低强度体外冲击波/脉冲式超声波治疗勃起功能障碍中国专家共识

勃起功能障碍(ED)是成年男性的常见病和多发病,目前国内外ED诊疗指南推荐的口服药物、阴茎海绵体内血管活性药物注射和阴茎假体植入等治疗方案均不能针对ED病因,故无法从纠正发病机制方面彻底治愈ED。低强度体外冲击波疗法(Li-ESWT)和低强度脉冲式超声波(LIPUS)治疗ED,因其独特的作用机制和生物学效应,不仅能够改善患者的勃起功能,亦能针对病因治疗,促进阴茎功能康复。然而,目前临床上存在Li-ESWT和LIPUS治疗ED适应证不明确、治疗方案不统一、疗效差异大等问题,限制了该类疗法的进一步应用。据此,中国性学会组织本领域内多位临床专家,根据现有的Li-ESWT和LIPUS治疗ED的国内外循证医学证据,经共同研究、讨论达成一致,制定了本共识,旨在为从事Li-ESWT及LIPUS治疗ED领域的临床医生、设备研发人员提供规范的治疗方法和参考。

低强度脉冲式超声波治疗勃起功能障碍的研究进展

勃起功能障碍(ED)是由多种因素导致的一种男性常见病、多发病,随着对ED病理学、生理学机制研究的深入,在该疾病治疗上也有了突破性进展。低强度脉冲式超声波(LiPUS)是微能量医学在转化医学领域的一种重要形式,经过长期的基础与临床研究,其机制和有效性及安全性得到了初步证实,不仅可以改善ED患者阴茎海绵体的病理学损伤,也为器质性ED的物理治疗拓展了新思路。本文围绕LiPUS治疗ED的基础及临床研究中具有代表性和开创性的研究结果,特别是机械生物力学领域的研究进展进行综述。

聚焦式低强度脉冲超声波在膝骨关节炎治疗中的应用研究进展

聚焦式低强度脉冲超声波(focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS)作为一种无创的物理治疗方法,广泛应用于骨科、神经外科、泌尿外科和康复医学科等临床专科。越来越多的研究发现FLIPUS可以通过促进组织再生、缓解疼痛与抑制炎症等机制来治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA),改善KOA的常见临床症状,如关节疼痛或僵硬、关节活动受限和步行功能下降,且能在一定程度上提高患者的生活质量。该文主要就FLIPUS治疗KOA的作用和生物物理机制以及相关临床研究作一综述,旨在为开展这方面研究的临床工作者提供参考。

低强度脉冲式超声波对糖尿病高危足患者临床症状改善及下肢血管血流流速的影响

探讨低强度脉冲式超声波对糖尿病高危足患者临床症状改善及下肢血管血流流速的影响。方法 予以2022-6~2023-6南宁市第六人民医院64例糖尿病高危足患者开展治疗,常规治疗(比对组32例)与在常规治疗基础上,开展低强度脉冲式超声波(干预组32例):比较不同方案治疗效果差异。结果 干预组疗效高于比对组,P<0.05。两组在治疗安全性方面比较,水平相当,无差异性P>0.05。治疗前,两组临床症状积分与下肢血管血流流速比较,水平相当,无差异性P>0.05。治疗后,干预组踝肱指数、平均血流速度高于比对组,在临床症状积分、搏动指数、阻力指数低于比对组,P<0.05。结论 糖尿病高危足发病率持续性提升,采用低强度脉冲式超声波治疗可改善临床症状,抑制病情进展,且调节下肢血管血流流速,疗效显著且满足临床治疗需求,值得推广与运用。

