(N~ε-苄氧羰基赖氨酸)的合成及其表征

利用三光气合成了Nε 苄氧羰基赖氨酸酸酐 (Lys(z) NCA) ,并用双端氨基聚乙二醇做引发剂 ,在DMF中引发Lys(z) NCA聚合 ,合成了聚 (Nε 苄氧羰基赖氨酸 ) 聚乙二醇 聚 (Nε 苄氧羰基赖氨酸 )三嵌段共聚物。利用IR、1HNMR、DSC和GPC对其结构进行了表征 ,结果表明 ,这种方法能够合成分子量可控、分子量分布窄 (Ip=1 0 6 )的嵌段共聚物 ,产率 95 4 %

两亲性二嵌段共聚物MPEG_(44)-b-Phe的合成及其在水溶液中的自组装

利用光气法,以三光气和苯丙氨酸为原料,合成了苯丙氨酸酸酐(b-Phe-NCA).用端氨基聚乙二醇单甲醚(MPEG-NH2)作大分子引发剂,引发b-Phe-NCA开环聚合,合成了不同分子量的聚乙二醇单甲醚-聚(L-苯丙氨酸)(MPEG44-b-Phe)AB型二嵌段共聚多肽.利用IR1、H-NMR、GPC对共聚物结构进行了表征.利用TEM研究了二嵌段共聚多肽MPEG44-b-Phe50及MPEG44-b-Phe7在水溶液中的自组装形态,结果表明合成出的两亲性二嵌段共聚物在水溶液中自组装形成胶束,随着嵌段共聚物中亲水嵌段含量的增高,共聚物溶水性增强,其在水溶液中的自组装形态更加均一.

两性霉素B/聚乙二醇-聚天冬氨酸苄酯嵌段共聚物纳米胶束的制备与性能

目的研究两性霉素B/聚乙二醇-聚天冬氨酸苄酯嵌段共聚物（AmB/PEG-b-PBLA）纳米胶束的制备与性能。方法采用阴离子聚合反应合成了聚乙二醇-聚天冬氨酸苄酯嵌段共聚物[poly（ethylene glycol）-b-poly（β-benzyl-L-aspartate）,PEG-b-PBLA];由透析法制备了AmB/PEG-b-PBLA纳米胶束,通过紫外分光光度法测定了胶束的载药量及药物包封率,采用动态光散射法（dynamic light scattering,DLS）测定了胶束的粒径及分布;透射电镜（transmission electron microscopy,TEM）观察胶束的形貌;通过体外释药实验研究了AmB/PEG-b-PBLA胶束的释药特性;采用四噻唑蓝法（MTT）考察了AmB/PEG-b-PBLA胶束的细胞毒性;通过溶血率研究了AmB/PEG-b-PBLA胶束的溶血毒性;通过微量液基稀释法（broth microdilution method）研究了AmB/PEG-b-PBLA胶束的抗菌活性。结果PEG-b-PBLA能有效增溶AmB,AmB/PEG-b-PBLA胶束粒径均在50-223nm内,胶束的载药量在4.54%-23.5%之间,包封率在66.7%-94.5%之间。胶束的体外释药具有缓释特性;当质量浓度小于16mg·mL^-1时,AmB/PEG-b-PBLA胶束对细胞的毒性不明显;AmB/PEG-b-PBLA胶束的溶血毒性与临床使用的AmB注射剂相比明显降低（P〈0.05）;AmB/PEG-b-PBLA胶束的最低抑菌浓度只有两性霉素B注射剂的1/8-1/4,抗真菌活性明显高于AmB注射剂（P〈0.05）。结论AmB/PEG-b-PBLA纳米胶束具有均匀的粒径及粒径分布、缓释特性、低的溶血毒性和较好的抗菌活性,有望开发为抗真菌治疗的AmB新剂型。

聚乳酸-b-聚（N~ε-苄氧羰基-L-赖氨酸）-b-聚乙二醇的合成与表征

用端氨基聚乳酸做引发剂,在DMF中引发Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸酐(Lys(Z)-NCA)聚合,合成了端氨基聚(Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸)-b-聚乳酸两嵌段共聚物.以端羧基聚乙二醇经NHS活化与端氨基聚(Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸)-b-聚乳酸偶联,合成了聚(乳酸-b-Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸-b-乙二醇)三嵌段聚合物.利用IR、1H-NMR、GPC和TEM对它们的结构、形态进行了表征,结果表明,所合成的分子量可控、分子量分布窄(Mw/Mn=1.07)的嵌段共聚物,酰化反应产率达70%以上.同时聚乙二醇和Nε-苄氧羰基-L-赖氨酸被引入到聚乳酸主链中,在聚合物侧链脱保护后有望改善聚乳酸的细胞亲和性。