聚乙二醇-过氧化氢酶在小鼠心肌肥厚和损伤中的保护作用

目的观察聚乙二醇-过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚和损伤中的保护作用。方法以异丙肾上腺素建立C57BL/6小鼠心肌肥厚和心肌损伤的模型,通过二氢乙啶染色、蛋白质印迹法、实时定量逆转录聚合酶链反应、Masson Trichrome染色等实验,检测聚乙二醇-过氧化氢酶在异丙肾上腺素所致小鼠心肌肥厚和损伤模型中对氧自由基生成、细胞凋亡、心肌纤维化、超氧化物歧化酶1(SOD-1)表达的影响。结果小鼠异丙肾上腺素皮下注射后,发生心肌肥厚和缺血损伤,心肌组织氧自由基生成明显升高,SOD-1的表达明显降低,心肌细胞凋亡增加,发生心肌纤维化,与对照组对比差异有统计学意义(均为P<0.01);与异丙肾上腺素处理组比较,聚乙二醇-过氧化氢酶(30 000 U.kg-1.d-1)预处理组心肌肥厚改善,氧自由基生成明显降低,SOD-1水平明显提高,细胞凋亡减少,心肌纤维化降低,差异有统计学意义(均为P<0.05)。结论抗氧化剂聚乙二醇-过氧化氢酶可以有效进入心肌组织,抑制氧自由基生成、减少心肌细胞凋亡和心肌纤维化,对异丙肾上腺素诱导的小鼠心肌肥厚和损伤具有保护作用。

过氧化氢在肝硬化门静脉高压症内脏高动力循环中的作用

目的探讨过氧化氢(H2O2)在门静脉高压症内脏高动力循环形成中的作用。方法雄性SD大鼠皮下注射四氯化碳(CCl4)制备肝硬化门静脉高压症(PHT)模型。PHT组大鼠制备完成后随机分为2个亚组:聚乙二醇-过氧化氢酶(PEG-catalase)处理组(PHT+PEG组)和生理盐水(NS)处理组(PHT+NS组),分别用PEG或NS腹腔内注射10 U/(g·d),共14 d。测定大鼠门静脉压力(PP)、肠系膜微动脉对去甲肾上腺素(NE)的反应性、肠系膜动脉内H2O2含量。结果 (1)PHT组PP明显高于非PHT组,PEG对PHT组PP并无明显改善(P>0.05);(2)PHT组肠系膜微动脉对NE的反应性明显低于非PHT组,血管收缩率50%时NE的浓度EC50明显升高(P<0.01),PEG能部分改善这种低反应性(P<0.01);(3)PHT组肠系膜动脉内H2O2明显升高,PEG能使其减少。结论肝硬化PHT中过度生成的H2O2可通过降低肠系膜动脉对NE的反应性参与高动力循环的形成。

聚乳酸-聚乙醇酸-聚乙二醇血管支架置入对兔动脉粥样硬化模型血清基质金属蛋白酶2,9的影响

目的:探讨生物可降解聚乳酸-聚乙醇酸-聚乙二醇(PLGA-PEG)血管支架置入对兔动脉粥样硬化模型的血清基质金属蛋白酶2,9(MMP-2、MMP-9)的影响。方法:成年健康白兔30只,经球囊血管内膜剥脱法制成髂动脉动脉粥样硬化动物模型,喂养6周后,随机分为两组,实验组(PLGA-PEG组,n=15),给予血管支架(PLGA-PEG)置入,对照组(n=15)常规喂养。两组动物在支架置入前、置入后7及30 d分别收集耳缘静脉血1 mL,以SDS-PAGE Zymography法检测MMP-2、MMP-9)及相应酶原(pro MMP-2和pro MMP-9)。结果:实验组支架置入前所测的MMP-2、MMP-9和proMMP-2[(11 568±2 219)、(10 364±1 429和(13 649±1 894)INT.mm2)]明显高于对照组[(6 128±1 562)、(8 519±2 167)和(8 413±2 156)INT.mm2](P<0.05);但proMMP-2两组比较,差异无显著性(P>0.05)。实验组支架置入后7 d与置入前相比,MMP-2及MMP-9以及相应酶原虽有增高趋势,但差异无显著性(P>0.05);支架置入30 d后MMP-2及酶原高于置入前[(13 935±2 167)、(15 628±1 739)INT.mm2vs(11 568±2 219)、(13 649±1 894)INT.mm2](P<0.01),MMP-9及酶原亦增高,但差异无显著性(P>0.05)。结论:血清MMP-2及酶原在动脉硬化动物模型中明显增高,血管支架置入后MMP-2增高。

