半夏种茎的薄层等电聚焦电泳鉴别

目的:研究半夏种茎的薄层等电聚焦电泳鉴别方法。方法:对不同产地成熟期和发芽期半夏种茎进行蛋白质圆盘IEF电泳和薄层IEF电泳图谱的比较。结果:不同产地发芽期半夏种茎的蛋白质圆盘IEF电泳图谱有一定差别,但同一产地半夏发芽期的圆盘IEF电泳图谱相同;成熟期和发芽期半夏的薄层IEF的谱带基本一致,只是浓度略有差别。结论:薄层IEF电泳的分辨率较高,不同产地半夏种茎的薄层IEF电泳图谱较为稳定,可用于半夏种茎的真实性鉴定。

用液相等电聚焦电泳纯化藻蓝蛋白亚基

以纯藻蓝蛋白(C-phycocyan in,C-PC)为材料,采用Rotofor系统进行液相等电聚焦(L iqu id-phase iso-eletric focusing,LP-IEF)电泳纯化C-PC的α,β亚基,探讨蛋白质亚基纯化的制备电泳(Preparative eletro-phoresis)技术.结果显示,样品经2次等电聚焦电泳后,C-PC的α,β亚基分别浓集在pH=4.9和pH=4.1附近,平板超薄等电聚焦(Slab u ltra th in IEF)和SDS-PAGE电泳鉴定表明分别为高纯度的C-PCα,β亚基.提示LP-IEF是分离纯化等电点差异蛋白质活性亚基的简便有效的方法.

全柱成像毛细管等电聚焦电泳分析蛋白质药物电荷异质性

评价了cIEF-WCID检测多肽与蛋白质药物等电点的应用效果。测定标准多肽的等电点,验证了cIEF-WCID具有高的准确度和良好的重复性(相对标准偏差<0.50%)。人血红蛋白的4种主要异构体实现了基线分离;甘赖胰岛素的重复测试均只检出单一特征峰(p I 5.95±0.01);比较重组人生长激素原液和成品,等电点特征峰比例差异明显,且成品有新特征峰出现;对比进口及国产贝伐单抗,发现厂家1、3与原研药基本一致,厂家1的主成分迁移规律与原研药高度一致,厂家2的重链C末端K缺失、N末端焦谷氨酸环化或脱酰胺修饰影响了电荷异质性;通过考察尿素浓度、电解质范围和聚焦时间,优化了检测重组人促卵泡素等电点条件:2 mol/L尿素,两性电解质pH 2.5~5.0与pH 3.0~10.0按1∶1混合,聚焦电压1 000 V(1 min)~1 800 V(4 min)~2 200 V(1 min)。cIEF-WCID可快速、准确测定具有电荷异质性的蛋白类药物等电点,分辨率和重复性好,尤其是可以跟踪聚焦过程中样本的迁移特征,特别适合蛋白类药物复杂电荷异质性的检测。

优化等电聚焦电泳方法评价重组人红细胞生成素质量

目的对等电聚焦电泳(IEF)分析方法进行优化,以更好地评价重组人红细胞生成素(rHuEPO)产品的质量。方法用优化的IEF方法分析rHuEPO异构体分布,同时参照rHuEPO的体内外生物学活性和唾液酸含量结果,综合评判rHuEPO的质量。结果建立的优化等电聚焦电泳方法分析rHuEPO,图谱清晰,检测结果可靠。结论IEF方法的优化为rHuEPO的质量控制提供了快捷,准确的手段。

液相等电聚焦电泳纯化燕窝蛋白质

以市售燕窝为材料,采用MicroRotofor系统进行液相等电聚焦电泳(liquid-phase isoelectric focusing,LIEF)纯化燕窝蛋白质,等电聚焦电泳后对收集到10个小室的样品进行SDS凝胶电泳分析。结果显示,燕窝蛋白质提取液中的一些胶状物聚集在聚焦槽酸端第1～4样品室,第9、10样品室杂质也较多,合并第5～8样品室的样品,即得纯化后的燕窝蛋白用于后续双向电泳分析。液相等电聚焦电泳预分离纯化技术结合双向电泳技术,对4个燕窝蛋白质进行较好的分离,在2-DE胶上检测到约30～60个蛋白质点。由此可见,液相等电聚焦电泳预分离技术是燕窝蛋白质进行2-DE分离前的重要纯化手段。

超薄等电聚焦电泳技术在水稻品种鉴定上的运用

利用超薄等电聚焦电泳技术对 2 0个水稻品种进行了鉴定 ,发现 19条蛋白质带在不同品种间表现出多态性。利用这 19条蛋白质带和种子外观形态上的差异 ,可将 2 0个品种中的 11个品种完全区分开 ,另外 9个品种可分为两组。

超薄层等电聚焦电泳技术检验燕麦种子的真实性

利用种子醇溶蛋白超薄层等电聚焦电泳(UTL IEF)技术对青海和河北省燕麦属(A vena spp)16个品种真实性进行了比较分析。结果表明,参试样品的种子醇溶蛋白UTL IEF电泳图谱共分离出34条不同迁移率的谱带;依据蛋白电泳图谱等电点(P I值)为4.8、6.55、6.9、7.7、8.4和8.6等位置谱带的有无以及数目,可鉴别16个参试样品中的13个样品;对同一样品的整粒种子、1/2粒和1/4粒种子,以及人工老化处理获得的同一样品不同发芽率的种子进行超薄层等电聚焦电泳,结果表明破损程度到1/2粒种子和不同生活力种子甚至死种子对电泳鉴定结果基本没有影响。

