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聚合酶链反应-单链构象多态性分析在精子发生相关基因检测中的应用 被引量:1
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作者 周作民 林敏 +5 位作者 王黎熔 朱虎 周亚东 郑英 周倩 沙家豪 《生殖医学杂志》 CAS 1998年第4期212-214,共3页
用聚合酶链反应方法检测了染色体核型正常的200例无精子症患者基因组DNA中的DYS1基因,发现8例有DYS1的缺失。选择60例DYS1阳性患者进行聚合酶链反应单链构象多态性分析,发现1例有多态性的改变,提示DYS1... 用聚合酶链反应方法检测了染色体核型正常的200例无精子症患者基因组DNA中的DYS1基因,发现8例有DYS1的缺失。选择60例DYS1阳性患者进行聚合酶链反应单链构象多态性分析,发现1例有多态性的改变,提示DYS1的点突变亦与无精子症相关。认为,对于DYS1阳性的无精子症患者有必要进行聚合酶链反应单链DNA多态性分析。 展开更多
关键词 无精子症 DYS1 聚合反应 单链构象多态性
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矽肺结核聚合酶链反应—单链构象多态性分析菌种鉴定的研究 被引量:1
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作者 王巍 李洪敏 +4 位作者 叶一秀 李素梅 姜平 陈东进 冯柏 《中国医师杂志》 CAS 2002年第11期1265-1266,共2页
关键词 聚合反应 单链构象多态性分布 结构分支杆菌 矽肺结核 细菌鉴定
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聚合酶链反应-单链构象多态性分析在家族性高胆固醇血症研究中的应用
3
作者 郦明芳 范乐明 +2 位作者 管晓翔 李崇勇 陈琪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期97-100,共4页
目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphism,PCR-SSCP)在家族性高胆固醇血症(famil... 目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性分析(polymerasechainreaction-singlestrandconformationpolymorphism,PCR-SSCP)在家族性高胆固醇血症(familialhypercholesterolemia,FH)研究中的应用价值。方法:提取FH患者外周血基因组DNA,进行PCR-SSCP及DNA序列分析。结果:对1家2例临床诊断为FH的患儿及其父母从基因水平明确了诊断。LDL受体基因突变是位于第6外显子的移框突变。结论:PCR-SSCP可以从基因水平对FH患者明确诊断,并可对先证者家系成员早期诊断,以便提供咨询和指导。 展开更多
关键词 家族性高胆固醇血症 聚合反应-单链构象多态性分析 基因突变 诊断 发病机制
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用聚合酶链反应单链构象多态性分析技术检测结核分枝杆菌L型的rpoB基因突变
4
作者 陆军 李卫鹏 叶松 《中国卫生检验杂志》 CAS 2008年第3期420-421,453,共3页
目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值。方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利... 目的:探索结核分枝杆菌L型的耐药基因rpoB突变与利福平耐药性的关系,以及聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术的临床应用价值。方法:收集结核分枝杆菌L型菌株52株,采用PCR-SSCP方法检测rpoB基因,与采用常规药敏试验法检测利福平耐药的结果进行对比分析。结果:采用常规法检测,52株临床分离株中有38株利福平耐药,耐药率为73.08%(38/52);PCR-SSCP方法对52株临床耐药株rpoB基因突变的检出率为65.38%(32/52),两种方法检测耐利福平的符合率为84.21%。结论:PCR-SSCP对利福平耐药的结核分枝杆菌L型菌株检出率较高,将其与常规药敏试验联合应用,是一种指导临床用药的好方法。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌L型 RPOB基因 聚合反应单链构象多态性分析
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聚合酶链反应-单链构象多态性技术快速检测脑脊液中病原菌的初步研究 被引量:6
5
作者 陶洪群 李向阳 +1 位作者 杨雷 杨锦红 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期735-738,共4页