外施γ-聚谷氨酸对蚜虫胁迫辣椒叶片叶绿素和两种氧化还原酶的分析

为探索新型无公害抗蚜方法,测试了外源施入γ-聚谷氨酸高分子聚合物的盆栽辣椒植株叶片在蚜虫胁迫后叶绿素含量、过氧化物酶、过氧化氢酶活性的变化。外施γ-聚谷氨酸的植株叶片叶绿素a和b的含量在受胁迫后随时间增加其下降趋势较对照降低;过氧化物酶和过氧化氢酶在蚜虫胁迫期间的活性较对照高。表明了外施γ-聚谷氨酸的辣椒植株叶片能够缓解由蚜虫胁迫导致的叶绿素降低的趋势并增强过氧化物酶和过氧化氢酶活性。

聚乙二醇化学修饰的重组L-门冬酰胺酶对小鼠白血病细胞P_(388)的抑制作用

目的 :考察聚乙二醇 (polyethyleneglycol,PEG)化学修饰的重组L 门冬酰胺酶 (recombinantL asparaginase ,rL ASP)的抗肿瘤活性。方法 :PEG化学修饰rL ASP ,获得的化学修饰酶 (polyethylenegly colmodifiedrecombinantL asparaginase ,rL ASP PEG)利用十二烷基硫酸钠 聚丙烯酰胺凝胶电泳法 (sodi umdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis ,SDS PAGE)观察其分子大小变化 ,四甲基偶氮唑盐(3 (4 ,4 dimcthylthioazol 2 yl) 2 ,5 diphenyl tetrazoliumbromide ,MTT)法和流式细胞仪 (flowcytometer,FCM )检测rL ASP PEG对体外培养的小鼠白血病细胞P3 3 8增殖作用的抑制作用 ,腹腔给药考察rL ASP PEG对小鼠移植性实体瘤P3 3 8抑瘤效果 ,透射电镜(transmissionelectronmicroscopy ,TEM )观察rL ASP PEG引起的肿瘤组织超微病理变化。结果 :SDS PAGE显示 ,rL ASP PEG的分子量大于rL ASP ;MTT实验表明 ,rL ASP PEG能抑制体外培养的小鼠P3 88白血病细胞的增殖 ,半数有效浓度 (inhibitoryconcen tration 5 0 % ,IC50 )为 2 .0 5 6IU·ml-1。FCM结果表明 ,rL ASP PEG主要将肿瘤细胞P3 88抑制在G0 +G1期 ,S期细胞减少。DBA 2荷瘤小鼠的抑瘤实验表明rL ASP PEG对移植性实体瘤P3 3 8有显著抑制作用 。

过氧化氢在门静脉高压症大鼠侧支循环建立中的作用

目的探讨过氧化氢(H2O2)对胆总管结扎诱导的肝硬化门静脉高压症(PHT)大鼠门体侧支循环形成的影响机制。方法胆总管结扎诱导的肝硬化PHT大鼠和假手术组大鼠每天一次腹腔分别注射浓度为10 000 U/kg聚乙二醇过氧化氢酶(PEG-catalase)或生理盐水,共8 d。测定大鼠肠系膜组织H2O2含量,利用彩色微球技术测定门体分流率及相应血流动力学指标。检测大鼠肠系膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)及VEGF受体-2(VEGFR-2)蛋白含量。结果肝硬化PHT组大鼠门静脉压力、肠系膜组织H2O2水平及门体分流程度明显高于对照组大鼠。PEG-catalase处理使PHT大鼠门体分流率明显下降,VEGF及VEGFR-2蛋白水平明显降低,内脏高血流动力循环得到明显改善。结论 H2O2在肝硬化PHT内脏高动力循环形成过程中发挥重要作用,这和VEGF介导的血管增生有关。

