核-壳结构的脂质-聚合物杂化纳米粒的研究进展

核-壳结构的脂质-聚合物杂化纳米粒(CSLPHNs)是以具有生物可降解性的聚合物纳米粒为核,外层包覆单层或多层具有生物膜仿生性的脂质壳而形成,结合了纳米粒和脂质体的双重优点,具有粒径小、载药量高、生物相容性好及缓控释给药等优势,在药物递送系统中应用甚广。笔者在查阅近年国内外文献的基础上归纳了CSLPHNs的基本特性、制备方法及在眼部给药、肿瘤治疗及临床诊断成像中的最新研究进展。

双配体修饰脂质聚合物杂化纳米粒的制备及细胞摄取研究

目的制备双修饰的主动心肌靶向的载荧光探针香豆素-6(C-6)的脂质-聚合物杂化纳米粒(LPHNs),并考察其细胞摄取。方法通过巯基化反应,合成导向化合物心肌细胞靶向肽-聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(PCM-PEG-DSPE)。选取C-6为荧光探针,采用自动组装法制备包载C-6的LPHNs,再通过插入法,用PCM和细胞穿膜肽(TAT)对C-6-LPHNs进行修饰。以心肌细胞(H9C2)为模型做体外细胞摄取实验。结果双修饰的C-6-LPHNs的平均粒径为74.5±4.2 nm,分散系数(PDI)为0.051±0.013,Zeta电位为-32.8±1.2 mV,包封率为87.04%±3.19%。双修饰的C-6-LPHNs对H9C2心肌细胞的摄取率明显高于未修饰的C-6-LPHNs。结论LPHNs经双修饰后可促进H9C2心肌细胞的摄取。

口服胰岛素肠溶聚合物脂质杂化纳米粒的制备与评价

为了提高胰岛素的口服生物利用度,本研究以聚乙二醇聚乳酸共聚物(PEG-PLA)为高分子载体材料、磷脂s75为脂质材料、Eudragit L100为肠溶材料制备口服胰岛素肠溶聚合物脂质杂化纳米粒(INS-NPs L100),并对其体内外性能进行评价。采用W/O/W复乳溶剂挥发法制备胰岛素聚合物脂质杂化纳米粒(INS-NPs),以包封率、粒径和释药行为为评价指标,采用单因素法对处方进行优化;将最优INS-NPs与肠溶材料Eudragit^■L100混合制备成INS-NPs L100,并对其形态、体外释放及健康大鼠灌胃后的降血糖作用进行评价。以最优处方制备的INS-NPs包封率为(62.18±4.51)%,平均粒径为(225.2±94.3)nm,多分散系数为0.191±0.068,Zeta电位为-(14.84±1.26)mV。包裹肠溶材料后所制备的INS-NPs L100,在pH1.0盐酸溶液中2h累积释放量为8.01%,在pH6.8的磷酸盐缓冲液中6h累积释放量为67.31%。将所制备的INS-NPs L100经口给予健康大鼠(38IU/kg)后,具有明显的持续降血糖作用,3.5h时血糖浓度可降至初始值的76%。实验结果表明,本研究所制备的INS-NPsL100可有效减缓胰岛素在胃液中的释放速度,提高蛋白在胃肠道中的稳定性,为多肽、蛋白类药物口服给药提供了新的研究思路。

羟基喜树碱脂质聚合物杂化纳米粒的制备及体内外性能评价

目的以二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇2000(1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N-[methoxy(polyethylene glycol)-2000],DSPE-PEG2000),大豆卵磷脂(soy lecithin-100M,SL-100M),共聚物材料聚乳酸(polylactic acid,PLA),聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co-glycolic acid),PLGA),聚己内酯(polycaprolactone,PCL)为载体包载羟基喜树碱(hydroxycamptothecin,HCPT),采用乳化溶剂挥发法制备HCPT脂质聚合物杂化纳米粒(hydroxycamptothecin lipid-polymer hybrid nanoparticles,HCPT-LPNs),以期提高制剂的载药量并改善其体外血浆稳定性,体外释放性能,体外抗肿瘤活性,体内药代动力学效果以及体内肿瘤抑制效果。方法以粒径、多分散指数、电位为评价指标,采用单因素考察法筛选出HCPT-LPNs的最优处方工艺。以不同聚合物(PLA,PLGA,PCL)为HCPT-LPNs的内核,比较其在10%大鼠血浆中的稳定性。以不同pH值的缓冲液作为释放介质,考察HCPT-LPNs的体外释放情况。以游离的HCPT作为参比制剂,用MTT法测定HCPT-LPNs对MCF-7细胞的体外细胞毒性,考察HCPT-LPNs在大鼠体内药物代谢动力学特性。结果PLA及PLGA内核的HCPT-LPNs较PCL内核的HCPT-LPNs相比具有较好的血浆胶体稳定性。HCPT-LPNs具有pH敏感的释放特性。HCPT-LPNs的体外细胞毒性较游离HCPT大。结论HCPT-LPNs为安全有效的递送HCPT的纳米制剂。

