血管内皮生长因子基因在正常造血细胞中的表达

目的 探讨正常造血细胞中血管内皮生长因子 (VEGF)基因的表达水平。方法 TRIzol一步法提取正常外周血和非恶性骨髓标本单个核细胞及正常血小板的总RNA ;以 β2 -微球蛋白基因为内对照 ,逆转录聚合酶链反应 (RT -PCR)半定量分析VEGF基因的表达。结果 2 2份外周血标本有 18份表达VEGF基因 ,表达率为81.8% ,其中 8份为中度表达 ;18份骨髓标本VEGF基因的表达率高达 94.4% (17/ 18) ,其中高度表达和中度表达分别为 5份与 6份 ;血小板有VEGF基因的低度表达。结论 正常造血细胞可表达VEGF基因 。

异羟基洋地黄甙（Digoxigenin）标记的DNA探针用于鉴定特异…

本文采用Ｄｉｇｏｘｉｇｅｎｉｎ（简称ＤＩＧ）标记的ＤＮＡ探针用于鉴定特异的ＥＢ病毒ＰＣＲ反应产物，根据ＥＢ病毒ＢａｍＨ１酶后产生的Ｗ片段的基因顺序合成一对外引物和一个内引物，由此外引物扩增的ＰＣＲ产物长度为１５４个碱基，用该引物对１００例石蜡包埋的劓咽癌组织，１３例劓咽癌活检组织及１１例畸胎 １００列人不良生育史的妇女血、羊水、绒毛标本中的ＥＢ病毒ＤＮＡ进行了检测。

混合样品中微量SRY基因的毛细管电泳检测

目的建立一种灵敏度高、重现性好的检测混合样品中微量目的基因的方法。方法采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增混合样品中微量男性ＤＮＡ的ＳＲＹ序列，分别通过琼脂糖凝胶电泳和毛细管电泳检测ＰＣＲ扩增产物，比较二者的检测灵敏度。结果毛细管电泳可检测到２０ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于３～４个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／６００，琼脂糖凝胶电泳可检测到７４ｐｇ男性模板ＤＮＡ（相当于１３个细胞中的ＤＮＡ含量）ＰＣＲ扩增产物总量的１／３。毛细管电泳检测微量目的基因扩增产物的综合灵敏度是琼脂糖凝胶电泳的７５０倍。结论毛细管电泳灵敏度高、重现性好，与ＰＣＲ技术结合可广泛用于各种混合样品中微量核酸分子的检测。

差异展示法鉴定GA_3诱导的水稻差异表达的mRNA

赤霉素（ｇｉｂｂｅｒｅｌｌｉｎｓ）是植物生长发育过程中一类重要的调节激素，在水稻不育系上喷施合适浓度的ＧＡ３（赤霉素的一种）可以克服其包颈现象．运用反转录和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）建立了一套旨在分离差异表达。ＤＮＡ的差异展示方法．将赤霉素ＧＡ３处理后的苗期水稻分别制备总ｍＲＮＡ，反转录ＰＣＲ后在测序胶上比较各处理间基因表达的差异，发现其中两个基因的表达量随ＧＡ３浓度的增加而增强，另有一个基因的表达则随ＧＡ３浓度的增加而减弱．已从测序胶中回收前两个表达增强的基因的。ＤＮＡ片段并重新扩增，拟用作探针从水稻基因组文库中分离这两个受ＧＡ３调控的基因．