聚乙二醇-6000胁迫对茄子幼苗生长及酶活性的影响

为研究不同浓度聚乙二醇-6000胁迫对茄子幼苗生长及保护酶活性的影响,以苏崎1号茄子为材料,分别用5%、10%、15%聚乙二醇-6000对茄子幼苗进行处理,测定茄子幼苗干质量、鲜质量、叶绿素含量、净光合速率及酶活性等的变化。结果表明,聚乙二醇-6000胁迫对茄子幼苗生长有一定的影响。随着干旱胁处理浓度的升高,茄子幼苗的干质量、鲜质量变化明显,叶绿素含量逐渐降低,而净光合速率呈现先升高后降低的趋势,在5%聚乙二醇-6000处理下达到最大值,15%聚乙二醇-6000处理下净光合速率显著降低;而随着胁迫时间的延长和聚乙二醇-6000处理浓度的升高,过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性呈现逐渐升高的趋势,处理3 d时抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性随聚乙二醇-6000浓度升高而升高,说明干旱胁迫提高了茄子幼苗的保护酶活性,缓解了干旱胁迫对幼苗的伤害。

聚乙二醇对烟草种子活力及幼苗保护酶活性的影响

以烟草种子为材料,用不同浓度的聚乙二醇(PEG)浸种不同时间,测定了浸种后种子萌发过程中和萌发后幼苗中某些生理生化指标及保护酶活性的变化。结果表明,PEG浸种能显著提高种子发芽率和幼苗活力指数,增强萌发种子的呼吸强度和淀粉酶活性,以20%PEG-6000浸种48h效果最好。不同活力水平的种子经20%PEG处理后,幼苗活力指数明显提高,叶片超氧物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)等保护酶活性升高,膜脂过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧阴离子(O2-)含量及电解质外渗率显著低于对照。研究还发现,PEG处理能提高种子在低温下的萌发率,增强幼苗抗冷性。

聚乙二醇胁迫对甘蔗伸长期间叶中脯氨酸积累及其代谢关键酶活性的影响

甘蔗品种‘桂糖119’(‘GT119’)、‘新台糖16号’(‘ROC16’)、‘新台糖22号’(‘ROC22’)为材料,在甘蔗伸长期用25%聚乙二醇(PEG)6000淋灌于根部。第4天,‘GT119’与‘ROC16’叶中游离脯氨酸含量明显上升,但‘ROC22’在处理后6d内其含量增加仍不明显。吡咯啉-5-羧酸合成酶活性变化因品种而异,‘ROC22’在处理后第6天才明显上升,其他2个品种则在胁迫处理1d后即明显提高。鸟氨酸转氨酶活性变化不明显。‘ROC22’在处理1d后其脯氨酸脱氢酶活性稍有提高,而其他2个品种则下降。

聚乙二醇干扰素-2a联合双环醇对慢性乙型肝炎患者HBV DNA近期疗效的影响

目的探讨聚乙二醇干扰素-2a联合双环醇对慢性乙型肝炎(CHB)患者血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、乙型肝炎病毒(HBV)DNA复制能力及免疫应答作用的影响。方法选取本院68例血清HBeAg阳性的CHB患者为研究对象,根据随机数字表法将患者分为观察组及对照组各34例,两组均给予聚乙二醇干扰素-2a治疗,180 l/次,每周皮下注射1次。对照组同时给予恩替卡韦抗病毒治疗,观察组则给予双环醇25 mg/次,3次/d,两组患者持续治疗6个月,观察两组患者治疗前后ALT、HBVDNA载量以及机体免疫应答发应的变化。结果两组患者治疗前血清ALT水平、HBVDNA载量差异无统计学意义(>0.05),治疗1周、1个月、2个月、3个月及6个月后观察组血清ALT水平、HBV DNA载量显著低于对照组,差异均有统计学意义(<0.05)。随访过程中观察组患者HBeAg消失率29.41%,转换率为35.29%,HBsAg消失率23.53%,转换率为20.59%,对照组HBeAg消失率5.88%,转换率11.76%,HBsAg消失率0,转换率为0,差异有统计学意义(<0.05)。结论聚乙二醇干扰素-2a联合双环醇能有效抑制CHB患者HBV DNA复制,改善患者肝功能,提高机体免疫应答水平。

血清丙氨酸氨基转移酶、谷氨酰转肽酶、铁蛋白、丙型肝炎病毒核糖核酸定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响