载芍药苷的甘草次酸修饰脂质聚合物杂化纳米粒体内靶向性分析

目的:制备甘草次酸修饰的芍药苷(Pae)脂质聚合物杂化纳米粒(GA-LPHNPs-Pae),并进行理化性质表征和体内靶向性评价。方法:采用两步法制备GA-LPHNPs-Pae,采用葡聚糖凝胶柱分离法进行GA-LPHNPs-Pae的纯化及包封率测定。SPF级昆明小鼠尾静脉注射2.8 ml·kg^(-1)剂量后,采用Q Exactive Focus高分辨液质联用仪分析15,30,45,60,90,120,240 min时间点血液及心、肝、脾、肺、肾组织中Pae的分布情况。结果:所制备的GA-LPHNPs-Pae外观圆整、分布均匀,粒径、分散指数和Zeta电位分别为(96.98±0.39)nm、(0.104±0.005)、(-13.10±0.26)mV,包封率41.6%~52.3%。给药后15,45,60,240 min时,GA-LPHNPs-Pae组血药浓度均显著高于溶液组(P<0.01);心脏、脾脏、肺脏中,GA-LPHNPs-Pae组和溶液组Pae含量均随时间下降,但在脾脏中药量蓄积峰值延后15 min。GA-LPHNPs-Pae组肾脏中药物消除速度4 h内不断下降,但远低于溶液组(P<0.01)。在肝脏中GA-LPHNPs-Pae组Pae含量一直高于溶液组(P<0.01)。结论:成功制备GA-LPHNPs-Pae,体内初步的靶向性分析表明,GA-LPHNPs-Pae可显著提高4h内Pae的肝脏组织蓄积量,显著延长其在小鼠体内的循环时间,尤其是在肝脏中的滞留时间,表明其具备肝靶向性。

载芍药苷的甘草次酸修饰脂质聚合物杂化纳米粒的理化性质表征及体外靶向性评价

目的制备载芍药苷的甘草次酸修饰的脂质聚合物杂化纳米粒(GA-LPHNPs-Pae),对其理化性质进行表征并评价体外靶向性。方法采用两步法制备GA-LPHNPs-Pae,进行外观、粒径与分布、电位、包封率、释放度、红外分析及HepG2细胞摄取靶向定性评价。结果所制备的GA-LPHNPs-Pae外观圆整、分布均匀;粒径、多分散指数和Zeta电位分别为(96.98±0.39)nm、(0.104±0.005)、(-13.10±0.26)mV;红外分析可见甘草次酸特征峰;葡聚糖凝胶柱法测得包封率在41.6%~52.3%;24 h内释放速度先快后慢,2~12 h内释放速度显著下降,曲线平缓,12 h后释放缓慢。以FITC作为荧光探针,以50μg·mL^(-1)浓度NPs-Pae和GALPHNPs-Pae分散液与HepG2细胞共孵育,在2 h时,HepG2细胞摄取GA-LPHNPs-Pae明显优于未修饰的NPs-Pae。结论本文所制备的GA-LPHNPs-Pae外观圆整、分布均匀,对水溶性成分芍药苷包封良好,体外释放缓慢,初步验证对HepG2细胞具有靶向亲和作用。

蟾毒配基脂质-蛋白杂化纳米粒的制备及评价

目的采用搅拌超声法制备蟾毒配基脂质-蛋白杂化纳米粒,延缓药物的体外释放。方法以单因素考察法优化处方及制备工艺,并应用透射电镜观察制剂形态,动态光散射法测定粒径和ζ-电位,差示扫描量热法和X-射线衍射法表征药物在制剂中的存在形式,透析法考察纳米粒及溶液剂中药物的释放行为。结果纳米粒外观圆整均匀,平均粒径为(82.4±28.5)nm,ζ-电位为-19.44 m V,药物在制剂中以无定形态存在,与溶液剂相比,纳米粒可显著延缓药物释放,其释放行为符合Weibull模型,释放机制以扩散为主。结论利用搅拌超声法,以白蛋白和卵磷脂作为载体和稳定剂制备的脂质-蛋白杂化纳米粒可显著延缓蟾毒配基的体外释放。

