测定地克珠利混悬液中的聚山梨酯20含量和枸橼酸含量的方法

利用反相高效液相色谱法和蒸发光检测器快速便捷地测定地克珠利混悬液中聚山梨酯20和枸橼酸的成分及含量。吐温20方法:HPLC条件,Thermo U3000。流速:0.5 mL/min。流动相A:水,流动相B:乙腈。用梯度洗脱。ELSD 6000,漂移管温度:115℃。气体流速:2 L/min,稀释剂:乙腈。枸橼酸方法:橼酸的色谱条件:色谱柱:Tech Mate ST C18250 mm×4.6 mm,5μm,流动相:A;20 mmol磷酸氢二钠(用磷酸调节pH至3.0)B:色谱甲醇。流动相A∶B=95∶5。流速:1.0 mL/min,柱温:30℃紫外检测波长:UV 210 nm。该方法经过验证,有较好的精密度,线性及回收率等验证结果。该方法可以实现准确的定量分析,可作为一个可靠的检测方法。

聚山梨酯80中24种金属元素的测定及分析评价

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定聚山梨酯80中24种元素含量,并进行分析评价。方法:采用ICP-MS法进行测定,通过SPSS 26软件进行统计分析,参考ICH Q3D进行元素杂质风险评估。结果:各元素在对应浓度范围内线性关系良好(r=0.997~0.999);回收率88.81%~134.64%(RSD<5%,n=6);样品中建议评估的元素均未超过推荐控制阈值。结论:该方法准确可靠、操作方便,品种整体元素杂质风险较低。

聚山梨酯指纹图谱建立及成分鉴定

目的 建立聚山梨酯的超高效合相色谱(UPCC)指纹图谱并指认其成分。方法 采用超高效合相色谱质谱联用(UPCC-MS)法。MS条件,离子化模式为ESI^(+);雾化气温度为500℃、流速为800 L/h,源温度为120℃,毛细管电压为2.5 kV,锥孔电压为40 V,采集模式为MS^(E),扫描范围m/z 50~3 000;UPCC条件,色谱柱为ACQUITY UPC^(2)Torus Diol柱(100 mm×3.0 mm,1.7μm),流动相为CO_(2)-甲醇/乙腈(30∶70,V/V),离子化溶剂为甲醇+5 mmol/L甲酸铵(流速为0.2 mL/min),梯度洗脱,流速为1.0 mL/min,柱温为50℃,背压为2 500 psi,进样量为1μL。测定12批不同来源的聚山梨酯80样品及其美国药典(USP)标准品的UPCC图谱,采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012.130723版)进行相似度评价,确定共有峰,计算相似度,并指认成分。结果 样品的UPCC图谱有22个共有峰,均指认出具体成分,相似度为0.884~0.966;经验证,样品UPCC图谱与对照指纹图谱一致性较好。结论 建立的UPCC-MS法可快速分离聚山梨酯中的复杂组分,所建UPCC指纹图谱可用于聚山梨酯批间一致性的快速分析。

基于基因毒性和对单抗聚集影响的聚山梨酯中醛限度的控制

通过建立HPLC柱前衍生化法对不同厂家的聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛、乙醛进行检测分析,并在不同条件下监测甲醛和乙醛对阿达木单抗聚集的影响,分别从基因毒性杂质控制和对单抗制剂稳定性影响两方面综合考量,初步得出二者的控制限度。HPLC柱前衍生化法采用2,4-二硝基苯肼(2,4-DNPH)作为衍生化试剂,以乙腈和水为流动相,在C_(8)(4.6 mm×150 mm,5μm)色谱柱上梯度洗脱进行分离,检测波长为360 nm,用外标法定量。方法学验证结果表明,该方法适用于聚山梨酯80和聚山梨酯20中微量甲醛和乙醛的定量分析。对不同厂家不同批次的聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛或乙醛的检测分析表明二者含量差异较大,聚山梨酯80中甲醛和乙醛含量明显高于聚山梨酯20;用分子排阻色谱法对经甲醛和乙醛处理的阿达木单抗分子聚集体变化进行监测后发现,甲醛对阿达木聚集的影响显著高于乙醛。按照《人用药品注册技术国际协调会议指南:诱变性杂质评估和控制》(ICHM7)的要求从风险评估的角度计算单抗制剂用聚山梨酯80和聚山梨酯20中甲醛和乙醛的杂质限度,结合对单抗聚集稳定性的影响,给出其中甲醛和乙醛初步的限度建议为:分别不得过7μg/g和765μg/g。

