16SrRNA基因PCR加反相杂交技术检测细菌DNA

目的探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）加反相杂交技术在细菌ＤＮＡ检测中的应用。方法以１６ＳｒＲＮＡ基因为靶序列，设计引物及寡核苷酸探针，采用ＰＣＲ法加反相杂交检测标准菌株及临床标本细菌ＤＮＡ。结果对２０株不同标准菌株进行ＰＣＲ扩增，均出现３７１ｂｐ长度的ＤＮＡ片段，敏感性试验可检测出１０－１２ｇ的细菌ＤＮＡ，与人基因组及病毒无交叉反应；２２份血培养阳性标本及４份脑脊液培养阳性标本均扩增出３７１ｂｐ长度ＤＮＡ条带，反相杂交区分革兰阳性／阴性细菌与培养结果相符。结论１６ＳｒＲＮＡ基因ＰＣＲ加反相杂交技术检测细菌ＤＮＡ，具有敏感、快速、准确的特点，为细菌感染的临床诊断提供了科学的依据。