目的探讨聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)快速检测病原菌的可行性,初步评价该法检测脑脊液中病原菌的意义。方法设计通用引物对不同细菌进行PCR-SSCP,同时利用该法直接检测脑脊液中的病原菌,并与细菌培养比较。结果不同细菌的SSC... 目的探讨聚合酶链反应单链构象多态性(PCR-SSCP)快速检测病原菌的可行性,初步评价该法检测脑脊液中病原菌的意义。方法设计通用引物对不同细菌进行PCR-SSCP,同时利用该法直接检测脑脊液中的病原菌,并与细菌培养比较。结果不同细菌的SSCP图谱呈多态性可相互区别;标准菌株和临床菌株的SSCP图谱完全一致;6份化脑的脑脊液,PCR-SSCP检出5份有细菌,而细菌培养只检出1份有细菌;7份病脑两种方法均未检出细菌。结论PCR-SSCP技术可快速、敏感地检测脑脊液中的病原菌。 展开更多
关键词 脑脊液 细菌 聚合反应 单链构象多态性
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聚合酶链反应-单链构象多态性技术检测耐多药结核分支杆菌rpoB、KatG、rpsL突变的研究 被引量:10
6
作者 黄四邑 邱望龙 +1 位作者 潘智灵 李福元 《中国防痨杂志》 CAS 北大核心 2001年第6期341-343,共3页
目的 应用PCR SSCP技术快速检测耐INH ,RFP ,SM结核分支杆菌分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变 ,评价其在检测结核分支杆菌耐药性方面的价值。方法  32株耐INH、RFP、SM结核分支杆菌临床分离株及 2 5株结核分支杆菌敏感分离株用PCR SSC... 目的 应用PCR SSCP技术快速检测耐INH ,RFP ,SM结核分支杆菌分离株KatG、rpoB、rpsL基因突变 ,评价其在检测结核分支杆菌耐药性方面的价值。方法  32株耐INH、RFP、SM结核分支杆菌临床分离株及 2 5株结核分支杆菌敏感分离株用PCR SSCP方法分别检测 ,rpoB、KatG、rpsL基因突变。结果  32株耐多药结核分支杆菌分离株中 ,rpoB、KatG、rpsLPCR扩增产物PCR SSCP分别有 2 8株 (87.5 % )rpoB基因 ,19株 (5 9.3% )KatG基因和 2 3株 (71.9% )rpsL基因电泳条带与结核分支杆菌标准株H3 7Rv电泳条带相比有明显差异 ,而 2 5株结核分支杆菌敏感株的PCR SSCP条带与结核分支杆菌H3 7Rv相似 ,特异性为 10 0 %。结论 PCR SSCP方法敏感、特异 ,可快速检测结核分支杆菌rpoB、KatG、rpsL耐药基因突变 。 展开更多
关键词 结核分支杆菌 耐药性 聚合反应-单链构象多态性 药物敏感性试验
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聚合酶链反应-单链构象多态性技术快速筛选结核杆菌的利福平耐药性 被引量:7
7
作者 吴为群 张扣兴 +3 位作者 谢灿茂 严英硕 王晓波 容中生 《中国抗感染化疗杂志》 2003年第1期5-7,共3页
目的 :探讨利用分子生物学方法直接快速检测结核分枝杆菌利福平 (RFP)药物敏感性的可行性。方法 :应用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术分别检测了 4 0株RFP药物敏感及耐药的结核分枝杆菌临床分离株。先用PCR扩增rpoB基因 ,... 目的 :探讨利用分子生物学方法直接快速检测结核分枝杆菌利福平 (RFP)药物敏感性的可行性。方法 :应用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术分别检测了 4 0株RFP药物敏感及耐药的结核分枝杆菌临床分离株。先用PCR扩增rpoB基因 ,随后用SSCP方法鉴定其扩增产物有无突变 ,并与药敏试验结果作对照分析。 结果 :所有临床分离株均观察到rpoB基因PCR扩增产物。 4 0株RFP敏感的临床分离株SSCP带谱与结核分枝杆菌H3 7RV标准株相同 ,4 0株RFP耐药株中37株检测到突变图谱。与Bactec结果对照 ,用PCR SSCP技术检测结核分枝杆菌RFP耐药性的敏感性为 93% ,特异性为10 0 %。结论 :结核分枝杆菌耐RFP是其rpoB基因突变所致。PCR SSCP技术可用于结核分枝杆菌RFP药物敏感性的直接快速检测。 展开更多
关键词 结核杆菌 聚合反应 单链构象多态性 利福平 药物耐受 抗菌药物
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聚合酶链反应-单链构象多态性技术检测瘢痕疙瘩成纤维细胞p53基因突变 被引量:2
8
作者 刘旺 蒋游晖 +2 位作者 林子豪 江华 李友良 《医学研究生学报》 CAS 2004年第3期256-258,共3页