聚焦式低强度脉冲超声联合富血小板血浆局部注射修复大鼠面神经损伤效果观察

目的观察聚焦式低强度脉冲超声(FLIPUS)联合富血小板血浆(PRP)局部注射对大鼠面神经损伤的修复效果。方法将20只健康雄性SD大鼠随机分为模型组、PRP组、FLIPUS组及PRP+FLIPUS组,每组5只。各组均建立右侧面神经损伤模型,PRP组于神经损伤处局部注射PRP 50μL,2次/周;FLIPUS组于神经损伤处进行FLIPUS治疗10 min,1次/天;PRP+FLIPUS组参照上法给予PRP局部注射及FLIPUS治疗;模型组不予特殊处理;各组疗程均为28 d。各组术后1~4周每周进行行为学评估,记录胡须运动和瞬目反射评分。各组术前及术后第28天,使用肌电诱发电位仪行右侧面神经电生理检查,记录损伤面神经的最大复合肌肉动作电位(CMAP)振幅并计算R值。各组大鼠处死后取损伤面神经节段组织,HE染色后进行组织病理学观察,同时记录单位面积的轴突数量、直径及面积。结果各组大鼠术后1~4周瞬目反射及胡须运动评分比较P均>0.05。与同组术前比较,各组大鼠术后损伤面神经的最大CMAP振幅均降低(P均<0.05)。与模型组比较,PRP组、FLIPUS组及PRP+FLIPUS组大鼠术后损伤面神经的最大CMAP振幅及R值均升高(P均<0.05),PRP组、FLIPUS组及PRP+FLIPUS组比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与模型组比较,PRP组、FLIPUS组及PRP+FLIPUS组神经束变性、脱髓鞘及轴突空泡化程度减轻,再生轴突增多且神经纤维排列更有序。与模型组比较,PRP组、FLIPUS组及PRP+FLIPUS组大鼠损伤面神经节段组织单位面积内的轴突数量均升高(P均<0.05);PRP组大鼠损伤面神经节段组织单位面积内的轴突直径、轴突面积均高于模型组、FLIPUS组、PRP+FLIPUS组(P均<0.05)。结论FLIPUS联合PRP局部注射对大鼠面神经损伤的修复作用不优于二者单独应用。

低强度脉冲超声波对髁突软骨细胞炎症状态的作用研究

目的 观察低强度脉冲超声波对白介素-1β制造的大鼠髁突软骨细胞炎症模型中MAPK信号通路相关因子磷酸化的表达变化。方法 二次酶消化法分离髁突软骨细胞并完成鉴定。将分离出的大鼠髁突软骨细胞随机分为3组,加入3种不同浓度的IL-1β处理并进行Ⅱ型胶原与MMP-13免疫细胞化学染色,筛选出最佳致炎浓度。再次将所提取的大鼠髁突软骨细胞随机分为3组:NC组、OA组、LIPUS组,处理后对Ⅱ型胶原、p38、p-p38、ERK1/2、pERK1/2进行免疫细胞化学染色,观察蛋白表达情况。结果(1)成功提取大鼠髁突软骨细胞。(2)IL-1β:10 ng/mL组Ⅱ型胶原表达量降低最明显,差异有统计学意义(P<0.05),MMP-13表达量升高最明显,差异有统计学意义(P<0.05)。(3)OA组与LIPUS组Ⅱ型胶原表达量均降低,差异有统计学意义(P<0.05),OA组降低更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。3组的p38、ERK1/2表达量无明显差异(P>0.05)。OA组与LIPUS组p-p38、p-ERK1/2表达量均升高,差异有统计学意义(P<0.05),OA组升高更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。结论(1)二次酶消化法成功提取大鼠髁突软骨细胞。(2)10 ng/mL为IL-1β最佳致炎浓度。(3)LIPUS处理可减少炎性髁突软骨细胞中Ⅱ型胶原的降解,抑制了MAPK通路相关因子p38、ERK1/2的磷酸化。

