共聚焦显微技术研究SA对蚕豆气孔保卫细胞的影响

水杨酸（salicylic acid,SA）作为植物体内一种内源性的信号分子,具有多种生理功能.实验表明水杨酸以浓度依赖的方式诱导气孔关闭,抑制气孔张开.20 U/mL的CAT与SA共同处理时可逆转SA诱导气孔关闭作用的83%～90%.以H2O2荧光探针H2DCFDA结合激光扫描共聚焦显微术直接检测到SA处理可引起保卫细胞内H2O2的产生;在保卫细胞内显微注射CAT可完全阻止SA导致的DCF荧光增强.表明SA诱导的气孔关闭可能与H2O2的产生有关.

激光扫瞄共聚焦显微技术实验教学的思考

开设激光共聚焦技术实验课，通过仪器演示和实验操作，帮助学生理解课堂的理论教学内容，了解和掌握这门新技术，为他们在未来科研工作中利用该技术进行科学研究奠定基础。

激光扫描共聚焦显微技术在中医药治疗脑血管疾病研究中的应用

脑血管疾病占我国人群死亡原因的第2位。脑血管疾病属于中医"中风"病,在中医药对脑血管疾病进行了长期深入研究过程中,筛选出了如灯盏花素、川芎等疗效明确的药物。为了阐明这些药物的作用机理和药效物质基础,具有三维成像和定量检测等功能的激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)在这方面的应用越来越广泛。本文首先介绍了LSCM的工作原理,然后总结了LSCM在药物作用前后脑部微循环、脑部细胞和脑部细胞内钙离子浓度变化等检测中的研究进展,认为LSCM在中医药研究脑血管疾病中还有很大的应用前景而且必将发挥出重大作用。

激光扫描共聚焦显微技术在农业科研领域中的应用

激光扫描共聚焦显微技术(Laser Scanning Confocal Microscope,LSCM)是当今世界上最先进的分子细胞生物学分析技术。LSCM能够进行三维重建、静态结构分析、活体细胞或组织功能的实时动态检测等,且能够获得较普通显微镜更高的空间分辨率。LSCM作为一项全新的实验手段和强有力的研究技术,近年来已在诸多领域显示出其强大的优势和生命力,将细胞水平研究的深度和广度大幅拓展。本文首次阐述了LSCM在农业科研领域中的应用,介绍其在作物育种、生长发育调控、植物保护、生物制药、食品加工和畜牧兽医等方面的应用。

浅谈共聚焦显微技术

共聚焦显微镜以其高对比度、高分辨率及可重建三维图像的独特优势,在生物医学研究、微细加工、半导体和高分子材料的生产检测等领域获得广泛应用。常用的共聚焦技术方法有:传统的激光扫描共聚焦显微镜(LSCM),其特点是获得的图像对比度和分辨率高,但需要逐点扫描,帧成像时间长,系统复杂,体积大,价格昂贵;碟片共聚焦显微镜(SDCM)是采用多光束扫描的方法来获得共聚焦图像,速度可以大大提高,但牺牲了共聚焦图像的分辨率,系统更为复杂,且不能调整轴向分辨率;结构光显微镜(SIM)具有方法简单,可模块化设计,成本低,成像质量接近于激光扫描共聚焦显微镜,成像速度快,性价比较高。

基于激光共聚焦显微技术鉴别小麦矮腥黑穗病菌和光腥黑穗病菌

由小麦矮腥黑穗病菌(Tilletia controversa Kühn)引起的小麦矮腥黑穗病和由小麦光腥黑穗病菌[Tilletia foetida(Walle.)Lindr]引起的小麦光腥黑穗病都是世界性的病害,小麦矮腥黑穗病是一种重要的国际检疫性病害,是麦类黑穗病中危害最大、极难防治的检疫性病害之一,小麦光星黑穗病在我国被列为北京市的检疫对象。采用激光共聚焦显微技术结合染色方法可简便快速区分小麦矮腥黑穗病菌和小麦光腥黑穗病菌,2种病原菌的冬孢子壁分别呈绿色网纹荧光及均匀平滑绿色荧光,检测可在5~7 min完成,为快速区分2种病原菌的冬孢子提供了一种新的方法。