聚山梨酯80及其配制的鱼腥草注射液致Beagle犬类过敏反应实验研究

目的评价多种聚山梨酯80及其配制的鱼腥草注射液静脉给药对Beagle犬的致敏性。方法 Beagle犬是类过敏反应的敏感动物,以动物反应症状与血浆组胺升高为判断标准,综合判定类过敏反应。Beagle犬随机分为18组,每组3只,分别静脉注射不同厂家0.25%、0.10%、0.05%浓度的聚山梨酯80灭菌水溶液,或分别含0.25%、0.30%不同厂家聚山梨酯80的鱼腥草注射液。给药体积10mL/kg,前肢静脉恒速注射(速度5mL/min)。观察给药前至给药后24h每只犬的变化,记录症状出现、消失时间,并根据反应症状的轻重判定级别。给药前及停药后10min取血,ELISA方法检测血浆组胺含量,并结合反应症状级别,综合判定致敏性。结果各厂家、各浓度(0.05%、0.10%、0.25%)聚山梨酯80灭菌液以及各组鱼腥草注射液,均未导致Beagle犬出现典型的类过敏反应症状及血浆组胺升高1倍以上。综合判定,各组受试液均未诱发Beagle犬出现典型的类过敏反应。结论控制聚山梨酯80质量,并将使用浓度限定在0.30%或0.25%以下,可以在保证药物增溶效果的同时避免类过敏反应的发生。

SEC-ELSD法测定中药注射液中聚山梨酯80的含量

目的:建立测定中药注射液中聚山梨酯80含量的分子排阻-蒸发光散射(SEC—ELSD)方法。方法:采用 TSKgel G2000SW_(XL)色谱柱(7.8 mm×30 cm,5μm),以20 mmoL·L^(-1)醋酸铵-乙腈(90∶10)为流动相,流速:0.6 mL·min^(-1);柱温:30℃;蒸发光散射器的漂移管温度:110℃,氮气流速:2.3 L·min^(-1)。结果:聚山梨酯80浓度在1～20mg·mL^(-1)范围内呈良好的对数线性关系,r=0.9968;鱼腥草注射液、新鱼腥草素钠注射液及柴胡注射液的平均加样回收率(n=9)分别为101.1%,100.5%,99.6%。结论:该方法专属、准确,适用于测定鱼腥草注射液、新鱼腥草素钠注射液、柴胡注射液中聚山梨酯80的含量。

药用注射辅料聚山梨酯80诱发类过敏反应的细胞研究

目的:观察聚山梨酯80诱导大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞株RBL-2 H3细胞脱颗粒现象,探讨其诱发类过敏反应的可能机制。方法:聚山梨酯80与RBL-2 H3细胞共同孵育60 min后,透射电镜观察细胞发生脱颗粒反应的形态学变化,荧光显微镜下观察细胞膜磷脂酰丝氨酸与Annexin V结合变化,分光光度法测定细胞上清液β-氨基己糖苷酶释放百分率,并通过阿利新蓝染色试验进行定性观察。结果:不同浓度聚山梨酯80可诱导细胞发生典型的脱颗粒反应形态学变化,与阴性对照组相比脱颗粒率及组胺释放率显著升高,且具有浓度依赖性。结论:聚山梨酯80单次、首次给药即可诱导RBL-2 H3细胞脱颗粒,释放组胺,诱发类过敏反应,这可能是其临床首次用药即引起严重不良反应的机制之一。

聚山梨酯80和卵磷脂在化学药微生物限度检查时的中和作用

目的:为有抑菌性的化学药提供中和剂,降低其抑菌性,建立方便有效的微生物限度检查方法。方法:对化学药微生物限度检查方法学验证中抑菌性较强的药品,通过在稀释液中添加适量聚山梨酯80和蛋黄卵磷脂进行微生物限度检查方法学验证,并对比结果。结果:3%聚山梨酯80%、0.3%蛋黄卵磷脂不会对微生物造成损伤,且可降低化学药品的抑菌性,满足2005年版中国药典微生物限度检查方法学验证实验的要求。结论:3%聚山梨酯80%、0.3%蛋黄卵磷脂可在化学药的微生物限度检查中作为中和剂,降低药品的抑菌性。

