PCR-ELISA法检测食品中空肠弯曲菌

针对空肠弯曲菌16S rRNA基因应用Primer Express 3.0软件设计特异性引物和探针,核酸探针5’端标记生物素,将聚合酶链式反应(PCR)、核酸液杂交以及酶联显色技术结合,对检测条件进行优化,建立食品中空肠弯曲菌的聚合酶链式反应-酶联免疫吸附分析法(PCR-ELISA)。该方法特异性强、灵敏度高(比PCR高10倍),可以快速、准确检测食品中污染的空肠弯曲菌。该方法可应用于临床诊断、食品卫生监控及出口食品的病原微生物检测等各个领域。

血清中HBV-DNA的两种定量PCR方法的比较

目的比较乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)定量测定的两种方法:聚合酶链式反应-酶联免疫吸附测定(PCR-ELISA)法和荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)法.方法检测了两种方法的灵敏度、批内批间可信度和特异性.结果PCR-ELISA法和FQ-PCR法在特异性和批内批间可信度方面相似.在85个HBV表面抗原阳性的病人血清中两种方法的检测结果96%保持一致,HBV-DNA血清阳性率分别为84%和80%,其结果取对数后有一定线性关系(r=0.588 9).PCR-ELISA法的灵敏度比FQ-PCR法高出一个稀释度,PCR-ELISA的最小检测限7.6×103拷贝/ml,而FQ-PCR为2.1×104拷贝/ml.但FQ-PCR法的技术复杂性要简单得多,分析时间(2 h)比PCR-ELISA(8 h)要短得多.结论两种方法各有优缺点,每个实验室都应根据各自的需求加以选择.

支原体PCR检测方法的建立及初步应用

经过对Genebank鸡滑液支原体、猪肺炎支原体、口腔支原体和猪鼻支原体16S rRNA序列比对,设计了一条通用引物,建立支原体PCR检测方法。该方法敏感、特异、经济、快速,在动物疫苗生产中检测细胞、半成品及成品支原体污染具有较大的应用价值。