目的 :分析瘢痕疙瘩成纤维细胞p5 3基因突变高发区第 4~ 8外显子的突变及其意义。 方法 :取手术切除的瘢痕疙瘩和非增生瘢痕各 12例 ,分别采用相应正常皮肤对照 ,体外培养成纤维细胞 ,采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技... 目的 :分析瘢痕疙瘩成纤维细胞p5 3基因突变高发区第 4~ 8外显子的突变及其意义。 方法 :取手术切除的瘢痕疙瘩和非增生瘢痕各 12例 ,分别采用相应正常皮肤对照 ,体外培养成纤维细胞 ,采用聚合酶链反应 单链构象多态性 (PCR SSCP)技术检测 p5 3基因的突变情况。  结果 :12例瘢痕疙瘩成纤维细胞标本中有 9例 p5 3基因外显子 4、5、6、7出现突变 ,非增生瘢痕标本和正常皮肤标本均未检出突变。 结论 :p5 3基因突变是瘢痕疙瘩形成和发展的重要因素之一。 展开更多
关键词 P53基因 瘢痕疙瘩 基因突变 凋亡 聚合反应-单链构象多态性
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聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收在基因改变检测中的应用 被引量:1
9
作者 王琦光 郭志刚 +1 位作者 赖文岩 朱鲜阳 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期29-32,共4页
目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收的方法在基因改变检测中的应用。方法:实验于2004-09/2005-10在南方医院心内科实验室完成。样本来源:于2004-09/2005-08选择南方医院心内科收治的冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病... 目的:探讨聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收的方法在基因改变检测中的应用。方法:实验于2004-09/2005-10在南方医院心内科实验室完成。样本来源:于2004-09/2005-08选择南方医院心内科收治的冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者123例,均符合WHO冠心病诊断标准,并经心电图、超声心动图、CT确诊。患者均知情同意。聚合酶链反应-单链构象多态性银染方法检测冠心病患者三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因改变,对1例怀疑存在基因改变样本的聚丙烯酰胺凝胶采用银染后单链胶回收,以胶回收后的单链聚合酶链反应产物为模板重复聚合酶链反应后进行测序。结果:在对三磷酸腺苷结合盒转运体A1基因Exon7进行单链构象多态性检测时,发现一样本泳带异常,对其样本进行银染后胶回收,结合限制性内切酶酶切,证实此样本存在碱基改变,从而验证了非变性聚丙烯酰胺凝胶银染后胶回收的准确性和可行性。结论:经聚合酶链反应-单链构象多态性银染后的非变性聚丙烯酰胺凝胶胶也可进行胶回收。聚合酶链反应-单链构象多态性银染后胶回收在基因改变检测中可以增强单链构象多态性基因突变检测的准确性,由于其无毒性、成本低及操作简单等优点,更易被实验人员所接受。 展开更多
关键词 聚合反应-单链构象多态性 三磷酸腺苷结合盒转运体A1 基因改变 银染法 胶回收
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聚合酶链反应-单链构象多态性分析Kallmann综合征的基因突变 被引量:1
10
作者 戴学军 冯建华 《现代实用医学》 2007年第8期637-638,共2页
目的检测Kallmann综合征位于X染色体p22.3基因KAL-1外显子的突变。方法KAL-1基因外显子突变应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析。结果5例Kallmann综合征患者KAL-1基因外显子突变情况,发现2例KAL-1基因外显子5~10缺失... 目的检测Kallmann综合征位于X染色体p22.3基因KAL-1外显子的突变。方法KAL-1基因外显子突变应用聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)技术分析。结果5例Kallmann综合征患者KAL-1基因外显子突变情况,发现2例KAL-1基因外显子5~10缺失。结论Kallmann综合征可能存在KAL-1基因外显子的缺失。 展开更多
关键词 KALLMANN综合征 聚合反应 单链构象 KAL-1基因 突变
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聚合酶链反应—单链构象多态性分析与反向杂交法进行骨髓移植… 被引量:1
11
作者 云升 王申五 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第11期567-569,共3页