激光共聚焦显微技术多元化教学实践探讨——基于开放共享背景

激光共聚焦显微镜是使用率极高的大型精密仪器,开放使用势在必行。在开放共享背景下,加强开放实验室管理,尤其是加强用户的教学培训已成为一项重要的核心工作。以打牢专业理论基础、加强运用操作技能为目标,构建和实践探索了以课程教学、上机培训为主,技术讲座与专题报告、见习观摩教学、微信学习交流等为辅的多层次、多形式的教学培训体系,为广大师生双向的教与学及开放实验室管理提供参考。

激光共聚焦显微技术在共定位应用中的常见问题

荧光共定位分析是当今生物显微成像中一个极为常见的技术。本文从以下4个方面详细介绍了使用Zeiss LSM880型激光扫描共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscope,CLSM)进行共定位研究时常见的问题及解决方法:1.如何用共聚焦进行共定位实验;2.如何进行共定位分析;3.如何评价共定位;4.如何判定共定位结果。在共定位研究中,只要按照共定位实验的基本要求拍摄图像,并按照上述方法进行分析,便可得到准确可靠的共定位分析结果。

应用激光共聚焦显微技术检测镉对植物根系生长的影响

为了能简单、直观、无损伤地检测重金属镉(Cd)对植物的毒害作用,应用激光共聚焦显微技术,以植物光照培养箱中的拟南芥组培苗为材料,探讨0、50、75、100、200μmol/L Cd Cl2浓度对拟南芥幼根生长的影响。结果表明,随着Cd处理浓度的增大,拟南芥组培苗幼根的生长受到明显抑制,特别是Cd浓度≥75μmol/L时,根长明显变短,根细胞中累积的活性氧(ROS)和钙离子(Ca^(2+))也逐渐增多,而根细胞活性有所下降。进一步研究发现Ca^(2+)螯合剂可减轻ROS的积累,而ROS清除剂对于Ca^(2+)的增加影响明显,表明植株在遭遇镉胁迫时,根部ROS与Ca^(2+)积累存在着一定的互作关系。该技术能有效研究重金属对植物生长发育的毒害,为进一步揭示重金属的毒害机理提供理论基础。

基于激光扫描共聚焦显微技术的烤烟叶面组织粗糙度参比样研究和应用

为量化表征初烤烟叶面组织粗糙度,选用玉溪烟区K326品种为试验材料,采用感官分析技术与激光扫描共聚焦显微技术相结合的方法,对符合粗糙度参比样原则的样品进行筛选分档和感官分析,观测初烤烟叶面的微观形貌和粗糙度参数(Sa),并应用心理物理学定律验证参比样的合理性,最后探讨不同烤烟品种中部烟的叶面组织粗糙度差异。结果表明:烟叶表面存在大量的嵴状隆起区域,根据隆起程度可将粗糙度分为细腻、较细腻、稍细腻、中等、稍粗糙、较粗糙和粗糙7个档次,其粗糙度参数(X)分别为2.95、3.60、4.54、5.56、6.67、8.26、10.34μm。粗糙度感官标度值的自然对数(Y)与仪器测量值Sa的自然对数之间存在线性关系:Y=1.85 X-1.37(r^2=0.89),符合心理物理学定律。中烟100叶面组织粗糙度最大,翠碧1号叶面组织粗糙度最小且叶表面隆起有直径41.26μm、高16.83μm的中空圆柱体结构。

共聚焦显微技术简介

共聚焦显微镜在生物学研究中得到广泛应用。共聚焦显微技术按照显微镜构造原理的不同分成激光扫描共聚焦和数字共聚焦显微技术两种。共聚焦技术具有成像清晰、获得三维图像、进行多标记观察、活细胞内动态生理反应的实时观察记录、定性定量分析等优势。与共聚焦显微技术相关的技术有荧光染料的选择、荧光指示剂装载以及图像数据处理等。

显微共聚焦激光拉曼光谱技术鉴别假币上的光变油墨

目的尝试利用显微共聚焦激光拉曼光谱技术鉴别假币上的仿冒光变油墨。方法收集77张不同假币制造窝点不同印刷版型的假币,建立最佳实验条件,将所得谱图进行小波变换降噪、非对称最小二乘法基线扣除、数据归一化等一系列预处理,提取出每张假币上光变油墨所包含的拉曼位移峰信息。结果拉曼谱图中拉曼位移峰与色料成分有关,由此可将假币上的仿光变油墨分为三类:一类检出酞菁铜颜料,一类检出酞菁铜和钛菁绿两种颜料,一类则未检出拉曼位移峰。由于假币纸张选用的不同,造成拉曼谱图中部分拉曼位移及荧光背底的差异,故如果结合纸张影响,可将第一类假币票样分为五大类。结论显微共聚焦激光拉曼光谱技术不但可以通过拉曼位移的不同鉴别假币,且可根据拉曼位移及强度进一步推断造假手段的差异,为假币溯源提供依据。