聚合物-脂质纳米粒用于增强酪氨酸血症I型治疗性碱基编辑器质粒的肝靶向递送研究

酪氨酸血症I型是一种罕见的常染色体隐性遗传病,目前尚无有效的治疗方法。近年来,以碱基编辑器为代表的基因编辑技术已被报道用于酪氨酸血症I型的治疗。然而,由于生理屏障的存在,碱基编辑器递送困难。在本研究中,我们构建了一种靶向去唾液酸糖蛋白受体的聚合物-脂质纳米递送系统,用于改善酪氨酸血症I型治疗性核酸药物的递送效率。我们首先合成了一种生物可降解性丙烯酸酯-氨基醇共聚物用于递送碱基编辑器质粒,其转染效率显著优于市售转染试剂Hieff Trans^(TM)。随后,共聚物纳米粒与DOPE-PEG-Gal NAc自组装形成聚合物-脂质纳米粒,用于增强纳米粒的肝脏递送效率。在体外转染实验中,包载Fah-p CMV-ABE6.3-EGFP碱基编辑器质粒的聚合物-脂质纳米粒表现出了良好的肝细胞选择性,其转染效率是游离质粒的70倍以上。研究表明,携带肝靶向配体的聚合物-脂质纳米递送系统能够有效增强治疗性碱基编辑器质粒的肝靶向递送效率并为酪氨酸血症I型的基因治疗提供了一种潜在的递送载体。

拉洛他赛共聚物脂质杂合纳米粒的制备及其性能评价

目的以聚乙二醇-聚己内酯(polyethylene glycol-b-poly caprolactone,m PEG-b-PCL)为聚合物,硬脂酸单双甘油酯(geleol mono and diglycerides Nf,GMD)为固体脂质,制备拉洛他赛共聚物脂质杂合纳米粒(larotaxel-solid lipid core-contained polymeric nanoparticles,LTX-cSLNs)并评价其性能。方法采用透析法制备LTX-cSLNs,以粒径、多分散系数(polydispersity index,PDI)、载药量(drug loading content,wDL)和包封率(entrapment efficiency,wEE)为评价指标,采用单一因素法筛选最优处方工艺。采用高效液相色谱法测定LTX-cSLNs的wDL和wEE,激光散射粒度测定仪测定粒径和电位,采用透射电镜观察形态,采用差示扫描量热法测定GMD在纳米粒内核的存在形式。同时以不含GMD的纳米粒(larotaxel-solid lipid core-uncontained polymeric nanoparticles,LTX-u SLNs)作为对照,比较两种制剂在临界聚集质量浓度(critical aggregation concentration,ρCAC)以及体内外性能的差异。结果 LTXcSLNs帯有脂质内核,平均粒径为56.8 nm,zeta电位为-13.56 m V,wDL为12.9%,wEE为81.46%,ρCAC为0.126 mg·L^(-1)。LTX-cSLNs能够延缓累积释放量达12%,药时曲线下面积(AUC0-t)提高近16.7%。结论 LTX-cSLNs具有高载药量、高稳定性以及良好的体内外性能。

蛇床子素固体脂质纳米粒制剂的制备

目的 研究影响蛇床子素固体脂质纳米粒制备的主要因素。方法 采用熔融-匀化法制备蛇床子素固体脂质纳米粒,以正交设计法筛选较理想的处方和工艺,并考察其形态、粒径及包封率。结果 所制得的固体脂质纳米粒为圆形或卵圆形,粒子分散状态良好,无粘连,粒径分布范围100~200 nm,包封率59.78%。结论 熔融-匀化法可用于蛇床子素固体脂质纳米粒的制备。