低强度脉冲式超声波治疗老年冠心病心绞痛患者的疗效及对心率变异性的影响

目的 探讨低强度脉冲式超声波(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)在老年冠心病心绞痛患者的应用效果及心率变异性(heart rate variability,HRV)的影响。方法 选取2021年11月至2022年9月山东大学齐鲁医院收治的老年冠心病心绞痛患者80例,应用SAS 9.4生成随机数字表法将80例患者分为超声组40例和对照组40例,两组患者均给予常规药物治疗,治疗组在此基础上辅以LIPUS治疗共计20次。比较治疗前后疗效、HRV指标及焦虑、抑郁、睡眠状态。结果 超声组和对照组患者基线临床资料比较,差异无统计学意义(P均>0.05)。超声组治疗前后比较,躯体活动受限程度、心绞痛稳定状态、心绞痛发作频率、治疗满意程度以及对疾病的认知程度5个维度及总分均提高,且提高水平显著优于对照组(P<0.05);对照组治疗前后比较心绞痛稳定状态得分以及总分提高,差异有统计学意义(P<0.05),躯体活动受限程度、心绞痛发作频率、治疗满意程度以及对疾病的认知程度差异无统计学意义(P>0.05)。超声组治疗后全部窦性心搏RR间期标准差(standard deviation of normal-to-normal intervals,SDNN)、相邻NN间期差值的均方根(root mean square of successive differences of NN intervals for period of interest,r MSSD)、相邻NN间期差异≥50ms的心搏百分数(percentage of adjacent NN intervals that differ from each other by larger than 50ms,PNN50)、低频功率(low frequency power,LF)和高频功率(high frequency power,HF)水平均升高,前述变化均显著优于对照组,对照组治疗后PNN50及HF均较前升高,以上指标差异均有统计学意义(P<0.05);对照组治疗后SDNN、相邻NN间期差值的均方根(root mean square of successive differences of NN intervals for period of interest,r MSSD)和LF较治疗前差异无统计学意义(P>0.05)。超声组治疗后汉密尔顿焦虑量表(Hamilton Anxiety Scale,HAMA)、抑郁自评量表(Self-Rating Depression Scale,SDS)、匹兹堡睡眠质量指数量表(Pittsburgh Sleep Quality Index,PSQI)得分均显著减少,其中HAMA评分改善程度显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 LIPUS治疗可显著改善冠心病心绞痛患者的心绞痛症状、HRV指标及焦虑状态,是老年冠心病心绞痛患者一项安全、有效的辅助治疗方法。

低强度脉冲式超声波治疗勃起功能障碍的疗效评价

目的探讨低强度脉冲式超声波(LIPUS)治疗男性勃起障碍(ED)的疗效。方法回顾性分析2020年6月—2022年6月在南京大学医学院附属鼓楼医院就诊的ED患者121例。根据IIEF-EF评分将ED患者分为轻(17~25分)、中(11~16分)、重(0~10分)三个亚组。分析LIPUS治疗前、治疗后4周和12周时三组的总有效率、勃起硬度评级(EHS)、性生活日记问题(SEP)、总体评估问卷(GAQ)、收缩期峰值流速(PSV)、舒张末期流速(EDV)和不良反应等指标。结果119例患者完成随访。治疗后第4、12周与治疗前相比,IIEF-EF评分及EHS情况均有明显提升(P<0.05)。LIPUS治疗后第4、12周总有效率分别为69.75%、76.47%,治疗后4、12周轻度和中度组患者的总有效率均显著高于重度组(P<0.05)。SEP2、SEP3回答“能”的患者在治疗4周时分别为91.60%、71.43%,治疗后第12周占比分别为92.44%、78.15%,均显著高于治疗前(52.10%、27.73%,P<0.05)。GAQl和GAQ2在治疗后第4周回答“有”的患者占比分别为84.87%、71.43%,治疗后第12周分别为82.35%、70.59%,治疗后2次随访比较差异无统计学意义。患者在治疗后12周PSV水平较治疗前升高[(48.85±14.11)cm/s vs.(41.42±14.90)cm/s],差异有统计学意义(P<0.05);治疗后12周EDV水平较治疗前降低[(-0.57±7.01)cm/s vs.(2.25±5.68)cm/s],差异有统计学意义(P<0.05)。结论LIPUS对于ED患者具有良好的治疗效果且无明显不良反应。