用聚合酶链反应(PCR),扩增骨髓移植(BMT)受者及78例无关供者HLA-DPB1基因,作单链构象多态性(SSCP)分析,初步选出与受者HLA-DPB1SSCP带型相同者;最后进行反向杂交检测,确定HLA-DPB1... 用聚合酶链反应(PCR),扩增骨髓移植(BMT)受者及78例无关供者HLA-DPB1基因,作单链构象多态性(SSCP)分析,初步选出与受者HLA-DPB1SSCP带型相同者;最后进行反向杂交检测,确定HLA-DPB1更为相容的供者。应用上述技术,从78例无关供者中选择出1例与BMT受者基因相同的供者。整个过程快速、经济、准确性高。 展开更多
关键词 聚合反应 单链构象 骨髓移植
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多聚酶链反应-单链构象多态性分析基因点突变
12
作者 汪渊 朱光能 +4 位作者 左莉 储兵 卜丽佳 周青 桂淑玉 《安徽医科大学学报》 CAS 2004年第4期321-323,共3页
关键词 多聚反应 单链构象多态性分析 基因点突变 P53突变
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聚合酶链反应-单链构型多态性检测细胞壁缺陷型淋病奈瑟菌cppB基因变异 被引量:2
13
作者 魏荣旋 王和 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2003年第6期329-330,共2页
目的 :检测与分析淋病奈瑟菌 L 型的 cpp B基因 ,探讨细胞壁缺陷对淋病奈瑟菌 cpp B基因的影响。方法 :用青霉素诱导淋病奈瑟菌成为 L 型并获得稳定 L 型纯培养物 ,用 cpp B基因特异性引物以聚合酶链反应 (PCR)检测稳定 L型纯培养物的 c... 目的 :检测与分析淋病奈瑟菌 L 型的 cpp B基因 ,探讨细胞壁缺陷对淋病奈瑟菌 cpp B基因的影响。方法 :用青霉素诱导淋病奈瑟菌成为 L 型并获得稳定 L 型纯培养物 ,用 cpp B基因特异性引物以聚合酶链反应 (PCR)检测稳定 L型纯培养物的 cpp B基因和进行单链构型多态性 (SSCP)分析。结果 :淋病奈瑟菌的细菌型及其 L型都具有 cpp B基因扩增产物 ,但 PCR-SSCP分析可见异常泳动 DNA带型 (细菌型有 2条带、L型有 3条带 )。结论 :细胞壁缺陷淋病奈瑟菌仍然具有 cpp B基因 。 展开更多
关键词 SSCP 淋病奈瑟菌L型 cppB基因 聚合反应-单链构型多态性检测 细胞壁缺陷型
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聚合酶链反应与限制性片段长度多态性分析检测沙门菌
14
作者 姚玉霞 丛斌 华文凤 《河北医科大学学报》 CAS 2002年第3期177-178,共2页
关键词 聚合反应 限制性片段长度 多态性分析 检测 沙门菌 沙门氏菌属
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聚合酶链反应—单链构型多态性研究进展
15
作者 崔文 范连杰 +1 位作者 王旭 张波 《济宁医学院学报》 2000年第4期60-61,共2页
关键词 聚合反应 基因突变 多态性研究 单链 肿瘤性 临床医学 多基因 DNA重组 DNA序列 生命科学
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应用聚合酶链反应-单链构型多态分析和银染法检测胰腺癌组织K-Ras基因突变
16
作者 吴伍林 詹文华 《岭南现代临床外科》 1996年第3期159-160,共2页
用聚合酶链反应—单链构型多态分析(PCR-SSCP)和银染技术检测了29例胰腺癌、8例胰岛细胞瘤和9例慢性胰腺炎石蜡包埋组织标本中K-Ras基因外显子1,发现有17例胰腺癌标本存在突变,突变率为58.6%,而无1例胰岛细胞瘤及慢性胰腺炎标本发生突... 用聚合酶链反应—单链构型多态分析(PCR-SSCP)和银染技术检测了29例胰腺癌、8例胰岛细胞瘤和9例慢性胰腺炎石蜡包埋组织标本中K-Ras基因外显子1,发现有17例胰腺癌标本存在突变,突变率为58.6%,而无1例胰岛细胞瘤及慢性胰腺炎标本发生突变。胰腺癌标本突变率与肿瘤分化程度、病人的性别及年龄无关,提示胰腺癌普遍存在K-Ras基因突变,检测此突变对胰腺癌的鉴别诊断有一定临床意义。PCR-SSCP银染方法简便、快速,可广泛用于基因突变的检测。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 RAS基因 突变 聚合反应 单链构型多态分析 银染色法
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银染单链构象多态性分析──一种快速检测基因点突变的新方法 被引量:7
17
作者 王东 史景泉 +1 位作者 罗元辉 鲁荣 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期150-151,共2页