目的探讨血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰转肽酶(GGT)、血清铁蛋白(SF)、丙型肝炎病毒核糖核酸(HCV-RNA)定量对聚乙二醇干扰素抗病毒疗效的影响。方法选取四川省自贡市第一人民医院2014年1—6月收治的慢性丙型病毒性肝炎患者51例,以ALT值达100 IU/L、GGT值达50 IU/L、SF值达400 ng/ml、HCV-RNA定量达106copies/ml为界将患者分为低ALT、GGT、SF、HCV-RNA组与高ALT、GGT、SF、HCV-RNA组,均给予聚乙二醇干扰素a-2a联合利巴韦林治疗48周,随访24周。在0周时检测血清ALT、GGT、SF、HCV-RNA,在4、12、48及72周检测HCV-RNA以判断疗效。结果聚乙二醇干扰素抗病毒治疗前低GGT、SF、HCV-RNA组较高GGT、SF、HCV-RNA组能获得更好的持续病毒应签(SVR)(P<0.05),而ALT水平与疗效无相关性(P>0.05)。结论慢性丙型病毒性肝炎患者治疗前GGT、SF、HCV-RNA水平与聚乙二醇干扰素的疗效密切相关,提示GGT、SF、HCV-RNA的水平可较准确地预测慢性丙型病毒性肝炎患者聚乙二醇干扰素抗病毒治疗的疗效。

猪胃黏蛋白偶联磁珠和聚乙二醇富集检测青葱和葡萄中诺如病毒的比较研究

目的:以青葱与葡萄为材料,建立以猪胃黏蛋白偶联磁珠(PGM-MB)和聚乙二醇8000(PEG8000)富集检测水果、蔬菜中诺如病毒的方法。方法:确定病毒原液中的相对病毒量,梯度稀释病毒原液并进行实时荧光-聚合酶链式反应检测,以每个反应管内的荧光信号达到设定的域值时所经历的循环数值与病毒量(实时荧光-聚合酶链式反应单位数)的常用对数值绘制标准曲线和线性方程;人工接种诺如病毒于青葱与葡萄表面,洗脱后,分别用PEG8000和PGM-MB富集诺如病毒,实时荧光-聚合酶链式反应扩增,用标准曲线对回收的病毒进行相对定量。结果:基质为青葱时,高接种量条件下,两种富集方法的病毒回收效果相当,低接种量下,PGM-MB法的富集回收率高于PEG8000法,且PGM-MB的检测下限更低;基质为葡萄时,PGM-MB法的富集回收率均高于PEG8000法,且检测下限更低。结论:PGM-MB富集效果良好,快速方便,适合应用于水果和蔬菜中的诺如病毒的富集检测。

聚乙二醇对合成多孔SiO_2块体结构和性能的影响

以正硅酸乙酯、聚乙二醇、乙醇和氨水为主要原料,采用溶胶-凝胶法制备了固定化酶用的块状多孔SiO2。研究了引入不同聚乙二醇对多孔材料的结构、孔径分布和水热稳定性的影响。结果表明:随着聚乙二醇含量的增加和聚乙二醇相对分子量降低,胶凝时间缩短。随聚乙二醇引入量增加,材料的比表面积、孔容和平均孔径值均增加。当添加的聚乙二醇的质量分数为30%时,各值达到极大。添加不同含量聚乙二醇所得的多孔块材在80℃热水中浸泡72h后气孔率变化均不超过8%,质量损失率小于6%,热水浸泡前后材料的孔径分布曲线形状基本不变,所得多孔材料的水热稳定性能好。

基于脱乙酰基魔芋葡甘聚糖固定酶的H_2O_2生物传感器

对魔芋葡甘聚糖进行了脱乙酰基改性处理，并用红外光谱表征了其脱乙酰基前后的结构变化。探讨了脱乙酰基魔芋葡甘聚糖溶胶-凝胶的制备条件对其成膜性能及酶固定化的影响。将脱乙酰基魔芋葡甘聚糖用于辣根过氧化物酶的固定，制备出了H2O2生物传感器。传感器在优化的工作条件下线性范围为1．0×10^-6-6．0×10^-4mol／L，检出限为8×10^-7mol／L，稳定性良好。实验表明脱乙酰基魔芋葡甘聚糖是一种适用于生物传感器领域酶固定化的优良材料。