药用辅料聚山梨酯80(吐温80)质量状况分析

目的考察我国目前药用辅料聚山梨酯80的质量状况。方法通过对全国10家药用辅料聚山梨酯80的抽样、检验和探索性研究,探讨聚山梨酯80质量差异及注射剂中致敏性较强原因。结果对药用辅料聚山梨酯80存在的质量问题提出建议与对策。结论应进一步规范吐温80在注射剂中的使用。

聚山梨酯80质量标准的分析比较

目的:通过评价现行各国药典中聚山梨酯80的质量标准及相关文献,为进一步提高聚山梨酯80标准提供参考。方法:对美国药典、欧洲药典、英国药典、日本药典和《中国药典》中聚山梨酯80的质量标准进行了分析讨论,并对几项主要指标,如过氧化值、脂肪酸组成、环氧乙烷与二氧六环等的测定方法和限度进行了分析比较。过氧化值,日本药局方没有要求,其余四国药典要求一样,不得过10.0;脂肪酸组成,《中国药典》和日本药局方没有要求,美国药典、欧洲药典和英国药典的检测方法和限度完全相同;环氧乙烷与二氧六环,《中国药典》的检测要求达到欧美标准。结果与结论:提出了提高聚山梨酯80质量的方法和建议,为生产高质量的聚山梨酯80以及制定注射用聚山梨酯80的质量标准提供参考。

聚山梨酯80在微生物限度检查中的应用

目的:对有抑菌性或非水溶性的药品提供适宜的供试液制备方法,建立方便有效的微生物限度检查方法。方法:应用聚山梨酯80的中和、乳化、增溶及保护微生物等作用,对本院配制的11种制剂进行供试液的制备及微生物限度检查验证。结果:加菌回收率及控制菌检查结果符合《中国药典》的要求。结论:聚山梨酯80可用于上述药品微生物限度检查时供试液的制备。

PEG6000、聚山梨酯80增加尼群地平溶出度的研究

采用熔融法 ,用PEG6 0 0 0 (聚乙二醇 6 0 0 0 )与聚山梨酯 80为混合载体制备尼群地平固体分散体 ,经X 射线粉末衍射、差热分析和扫描电镜显微摄像得知 ,尼群地平以细微结晶充分分散在混合载体中 ,形成低共熔物。试验结果表明 ,混合载体的溶出度数倍于PEG6 0 0 0单一载体。本文筛选的尼群地平固体分散体为稳定体系 ,其溶出度约为物理混合物的 7倍 ,用其制备固体分散片剂工艺可行。

不同生产工艺聚山梨酯80的Beagle犬类过敏反应研究

目的研究新工艺和传统工艺生产的聚山梨酯80对Beagle犬产生的类过敏反应,为聚山梨酯80的质量控制和临床安全合理用药提供参考。方法使用Beagle犬单次静脉注射新工艺和传统工艺生产的聚山梨酯80各3个批次。观察给药后动物的反应症状,并检测血浆中的组胺含量。结果新工艺生产的聚山梨酯80引起的动物行为学症状反应评分和组胺水平均明显低于传统工艺生产的聚山梨酯80。结论使用新的生产工艺,提高聚山梨酯80的质量,能够在一定程度上降低聚山梨酯80引发的类过敏反应。

聚山梨酯80组分与其溶血性的关系

研究聚山梨酯80(Tween 80)的溶血不良反应与其成分的母体结构间的关系。Tween 80合成第一步中可能会产生3种相关母核结构:山梨醇、一失水山梨醇酐和二失水异山梨醇酐。经与油酸酯化、聚氧乙烯化后形成多成分混合物。本文通过质谱法以及溶血性考察对单一母核合成物山梨醇聚氧乙烯油酸酯(polyoxyethylene sorbitol oleate,POS)和异山梨醇酐聚氧乙烯油酸酯(polyoxyethylene isosorbide oleate,POI)进行了成分和溶血性比较。结果证明:山梨醇聚氧乙烯油酸酯具有极低的溶血不良反应,而异山梨醇酐聚氧乙烯油酸酯具有极高的溶血性。同时,萃取法进一步证明上述结果的正确性。

聚山梨酯80的分析方法研究进展

随着聚山梨酯80在药物制剂中广泛使用,其安全性与用量成为影响药品安全性的关键,其含量测定的方法也成为研究的热点。由于聚山梨酯80分子结构中具有3个支链,各支链长度具有不确定性,使其测定困难。本文综述了聚山梨酯80的各种测定方法。