银染单链构象多态性分析──一种快速检测基因点突变的新方法Silverstainsinglestrandconformationpolymorphism──Arapidandsimplemethodtodetectge... 银染单链构象多态性分析──一种快速检测基因点突变的新方法Silverstainsinglestrandconformationpolymorphism──Arapidandsimplemethodtodetectgenepointmutations王... 展开更多
关键词 银染技术 基因 聚合反应 单链构象 多态性
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临床常见病原菌16S rDNA单链构象多态性分析 被引量:2
18
作者 温杰 刘毅 +1 位作者 崔奕文 何军 《检验医学》 CAS 北大核心 2005年第5期409-413,共5页
目的原核生物的rRNA基因位点具有高度的保守性,同时不同种属细菌之间又存在相对稳定的变异性,因此可被用于细菌的分类和鉴定。本研究试图利用16SrRNA基因结合分子生物学方法,达到快速鉴定临床常见病原菌的目的。方法收集临床常见各种病... 目的原核生物的rRNA基因位点具有高度的保守性,同时不同种属细菌之间又存在相对稳定的变异性,因此可被用于细菌的分类和鉴定。本研究试图利用16SrRNA基因结合分子生物学方法,达到快速鉴定临床常见病原菌的目的。方法收集临床常见各种病原菌333株,筛选2对通用引物在5′端用不同荧光标记,然后对细菌基因组DNA进行聚合酶链反应(PCR)扩增,产物在测序仪上通过毛细管电泳-单链构象多态性(CE-SSCP)分析,通过不同细菌的峰谱不同达到快速鉴定病原菌目的。结果所有受试细菌经过CE-SSCP分析后都有各自不同的峰谱出现,相互之间容易区别。结论利用PCR-CE-SSCP作为病原菌鉴定手段,高效、准确,较传统方法省时,而且灵敏度较高,是一种很有应用前景的细菌快速鉴定方法。 展开更多
关键词 16S RRNA基因 病原菌 聚合反应 毛细管电泳 单链构象多态性
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HLA-A、B、C基因第二外显子的单链构象多态性分析及骨髓移植受供者基因配型 被引量:1
19
作者 李丹 刘海燕 +2 位作者 于妍 王申五 陆道培 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期96-100,共5页
用与HLA-A、B、C座位第二外显子两末端稳定部位互补的,对引物扩增基因组DNA得到HLA-A、B、C三座位的第二外显子包含高变区在内的196bp片断,进行单链构象多态性分析。以此检测HLA-Ⅰ类基因多态性的一致性,为20例骨髓移植供受者对配型,其... 用与HLA-A、B、C座位第二外显子两末端稳定部位互补的,对引物扩增基因组DNA得到HLA-A、B、C三座位的第二外显子包含高变区在内的196bp片断,进行单链构象多态性分析。以此检测HLA-Ⅰ类基因多态性的一致性,为20例骨髓移植供受者对配型,其中11对相合,9对不合。与其它配型结果比较表明,HLA-Ⅰ类基因的聚合酶链反应一单链构象多态性(PCR-SSCP)配型在区分同胞供受者Ⅰ类抗原多态性上有较高的灵敏度。 展开更多
关键词 聚合反应 单链构象多态性 HLA-Ⅰ类基因
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丙型肝炎病毒5’非编码区PCR产物单链构象多态性分析及序列测定 被引量:1
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作者 王春杰 王文亮 +3 位作者 逯好英 徐东刚 孟庆华 谢文 《第四军医大学学报》 1997年第3期250-253,共4页
目的:研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒(HCV)5'非编码区变异情况.方法:收集10例慢性肝炎病人及4例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织,检测抗HCV抗体阳性,进行HCV5'非编码区RNA的逆转录... 目的:研究慢性肝炎病人血清、肝细胞肝癌组织中丙型肝炎病毒(HCV)5'非编码区变异情况.方法:收集10例慢性肝炎病人及4例肝细胞肝癌病人血清和肝细胞肝癌组织,检测抗HCV抗体阳性,进行HCV5'非编码区RNA的逆转录PCR扩增,PCR产物进行单链构象多态性分析,并对部分病例序列进行测定.结果:6例慢性肝炎病人血清及3例肝细胞肝癌组织中检测到HCVRNA,单链构象多态性分析显示各例条带之间无明显差异,对1例肝细胞肝癌组织中HCV5'非编码区cDNAPCR产物的序列测定表明它与HCV-1的同源性为97.3%,与HCV-BK的同源性为97.7%.结论:我们的结果提示在西安地区HCV5'非编码区几乎是一样的,并进一步证实不同地区HCV5'非编码区的高度保守性. 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 聚合反应 单链构象多态性
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