低强度脉冲聚焦超声对小鼠膝关节软骨细胞损伤中炎症因子和焦亡蛋白的影响

目的探讨低强度脉冲聚焦超声(FLIPUS)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠膝关节软骨细胞损伤中炎症因子和细胞焦亡相关蛋白表达的影响及其保护软骨的作用机制。方法提取C57BL/6J小鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,用1μg/mL LPS处理软骨细胞12 h模拟骨关节炎样软骨细胞损伤。细胞分为对照组(仅用含10%FBS的培养基培养,不予任何处理)、LPS组(LPS处理12 h)和LPS+FLIPUS组(LPS处理12 h后再用FLIPUS干预20 min)。采用蛋白质印迹法检测各组软骨细胞中Ⅱ型胶原蛋白α1(COL2α1)、炎症细胞因子(IL-18和IL-1β)、焦亡相关蛋白[核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NLRP3)、cleaved caspase 1、消皮素D N端片段(GSDMD-N)]、软骨基质降解因子[基质金属蛋白酶(MMP)13、MMP3和血小板结合蛋白基序的解聚蛋白样金属蛋白酶5(ADAMTS5)]的表达。采用钙黄绿素乙酰氧基甲酯(calcein AM)/PI荧光染色和乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测细胞活性,采用扫描电子显微镜观察细胞的形态变化,采用ELISA法检测细胞上清液中IL-1β、IL-18水平。结果成功提取小鼠膝关节原代软骨细胞并模拟骨关节炎样软骨细胞损伤。与对照组相比,LPS组小鼠膝关节软骨细胞中COL2α1蛋白表达降低(P<0.01),MMP13、MMP3、ADAMTS5、NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase 1、IL-18和IL-1β蛋白表达增加(均P<0.01),细胞上清液中IL-18、IL-1β水平升高和LDH释放增加(均P<0.01),细胞肿胀变形,细胞膜上出现较多孔隙,丧失完整性,细胞死亡率增加(P<0.01)。与LPS组相比,LPS+FLIPUS组小鼠膝关节软骨细胞中COL2α1蛋白表达上升(P<0.01),MMP13、MMP3、ADAMTS5、NLRP3、GSDMD-N、cleaved caspase 1、IL-18和IL-1β蛋白表达下降(P<0.05,P<0.01),细胞上清液中IL-18、IL-1β水平下降和LDH释放减少(P<0.05,P<0.01),细胞肿胀程度减轻,细胞膜上孔隙减少,细胞死亡率下降(P<0.05)。结论FLIPUS可能通过抑制炎症因子和细胞焦亡相关蛋白表达减轻LPS诱导的小鼠膝关节软骨细胞损伤。

低强度脉冲式超声波对小鼠骨髓来源巨噬细胞极化和吞脂能力的影响

目的:探究低强度脉冲式超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对巨噬细胞极化与吞脂能力的潜在影响及其相关分子机制。方法:采用胫骨骨髓灌注法提取小鼠骨髓来源的巨噬细胞,分别用不同强度(4.825、19.300、43.425 mW/cm^(2))的LIPUS对巨噬细胞进行辐照处理,再给予脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导巨噬细胞向M1型极化;采用流式细胞术检测巨噬细胞凋亡水平;CCK-8法检测巨噬细胞活性;热电偶测温技术检测LIPUS热效应;实时荧光定量PCR(qPCR)分析M1型巨噬细胞标志基因的mRNA水平;Western blot检测NF-κB/MAPK通路相关蛋白表达;采用荧光染料DiI标记的氧化低密度脂蛋白与巨噬细胞共同孵育6 h,荧光显微镜观察并计算巨噬细胞的脂滴吞噬效率。结果:流式细胞术和CCK-8结果表明,不同强度LIPUS辐照处理均未对巨噬细胞的凋亡和细胞活性产生影响;热电偶测温技术表明,温度变化稳定,未产生明显热效应。qPCR结果显示,与对照组相比,LPS能显著上调巨噬细胞M1表型基因的mRNA水平,而LIPUS辐照处理可下调LPS诱导的M1表型基因mRNA水平,差异具有统计学意义;脂滴吞噬染色结果显示,LPS能够增强巨噬细胞的吞脂作用,而LIPUS辐照处理能减弱LPS对巨噬细胞吞脂能力的促进作用,差异具有统计学意义;Western blot结果显示,LIPUS能够下调LPS诱导的NF-κB/MAPK通路蛋白水平,差异具有统计学意义。结论:LIPUS可能通过抑制LPS活化的NF-κB/MAPK通路阻止巨噬细胞向M1型极化以及减弱巨噬细胞的吞脂能力。

