PEG-EPO中残余聚乙二醇的碘染色法

目的:建立检测聚乙二醇化促红细胞生成素(PEG-EPO)产品中残余聚乙二醇(mPEG_2-COOH)含量的方法。方法:样品经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)后,采用碘染色法进行染色,根据染色带深浅分析样品中 mPEG_2-COOH 的含量。结果:确定了测量 PEG-EPO 中检测 mPEG_2-COOH 含量的实验条件,在本实验条件下 mPEG_2-COOH 的检测下限约为5μg·mL^(-1)。结论:本法便捷、重复性好,适合该 mPEG_2-COOH 含量的检测要求。同时可运用于相关的聚乙二醇修饰蛋白质。

聚乙二醇修饰对苦瓜籽中RIP抗肿瘤活性及免疫学特性的影响

目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白(RIP)经聚乙二醇(PEG)修饰后的体外及动物体内免疫学特性的变化。方法用MTT法测定RIP和RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞的抑制率;通过间接ELISA法测定RIP和RIP-PEG结合物在小鼠体内的免疫原性;以全身主动过敏实验(ASA)和被动皮肤过敏实验(PCA)来比较二者在豚鼠和大鼠体内的过敏毒性。结果RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制率约为RIP的70%,产生的特异性IgG与RIP比较显著下降(P<0.01),诱发的过敏反应也显著降低。结论苦瓜籽RIP经PEG修饰后,其抗肿瘤活性、免疫原性和过敏毒性均显著降低。