聚合酶链反应结合非放射性标记探针检测粪便中微小隐孢子虫

目的：利用非放射性标记探针技术检测经聚合酶链反应扩增后的人粪便中微小隐孢子虫ＤＮＡ，观察该方法的特异性和敏感性。方法：用裂解法从粪便标本直接制备微小隐孢子虫模板ＤＮＡ，用一对人工合成的寡核苷酸作ＰＣＲ引物，扩增长度为４５２ｂｐ的微小隐孢子虫目的ＤＮＡ片段。将扩增产物直接点在或经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法转移到硝酸纤维素膜上，再和生物素标记的寡核苷酸探针杂交，经底物（ＢＣＩＰ）呈色观察。结果：阳性杂交信号只见于微小隐孢子虫ＤＮＡ扩增产物，而约氏疟原虫、杜氏利什曼原虫、贾第虫、白色念珠菌、大肠杆菌和人白细胞ＤＮＡ均无杂交信号。ＰＣＲ结合斑点杂交或Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹法检测隐孢子虫ＤＮＡ的敏感性均为０．１ｐｇ。结论：非放射性探针检测人粪便隐孢子虫ＤＮＡ的ＰＣＲ扩增产物，具有敏感性高、特异性强、操作较简便及无放射性污染等优点。

不同亚型T细胞淋巴瘤与EB病毒的关系

目的 :探讨不同组织学类型T细胞淋巴瘤 (TCL)与EBV感染的关系。方法 :对 83例 (6种类型 )TCL进行研究 ,包括低度恶性 30例 (其中小多形 2 1例、小淋巴细胞性 9例 ) ,高度恶性 5 3例 (其中大 /中多形 31例、淋巴母细胞性 9例、间变性大细胞性 7例、透明细胞性 6例 )。采用PCR检测EBV特征性的DNA序列 (EBV DNA)和ISH法检测EBV编码的RNA(EBER 1/2 )。结果 :每种类型TCL均有EBV的阳性表达 ,低度恶性组与高度恶性组之间EBER 1/ 2表达率差别有显著性 (P <0 0 5 )。结论 :各种类型TCL的发生发展均与EBV感染有关 ,但高度恶性组EBER 1/ 2的表达比低度恶性组更显著。