低强度脉冲式超声波上调细胞周期蛋白D1表达促进骨髓间充质干细胞增殖

背景:前期研究发现低强度脉冲式超声波可以促进人骨髓间充质干细胞增殖。目的:探讨FAK/PI3K/Akt信号通路在低强度脉冲式超声波促进人骨髓间充质干细胞增殖中的作用机制。方法:将购买的商品化人骨髓间充质干细胞复苏培养至第4代,分为0 mW/cm^(2)超声波组(对照组)、50 mW/cm^(2)超声波组、50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组,其中50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组在超声处理前加入1μL FAK/PI3K/Akt信号通路抑制剂PF-562271进行预处理。每隔24 h超声刺激1次,每次5 min,刺激3次后采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期变化,Western blot法检测FAK及其下游靶基因和细胞周期蛋白D1的表达。结果与结论:①与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组细胞增殖能力明显增强(P﹤0.05),使用PF-562271抑制FAK/PI3K/Akt信号通路后,细胞增殖能力明显降低(P﹤0.001);②与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组FAK、p-FAK、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt和细胞周期蛋白D1的表达均上调(P﹤0.05);与50 mW/cm^(2)超声波组相比,50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组上述指标明显降低(P﹤0.05);③与对照组相比,50 mW/cm^(2)超声波组G_(1)期细胞比例减少(P=0.026),S期细胞比例增多(P=0.002);与50 mW/cm^(2)超声波组相比,50 mW/cm^(2)超声波+PF-562271组G_(1)期细胞比例升高(P=0.023),S期细胞比例降低(P=0.035);④结果表明,低强度脉冲式超声波可能通过FAK/PI3K/Akt信号通路上调细胞周期蛋白D1促进人骨髓间充质干细胞的增殖。

低强度脉冲式超声波治疗糖尿病高危足疗效观察

目的观察低强度脉冲式超声波在糖尿病高危足治疗中的效果。方法选取2018年10月至2021年5月在上海市嘉定区中心医院就诊并住院治疗的60例糖尿病高危足患者作为研究对象,采用随机数表法分为对照组和观察组,每组30例。对照组患者给予糖尿病饮食及健康教育1周,并依据2017版糖尿病诊治指南给予降糖、降压、降脂、改善微循环及营养神经治疗,观察组患者在对照组治疗的基础上加用低强度脉冲式超声波(LIPUS)治疗,连续治疗1周。治疗结束后根据临床判断标准比较两组患者治疗前后的临床症状评分、踝肱指数(ABI)、趾肱指数(TBI)、经皮氧分压水平(TcPO_(2))和双下肢血管血流流速及不良反应。结果治疗1周后,两组患者的临床症状评分均明显低于治疗前,且观察组患者的临床症状评分明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者治疗后的疗效指数下降45.32%,明显优于对照组的26.12%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组患者的左肢ABI、TBI、TcPO2指标分别为1.12±0.15、1.09±0.14、(60.21±12.94)mmHg,明显高于对照组的1.02±0.11、0.96±0.26、(54.51±8.00)mm Hg,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的右肢ABI、TBI、TcPO2指标分别为1.09±0.12、1.11±0.15、(61.99±11.48)mmHg,明显高于对照组的1.02±0.17、0.99±0.25、(56.74±8.00)mm Hg,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后观察组患者的左、右肢足背动脉血流流速分别为(57.37±14.75)cm/s、(58.53±13.05)cm/s,明显高于对照组的(47.10±14.99)cm/s及(51.33±14.40)cm/s,差异均有统计学意义(P<0.05);两组患者均无不良事件发生,无其他不良反应或不适。结论采用低强度脉冲式超声波治疗糖尿病高危足疗效显著,不良反应低且安全性较好,具有良好的临床应用价值。