注射用聚山梨酯80的杂质、安全性问题与可能的出路

聚山梨酯80则是注射剂,特别是中药注射剂最常用的表面活性剂,常用于难溶性药物的增溶。近年来随着注射剂的安全性问题层出不穷,该辅料自然也难辞其咎,因此本文结合了文献调研和本课题组基础实验的研究,对聚山梨酯80的基本性状及化学结构、合成路线、杂质、导致的不良反应及毒理研究等进行整理和论述,最终提出去除大分子杂质有望使该辅料更安全。

顶空气相色谱法测定聚山梨酯-80中的溶剂残留

目的建立顶空气相色谱法测定聚山梨酯-80中的4种溶剂残留。方法采用气相色谱法,色谱柱为Agilent DB-624毛细管柱,以正丁醇为内标定量。结果三氯甲烷的线性范围为6.73～1 346μg/mL,二氯甲烷的线性范围为6.34～1 268μg/mL,乙二醇的线性范围为3.30～660μg/mL,二甘醇的线性范围为1.87～374μg/mL。三氯甲烷、二氯甲烷、乙二醇、二甘醇残留的最低检测限分别为2.02、1.90、0.009 9、0.005 7μg/mL。结论该方法可有效的同时检测出三氯甲烷、二氯甲烷、乙二醇、二甘醇4种残留溶剂方法灵敏、准确、专属性强。

差示扫描量热法评价聚山梨酯80质量

目的研究差示扫描量热法(differential scanning calorimetry,DSC)作为聚山梨酯80质量评价方法的可行性。方法采用DSC对8个不同品牌的聚山梨酯80进行表征,分析DSC图谱中熔点和峰型;采用酶标法测定聚山梨酯80对家兔体外溶血的影响;采用肌酸激酶(creatine kinase,CK)试剂盒测定聚山梨酯80对L6细胞的刺激性。结果同一品牌同一批聚山梨酯80熔点相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)在5%以内,重复性良好。DSC热分析图具有较好的灵敏度,可甄别批次间成分存在的一定差异。DSC热分析图的差异和品质有直接的相关性,不同品牌的聚山梨酯80呈现差异较大的热分析图,表明这些样品成分差异较大,这一结果得到了体外溶血性和骨骼肌刺激性实验结果的证实。结论 DSC技术可以作为聚山梨酯80质量评价的一种半定量方法。

比色法测定鱼腥草注射液中聚山梨酯80含量

目的:建立比色法测定鱼腥草注射液中聚山梨酯80的含量,以控制其质量及安全性。方法:依据聚山梨酯80中的聚乙氧基和铵钴硫氰酸盐反应形成蓝色复合物,可溶于二氯甲烷,用比色法测定聚山梨酯80含量。结果:聚山梨酯80在1.2129～6.0646mg内与吸光度呈良好的线性关系,其线性方程为A=0.1647C+0.0011,r=0.9998,回收率为100.79%,RSD为1.38%(n=9)。结论:该方法简单易行,准确稳定,专属性强,可用于鱼腥草注射液的质量控制。

GC法同时测定聚山梨酯80中5种挥发性杂质

目的建立气相色谱法对聚山梨酯80中的环氧乙烷、二氧六环、氯乙醇、乙二醇和二甘醇5种挥发性杂质进行同时检测。方法采用气相色谱法,色谱柱固定相为PEG20000（GsBP-INOWAX,30m×0.53mm×1.0μm弹性石英毛细管柱）。采用程序升温,初温50℃,以5℃·min^-1升温至200℃,保持10min,再以50℃·min^-1升温至230℃,保持20min。进样口温度为200℃,检测器温度为250℃。结果同时测定了聚山梨酯80中环氧乙烷、二氧六环、氯乙醇、乙二醇和二甘醇5种挥发性杂质,线性范围分别为2.7-176.8μg·mL^-1（r=0.999 8）,2.8-140.7μg·mL^-1（r=0.999 8）,3.4-167.5μg·mL^-1（r=0.999 9）,4.7-2 345μg·mL^-1（r=0.999 8）和3.2-160.8μg·mL^-1（r=0.999 9）;平均加样回收率分别为104.3%,91.3%,105.2%,94.1%和105.7%,RSD分别为2.5%,2.8%,1.4%,3.0%和3.7%。结论该方法灵敏、准确,可用于聚山梨酯80中挥发性杂质的检测。