激光共聚焦显微镜观察前胡丙素对新生大鼠缺氧再灌注心肌细胞内游离钙的影响

目的激光共聚焦显微镜观察缺氧再灌注损伤对心肌细胞内Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,以及前胡丙素对模拟心肌缺氧再灌注过程中减轻钙超载的作用。方法采用SD大鼠乳鼠进行心肌细胞培养,建立模拟缺氧再灌注模型。实验分4组:正常组:细胞正常培养;缺氧预适应组:预先缺氧2 h,复氧1 h,再缺氧12 h后,复氧2 h;前胡丙素预处理组:先予前胡丙素单体终浓度为100μmol/L作用1 h,再行缺氧12 h,后复氧2 h;模拟缺氧再灌注组缺氧12 h,后复氧2 h。细胞上清检测LDH值。心肌细胞以Fluo-3/AM荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术检测心肌细胞([Ca2+]i)变化。结果模拟缺氧再灌注组心肌细胞([Ca2+]i)荧光强度值显著高于前胡丙素预处理组及缺氧预适应组(P<0.01),前胡丙素预处理组与缺氧预适应组细胞内荧光强度无明显组间差异。结论心肌细胞缺氧再灌注损伤导致Ca2+超载,而前胡丙素有明显减轻心肌细胞模拟缺氧再灌注时Ca2+超载的作用。应用激光扫描共聚焦显微镜技术可以直观地进行细胞内钙离子研究。

光学显微成像技术在液-液相分离研究中的应用

近十年来,科学家们发现液-液相分离在许多生理过程中扮演重要角色,发挥着许多生物学功能。一旦发生异常,将会导致多种疾病产生。在生物学研究中,光学显微成像技术是液-液相分离主要的研究工具之一。本文阐述了几个重要的光学显微成像技术在液-液相分离的研究中的应用和对比,以观察相分离的存在和形成等过程。详细地阐述了运用共聚焦显微技术中的荧光漂白后恢复技术(FRAP)检测其扩散和物质交换的特性,并总结了应用该技术时的成像条件、注意事项和参数应用,为科学研究者提供技术选择的依据。

基于双螺旋点扩散函数工程的多焦点图像扫描显微

在传统共聚焦显微技术的基础上,图像扫描显微技术使用面阵探测器来代替单点探测器,结合虚拟数字针孔并利用像素重定位和解卷积图像重构算法将传统宽场显微镜的分辨率提高一倍,实现了高信噪比的超分辨共焦成像.但是,由于采用逐点扫描的方式,三维成像速度相对较慢,限制了其在活体样品成像中的应用.为了进一步提高图像扫描显微术的成像速度,本文提出了一种基于双螺旋点扩散函数工程的多焦点图像扫描显微成像方法和系统.在照明光路中,利用高速数字微镜器件产生周期分布的聚焦点阵对样品进行并行激发和快速二维扫描;在探测光路中,利用双螺旋相位片将激发点荧光信号的强度分布转换为双螺旋的形式;最终,利用后期数字重聚焦处理,从单次样品扫描数据中重构出多个样品层的超分辨宽场图像.在此基础上,利用搭建的系统分别对纤维状肌动蛋白和海拉细胞线粒体进行成像实验,证明了该方法的超分辨能力和快速三维成像能力.

2013年全国电子显微学会议及征文通知（第三轮）

2013年全国电子显微学年会于10月19—25日在重庆市召开。 本届年会将设立电子显微学及其在材料科学中的应用分会场；球差电子显微学分会场；原位电子显微学分会场；扫描电子显微学＋EBSD分会场；扫描谱学分会场；生命科学分会场。由共聚焦专业委员会组织的第三届全国激光共聚焦显微技术一理论与应用学术交流研讨会将以会中会形式在重庆与年会同期召开。

2013年全国电子显微学会议及征文通知（第三轮）

2013年全国电子显微学年会于10月19—25日在重庆市召开。本届年会将设立电子显微学及其在材料科学中的应用分会场；球差电子显微学分会场；原位电子显微学分会场；扫描电子显微学＋EBSD分会场；扫描谱学分会场；生命科学分会场。由共聚焦专业委员会组织的第三届全国激光共聚焦显微技术一理论与应用学术交流研讨会将以会中会形式在重庆与年会同期召开。一。