低强度脉冲聚焦超声上调Vimentin蛋白表达抑制软骨细胞凋亡

目的探讨低强度脉冲聚焦超声(focused low-intensity pulsed ultrasound,FLIPUS)通过机械效应抑制软骨细胞凋亡的分子机制。方法用胰蛋白酶联合Ⅱ型胶原酶提取C57BL/6J乳鼠膝关节原代软骨细胞进行体外实验,IL-1β处理细胞模拟骨关节炎样软骨细胞损伤并进行验证,同时检测不同处理时间下相关蛋白表达变化。细胞分为Control组、IL-1β组和IL-1β+FLIPUS组,流式细胞术检测各组软骨细胞凋亡率,细胞免疫荧光检测各组细胞中Vimentin的结构分布。Western blot检测各组Col2α1、MMP13、Bcl-2、Vimentin及p-Tyr397表达。结果提取软骨细胞并模拟了骨关节炎样软骨细胞损伤模型。与Control组相比,随着IL-1β处理时间的延长,Col2α1、Vimentin、p-Tyr397、Bcl-2和p-AKT蛋白表达降低(P<0.05),MMP13、Bax和cleaved-Caspase3蛋白表达升高(P<0.05)。与IL-1β组相比,IL-1β+FLIPUS组软骨细胞凋亡水平降低(P<0.001),MMP13表达下降(P<0.05);Col2α1(P<0.01)、Bcl-2、Vimentin及p-Tyr397表达上升(P<0.05);Vimentin排列分布发生重塑,荧光强度增加。结论FLIPUS上调软骨细胞Vimentin表达,促进FAK的Tyr397位点磷酸化,抑制软骨细胞凋亡。

低强度脉冲式超声波结合恒古骨伤愈合剂促进骨质疏松性桡骨远端骨折愈合的临床研究

【目的】探讨低强度脉冲式超声波(LIPU)刺激结合恒古骨伤愈合剂对骨质疏松性桡骨远端骨折愈合的促进作用。【方法】根据是否应用LIPU结合中药恒古骨伤愈合剂治疗,将90例新鲜骨质疏松性桡骨远端骨折患者分为观察组和对照组,每组各45例。2组患者均给予手法复位、夹板固定和康复锻炼,在此基础上,观察组患者给予LIPU及恒古骨伤愈合剂治疗,对照组未予LIPU及恒古骨伤愈合剂治疗,疗程为12周。每周对患者进行随访并拍摄X线片,比较2组患者术后X线片灰度值比值、骨折愈合情况、解剖学评分及患肢功能恢复情况。【结果】(1)治疗4周后,2组患者的X线片灰度值比值比较,差异无统计学意义(P>0.05);但治疗8周后和治疗12周后,观察组的X线片灰度值比值水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)治疗后,观察组患者的骨折愈合时间较对照组明显缩短,Gartland-Werley腕关节评分的优良率较对照组明显提高,差异均有统计学意义(P<0.05)。(3)末次随访时,观察组患者的掌倾角、尺偏角均较对照组大,差异均有统计学意义(P<0.05);而2组患者的桡骨高度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。【结论】LIPUS结合恒古骨伤愈合剂治疗骨质疏松性桡骨远端骨折疗效确切,可有效加速骨折愈合和局部骨形成,促进腕关节的功能恢复。