脂质聚合物杂化纳米粒的研究进展

目的:综述脂质聚合物杂化纳米粒的最新研究进展。方法:查阅近20年国内外有关脂质聚合物杂化纳米粒文献,对脂质聚合物杂化纳米粒的制备方法、主要影响因素及其应用现状进行总结。结果:核壳结构脂质聚合物杂化纳米粒兼具脂质体与聚合物纳米粒2种载体的优势,可一定程度改善脂质体和纳米粒存在的稳定性差、药物渗漏等不足。结论:脂质聚合物杂化纳米粒是一种性能优良,具有广阔发展前景的新型给药系统,但目前尚需对稳定性、在体药效及安全性等问题做深入研究。

载溶酶体的脂质-聚合物杂化纳米粒的制备、表征和胶体稳定性评价

以溶酶体为模型蛋白，聚ε-己内酯（PCL）为聚合物核材料，棕榈酸甘油酯与卵磷脂的混合物为包裹在聚合物核外的脂质层材料，采用改良的w／o／w型复乳化-溶剂蒸发法制备了载溶酶体的脂质-聚合物杂化纳米粒（LPNPs），并进行表征和评价。

叶酸靶向载紫杉醇磷脂-聚合物杂化纳米粒的制备及其体外细胞评价

目的制备具有叶酸靶向性的载紫杉醇磷脂-聚合物杂化纳米粒（FIN-FLPNPs），并研究其对乳腺癌细胞EMT-6的细胞毒性及体外细胞吞噬。方法以聚己内酯-聚乙二醇-聚己内酯（PCL-PEG-PCL）、二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-甲氧基聚乙二醇（DSPE-mPEG2000）和叶酸偶联的磷脂（Folate—PEG（2000）-DSPE）为药物载体，通过薄膜水化法自组装制备PTX-FLPNPs，并对其进行表征；使用激光扫描共聚焦显微镜观察比较叶酸受体高表达的乳腺癌细胞EMT-6对叶酸靶向及无靶向杂化纳米粒的吞噬作用；采用MTS法研究PTX．FLPNPs对EMT．6细胞的细胞毒性。结果成功制备了PTX-FLPNPs，其呈球形，粒径均匀，具有明显的“核-壳”结构。投药量为30％的PTX-FLPNPs的平均粒径为（279．9±8．7）nm，多分散系数为0．173±0．021，Zeta电位为（-17．5±1．1）mv，载药量为（27．36±0．91）％，包封率为（91．16±1．12）％。细胞吞噬实验表明，叶酸受体高表达的EMT-6细胞对叶酸靶向的杂化纳米粒的吞噬作用明显强于无靶向的杂化纳米粒（P〈0．05）。细胞毒性实验结果表明，PTX-FLPNPs的细胞毒性低于紫杉醇注射剂，且对肿瘤细胞的抑制效果优于无靶向的杂化纳米粒。结论VFX-FLPNPs具有较高载药量及包封率，粒径均匀，可通过主动靶向作用介导肿瘤细胞内吞，并增加药物在肿瘤细胞内的浓度，是-种能有效抑制肿瘤的靶向载药纳米制剂。

姜黄素固体脂质纳米粒和微胶囊的制备、表征及体内药动学的比较研究

目的探究固体脂质纳米粒和微胶囊2种制剂方法对姜黄素理化表征的影响,并对其在SD大鼠体内的药动学行为进行定性定量研究。方法分别采用薄膜-超声分散法和均质乳化-喷雾干燥法制备姜黄素固体脂质纳米粒(curcumin solid lipid nanoparticles,Cur-SLN)和姜黄素微胶囊(curcumin microcapsules,Cur-MC),并对其外观形态、粒度分布、ζ电位、包封率、载药量和体外释放度进行表征;通过超高效液相色谱串联飞行时间质谱(UPLC-QTOF-ESI-MS/MS)法鉴定ig后大鼠血浆中的代谢产物,采用超高效液相色谱串联三重四级杆质谱(UPLC-ESI-MS/MS)法测定血药浓度,比较药动学参数和生物利用度。结果2种制剂方法均可显著降低姜黄素的粒径,使其均匀分布,Cur-SLN和Cur-MC的平均粒径分别为(184.3±7.9)、(415.3±10.3)nm,ζ电位分别为(-48.1±0.9)、(-16.4±0.4)m V,Cur-SLN和Cur-MC可将姜黄素的体外释药率从原料药的51.12%分别提高至87.79%和83.02%。ig后大鼠血浆代谢物主要为姜黄素及其葡萄糖醛酸化代谢物(curcumin glucuronide,Cur-glu),与游离姜黄素(free curcumin,Cur-F)组相比,2种水溶姜黄素制剂的药时曲线下面积(AUC_(0~t))、达峰浓度(C_(max))等药动学参数显著提高,Cur-SLN组姜黄素和Cur-glu的相对生物利用度分别增加4.31和4.63倍,Cur-MC组分别增加3.19和2.73倍。结论2种制剂均可显著提高姜黄素的口服吸收生物利用度,且固体脂质纳米粒优于微胶囊。