着毛花卉种子的脱绒技术及聚乙二醇对脱绒种子损伤的修复作用

以千日红,天人菊两种花卉种子为试材,研究了着毛花卉种子的脱毛技术及PEG对脱毛种子损伤的修复作用,结果表明不同着毛花卉种子取得最佳脱毛效果时所用得H2SO4浓度不同,千日红,天人菊所用H2SO4浓度分别为70%、60%,而20%PEG-6000对脱毛花卉卉种子的修复作用最好,20%PEG-6000处理脱毛花卉种子后其发芽率、发芽势、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)活性有显著提高,而外渗电导率和MDA含量明显降低。

mPEG-b-PCL的酶催化反应挤出制备及其结构研究

以小型双螺杆挤出机为反应容器,以脂肪酶Novozyme-435为催化剂,采用反应挤出工艺,研究了甲氧基聚乙二醇(mPEG)引发ε-己内酯的开环聚合反应,制得甲氧基聚乙二醇-b-聚ε-己内酯(mPEG-b-PCL),考察了ε-己内酯单体转化率(η),mPEG的引发效率(ηmPEG),水对聚合反应的影响。结果表明:由核磁共振氢谱分析确定聚合产物为mPEG-b-PCL;在反应温度90℃条件下,反应时间为120,240,360min时,η分别为82.01%,89.76%,92.61%,ηmPEG分别为28.17%,40.13%,35.31%,即ηmPEG先增加后降低;PCL链段的水解是ηmPEG降低的主要原因。

聚乙二醇干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效与人类白细胞抗原DRB1等位基因的相关性研究

目的探讨青岛地区汉族慢性乙型病毒性肝炎患者聚乙二醇干扰素治疗疗效与人类白细胞抗原（HLA）-DRB1等位基因的关系。方法以接受聚乙二醇干扰素α-2a正规治疗48周的青岛地区汉族慢性乙型肝炎患者40例作为研究对象，应用聚合酶链反应-序列特异性引物技术对患者的HLA-I／类抗原的DRB1 ＊04、＊07进行等位基因检测，应用SC2000统计软件对结果进行分析。结果40例慢性乙型肝炎患者接受聚乙二醇干扰素α-2a治疗48周后，完全应答者19例（47．5％），部分应答者10例（25．0％），无应答者11例（27．5％）。无应答者11例中，HLA—DRB1＊04携带者4例，HLA-DRB1＊07携带者7例；部分、完全应答者29例中，HLA—DRB1＊04携带者1例；HLA—DRB1＊07携带者6例，无应答者HLA-DRB1＊04和＊07携带率均明显高于部分、完全应答者（前者P〈0．05，OR=16．0；后者P〈0．05，OR=6．7）。结论青岛地区汉族人群中慢性乙型肝炎聚乙二醇干扰素α-2a治疗无应答与HLA-DRB1＊04、＊07呈正相关。

聚乙二醇(PEG)处理对希蒙德木种子活力的影响

希蒙德木种子经过PEG处理后内部酶的活性发生变化,不同浓度的PEG处理24h后,可以降低种子的膜透性和丙二醛的含量,提高超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性;但随着处理时间的延长,膜的透性增加,丙二醛含量上升,超氧化物歧化酶和过氧化氢酶的活性降低。PEG5%处理24h效果最好。

PAOAA修饰金电极固定过氧化氢酶的电化学研究

设计了一种基于金属离子螯合法固定蛋白质的新方法.首先电化学聚合苯胺(ANI)/邻氨基苯甲酸(OAA)得到在中性溶液中具有导电性的聚(苯胺-邻氨基苯甲酸)(PAOAA)共聚物膜,并对膜进行了SEM、EDS表征.随后膜负载Cu2+,Cu2+作为螯合离子通过配位作用固定过氧化氢酶(Cat).用EDS测量了铜的负载量为0.49%.脉冲伏安法(DPV)研究了Cat在金电极表面的固定过程,显示随着ANI/OAA在电极表面聚合成膜、Cat在修饰电极表面固定,电极在10mmol/LK3Fe(CN)6/K4Fe(CN)6(Fe(CN)63-/4-)溶液中的扫描峰电流由裸电极的121μA依次降到92.6、71.8μA,表明电极表面修饰的PAOAA膜和固定的Cat阻碍了电荷的传递.电化学阻抗法(EIS)对固定过程中电极表面阻抗变化的研究也得到同样结论.用线性扫描伏安法(LSV)研究了固定到电极表面后Cat对H2O2的催化还原活性.最后以计时电流法(CA)作为检测手段,Cat修饰电极作为探针实现了对H2O2的定量检测,同时该电极显示出良好的重建性.