低强度脉冲超声波对Beagle犬Ⅱ度根分叉病变的辅助效应

背景:低强度脉冲超声波主要用于促进骨折愈合及提高新生骨组织密度,尚未见其对Ⅱ度根分叉病变组织学修复效应的报道。目的:观察低强度脉冲超声波对Ⅱ度根分叉病变的组织学修复效应。方法:5只Beagle犬各取2颗下颌第4前磨牙颊侧作为实验区,建立Ⅱ度根分叉病变模型,分别分为超声组和对照组并在颊侧缺损龈方根面制备切迹作为参照点,高糖饲养8周。超声组行根面平整术,术后1周行低强度脉冲超声波(90mW/cm21.5MHz,200μs,1kHz)处理20min/d,对照组行根面平整术和假处理。6周后取实验区域组织制备脱钙切片,苏木精伊红染色、Masson染色行根分叉区域组织测量分析。结果与结论:超声组根分叉区新生牙槽骨沿根面生长,根分叉区可见牙龈上皮;对照组根分叉区以结缔组织生长为主,可见大量牙龈上皮和少量新生骨组织。超声组新生牙槽骨胶原呈"红-蓝"相间,以红染为主;对照组呈现蓝染,即超声组的新生牙槽骨胶原较对照组成熟。超声组牙槽骨、牙骨质、牙周膜新生量均大于对照组(P<0.05)。提示90mW/cm2低强度脉冲超声波可促进根分叉病变新生牙槽骨胶原成熟和改建。

低强度脉冲超声波对早中期兔膝骨性关节炎软骨细胞外基质及MAPKs信号通路的影响

目的:研究低强度脉冲超声波(LIPUS)对早中期兔膝骨性关节炎(OA)软骨细胞外基质(ECM)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的影响,探讨LIPUS对关节软骨损伤修复和延缓退变的作用机制。方法:36只健康新西兰兔随机分成6组,早期对照组(EC组)、早期OA组(EO组)、早期治疗组(ET组)、中期对照组(MC组)、中期OA组(MO组)和中期治疗组(MT组),6只/组。EO、ET、MO及MT组均接受左后肢前交叉韧带切断术(ACLT),对照组仅接受左侧膝关节囊切开术。ET组和MT组分别于术后第3天和第5周起接受LIPUS治疗。超声频率3MHz,强度40mW/cm2,作用时间20min,1次/d,6d/周,持续6周。EO与MO组的LIPUS方案与治疗组相同,但无超声输出。LIDUS6周后,采用甲苯胺蓝染色进行关节软骨的组织学观察,并进行Mankin评分。采用免疫印迹法检测蛋白多糖、Ⅱ型胶原、磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)及p38(p-p38)的变化。结果:③组织学观察及Mankin评分:EO组关节软骨表面不规则、甲苯胺蓝染色变浅、软骨细胞减少,与EC组相比,Mankin评分显著升高(P<0.01);MO组关节软骨损伤明显,Mankin评分较MC组显著升高(P<0.01)。与EO组相比,ET组病理学改变程度轻,Mankin评分显著降低(P<0.01);但MT组Mankin评分较MO组无显著降低(P>0.05)。③Ⅱ型胶原、蛋白多糖检测:与EC组比较,EO组和ET组均下降,但EO组较ET组明显下降(P<0.05);与MC组相比,MO和MT组均显著降低(P<0.05),MO组与MT组间无显著差异(P>0.05)。③p-ERK1/2、p-p38检测:与EC组相比,EO组表达量显著升高(P<0.05),但与EO组相比,ET组显著降低(P<0.05);与MC组相比,MO组和MT组表达显著升高(P<0.05),MT组与MO组间无明显差异(P>0.05)。结论:LIPUS可以减轻关节软骨ECM的损伤程度,其作用与LIPUS治疗后关节软骨中p38、ERK1/2表达下调有关,这种作用与OA的病变阶段密切相关,即在OA早期进行LIPUS作用更明显。

低强度脉冲超声波对Beagle犬牙槽骨缺损的修复效应

目的利用低强度脉冲超声波(LIPUS)辐照Beagle犬下颌前磨牙水平型牙槽骨缺损模型,探讨其促进急性牙槽骨缺损修复的潜在效应。方法选用4只Beagle犬的下颌双侧第三、四前磨牙颊侧区,制备釉牙骨质界下6 mm深的水平型牙槽骨缺损模型。左右两侧随机分为实验组和对照组,实验组采用LIPUS辐照(ISATA 30 mW·cm-2,20 min·d-1),对照组为不开功率源的假辐照。辐照8周后,使用双能X线骨密度仪检测新生牙槽骨骨密度,脱钙骨组织切片观察新生牙槽骨的组织学效应。结果实验组与对照组新生牙槽骨骨密度分别为(0.605 3±0.056 6)g·cm-2、(0.604 7±0.055 2)g·cm-2,2组之间的差异无统计学意义(P=0.983 9)。脱钙骨组织切片苏木精-伊红染色显示实验组新生牙槽骨周边成骨细胞成排排列,数量较多,而对照组成骨细胞散在分布,数量少;Masson染色示实验组新生骨组织中胶原呈鲜红色,成熟度高,而对照组以蓝色为主,可见绿色区域,成熟度偏低。结论 LIPUS辐照对急性水平型牙槽骨缺损具有潜在的修复效应。