麦醇溶蛋白-雷帕霉素复合纳米颗粒治疗乳糜泻的探索研究

目的设计制备搭载麦醇溶蛋白(Gliadin)-雷帕霉素(Rapamycin,Rapa)的复合纳米颗粒,经结构表征、稳定性、缓释特性等研究优选处方,测试其对乳糜泻相关过敏反应的免疫耐受治疗作用。方法本研究利用沉淀自组装法制备聚合物脂质杂化纳米粒(PLNs),载药后超滤离心法得到浓缩纳米药物水溶液;透射电镜观察其形态;激光粒度分析仪考察粒径、Zeta电位和稳定性;BCA蛋白定量测试及分光光度计考察包封率;透析袋法考察其体外释药特性;迟发超敏反应考察其免疫抑制效应。结果制备的PLN ^(Gliadin)、PLN^(Rapa)及PLN^(Gliadin+Rapa)纳米粒形态规整,分布良好,粒径分别为(198.04±10.98)nm、(70.73±6.51)nm、(200.98±0.77)nm;Zeta电位分别为(-29.71±5.67)mV、(-41.55±1.13)mV、(-44.80±4.93)mV;PLN ^(Gliadin)及PLN^(Gliadin+Rapa)的Gliadin包封率分别为(43.05±3.35)%与(41.79±4.93)%;PLN ^(Rapa)及PLN^(Gliadin+Rapa)的Rapa包封率分别为(38.05±6.26)%和(26.13±1.30)%。三种PLNs纳米药物缓释特性明显;药效学试验结果表明三种PLNs纳米药物均能降低由Gliadin刺激造成的足底肿胀超敏反应,PLN^(Gliadin+Rapa)效果最显著,且两次预防治疗比单次预防治疗效果好。结论搭载Gliadin-Rapa的PLNs递送体系结构稳定,缓释作用突出,能有效抑制乳糜泻相关的过敏反应,是治疗乳糜泻的潜在方法。

竹节参皂苷Ⅳa纳米体系对脑梗死的靶向治疗

目的:制备和评价以乳铁蛋白修饰的,荷载竹节参皂苷Ⅳa的脂质-聚合物杂化纳米体系(CⅣa/Lf-LPNs),用于脑梗死的靶向治疗。方法:采用纳米沉淀法制备了CⅣa/Lf-LPNs、荷载竹节参皂苷Ⅳa的脂质-聚合物杂化纳米体系(CⅣa/LPNs)、乳铁蛋白修饰的空载脂质-聚合物杂化纳米体系(Lf-LPNs),比较了它们的理化性质、体外释药性质、大鼠血液和脑中药物浓度变化及其对脑梗死模型大鼠的存活率和生化指标的影响。结果:乳铁蛋白修饰为纳米制剂带来正电荷,并附着在纳米体系表面,增大了纳米粒子的直径。三种纳米制剂的包封率均为90%左右。CⅣa/Lf-LPNs具有更持久的药物释放行为。CⅣa/Lf-LPNs组和CⅣa/LPNs组的血药浓度曲线是相似的,但二者脑部药物浓度曲线不同,CⅣa/Lf-LPNs组几乎每个时间点的脑部药物浓度均高于CⅣa/LPNs组(P<0.05)。此外,CⅣa/Lf-LPNs组提高了脑梗死模型大鼠的存活率,大鼠血清LDH含量最低,对脑梗死的改善作用显著优于CⅣa/LPNs和CⅣa溶液组(P<0.05)。结论:本文制备的CⅣa/Lf-LPNs可有效传递药物到达脑部,并持续的发挥改善脑梗死作用,是一种极具潜力的脑靶向治疗体系。

卡巴他赛纳米制剂的研究进展

第二代紫杉烷类药物卡巴他赛,具有较低的P-gp亲和力,可用于治疗多西他赛耐药的前列腺癌,是临床上治疗前列腺癌的二线药物。现从新药研发的角度综述卡巴他赛新型纳米剂型的发展现状。