低强度脉冲超声波促进皮肤成纤维细胞增殖的实验研究

目的:研究不同辐照参数(频率、声强、辐照时间)低强度脉冲超声波(LIPUS)对成纤维细胞增殖的影响。方法:采用MTT法测定频率1MHz、1.2MHz、1.7MHz,每一频率下四种声强的LIPUS,同一声强分别辐照5min、10min、15min、20min和30min体外培养的人真皮成纤维细胞24h后的生长增殖情况,筛选出促进成纤维细胞生长的最适宜频率、声强和辐照时间。结果:①在MTT法测定细胞活性中三种频率(1MHz、1.2MHz、1.7MHz),每一频率下四种声强的LIPUS辐照成纤维细胞5min,24h后吸光光度值均增加,辐照成纤维细胞10min,24h后吸光光度值增加最高,较对照组都有显著性差异(P<0.01)。超过一定辐照时间后,吸光光度值下降,且随着辐照时间的延长,吸光光度值下降显著。②频率1MHz、声强0.1W/cm2、辐照时间10min下的细胞相对成活率最高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:不同频率、不同声强的LIPUS辐照一定时间均能促进人真皮成纤维细胞增殖,超过一定辐照时间则会抑制细胞生长。而频率1MHz、声强0.1W/cm2、辐照时间10min为促进成纤维细胞增殖较为适宜的辐照参数。

低强度脉冲超声波对体外培养的兔骨髓基质细胞成骨作用的影响

目的:研究低强度脉冲超声波(LIPUS)对体外培养的兔骨髓基质细胞(BMSCs)成骨能力的影响。方法:抽取新西兰白兔的骨髓,体外分离纯化获取BMSCs,加入条件培养基后随机分为实验组和对照组:实验组应用LIPUS对BMSCs每天作用20 min,对照组未予作用。通过倒置相差显微镜观察细胞增殖分化情况,分别于1、2、3周后停止LIPUS作用,应用碱性磷酸酶(ALP)和Von Kossa染色的方法鉴定细胞成骨性能。结果:BMSCs经LIPUS刺激后.细胞形态变大.核增大.核质比减小;而对照组细胞相对扁平.折光率降低。BMSCs经LIPUS刺激1、2、3周后,ALP活性均较对照组明显增高(P<0.05)。LIPUS刺激3周后,实验组钙结节像素值较对照组像素值明显增多(P<0.05)。结论:LIPUS能促进条件培养基中的BMSCs向成骨细胞转化。

碱性成纤维细胞生长因子在低强度脉冲超声波治疗骨折过程中的表达

目的 :探索低强度脉冲超声波 (LIPUS)在兔桡骨骨折愈合过程中碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的表达及分布情况 ,进而探讨LIPUS的作用机制。方法 :将 2 0只成年新西兰兔制作成双侧桡骨骨折模型。一侧桡骨接受每天 2 0min的LIPUS治疗 ,另一侧作为对照。术后 2、 3、 4、 5周分别处死动物。应用兔疫组化方法观察bFGF在骨痂标本中的分布。结果 :在骨折愈合早期的骨痂中 ,新生基质、未分化间充质细胞和骨细胞免疫组化染色阳性 ;而在成熟骨化的骨基质和分化末期的肥大的软骨细胞 ,染色阴性。同实验组相比 ,对照组阳性着色的细胞数及染色程度明显减弱。结论 :LIPUS可以通过增加bFGF的合成来促进骨折愈合。