大白菜一代杂种及双亲幼苗的等电聚焦电泳过氧化物同工酶分析

等电聚焦电泳是近些年发展起来的分离蛋白质的有效生化技术．操作简便，分辨率高，电泳条带多而且细，信息量大，利于进行深入细致的研究。该文利用等电聚焦丙烯酰胺电泳方法分析了6个大白菜一代杂种及双亲幼苗的过氧化物同工酶电泳图谱，共分离出十几条酶带，F1杂种与亲本间同工酶图谱均表现出明现差异，特别是A鉴别区内的酶带差异最明显，大多为互补型，是主要鉴别区。进一步研究结果表明，6个大白菜品种均可利用过氧化物同工酶鉴别由自交引起的假杂种。利用这项技术大量开展了这6个品种的商品种子纯度检测工作，同时在田间进行了验证性测定，二者结果基本相符。

中药青葙子、土鳖虫的等电聚焦电泳研究

应用等电聚焦电泳（isoelectricfocusingelectrophoresis简称IFE）技术，对果实种子类中药育葙子CelosiaargenteaL．和动物类中药土鳖虫EupolyphagasinensisWalk进行IFE研究。结果表明，清晰的电泳港带既可作为鉴别药物纯度及真伪的依据，也可用于确定药物样品所含主要蛋白质成分的等电PH，从而为中药材及其制剂的生产、贮藏提供定量参考数据。

桃水溶性蛋白质等电聚焦电泳分析初报

对不同 pH 范围的两性载体电解质(Ampholine)进行等电聚焦(IEF)电泳,能获得不同的水溶性蛋白质谱型.结果表明:1.桃大多数器官酸性蛋白质含量丰富,宜选用pH3.5—7.0的 Ampholine 进行 IEF 电泳.2.桃不同器官水溶性蛋白质谱型差异显著.宜用花药、幼叶、叶柄、花瓣作为 IEF 电泳的主要分析器官;成熟叶、萼筒、种子作为辅助分析器官.3.萼筒和花瓣水溶性蛋白质谱型可鉴别黄肉桃、白肉桃两类品种,而花瓣谱型亦能区分桃大花、小花两种类型.

毛细管柱表面鸡卵清蛋白快速改性并用于等电聚焦电泳分离蛋白质

开发了一种利用鸡卵清蛋白改性毛细管柱内表面的快速方法。改性后的毛细管柱可避免蛋白质样品的吸附作用 ,在较温和的条件下 ,柱性能有很好的稳定性 。

基于超薄等电聚焦电泳技术的杂交水稻种子纯度鉴定

为评价超薄等电聚焦电泳技术鉴定杂交水稻种子纯度的准确性;分别利用超薄等电聚焦电泳技术和田间小区种植技术鉴定杂交水稻64S×G67F1种子纯度,比较两者的吻合程度。结果表明:用超薄等电聚焦电泳技术鉴定的种子纯度和大田种植鉴定的纯度完全吻合;说明超薄等电聚焦电泳技术鉴定杂交水稻种子纯度结果准确可靠。

应用等电聚焦电泳测定玉米种子的纯度

应用灵敏度、分辨率和重复性均较高的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦(IEF)电泳测定150多种玉米自交系和90多种玉米杂交种的胚及幼芽的酯酶(EST)同工酶,通过对酶谱的比较和遗传分析,发现它们的酶谱各有特点,而且相互间又有很显著的差异,这些差异正是它们基因型差异的反映。因此,酶谱的特点及差异为玉米自交系和玉米杂交种种子纯度的鉴定从遗传和生化角度提供了科学依据。

种子蛋白质超薄等电聚焦电泳鉴定杂交水稻种子纯度的准确性初探

分别用超薄等电聚焦电泳技术和田间小区种植技术鉴定杂交水稻64S×EP431 F_1种子纯度和比较两者吻合程度的结果表明:这两种方法鉴定的纯度完全吻合。显示超薄等电聚焦电泳技术可用于鉴定杂交水稻种子纯度。

毛细管等电聚焦电泳技术进展

介绍了毛细管等电聚焦电泳(CIEF)技术的发展和现状,特别对载体两性电解质、柱内表面处理和检测技术等方面的最新进展加以系统评述,并且对CIEF的定性能力、峰容量、重现性及其在生命科学方面的应用前景进行了讨论。引用文献59篇。

薄层聚丙烯酰胺等电聚焦电泳鉴定肝脏同工铁蛋白的研究

作者应用高分辨率的蛋白质分析技术——薄层等电聚焦电泳对肝脏同工铁蛋白进行了鉴定和分析研究。结果表明:Wistar大鼠、正常人及肝细胞性肝癌病人的肝脏同工铁蛋白电泳区带分别为7、6、3三条;等电点分别为5.76～4.75、5.80～4.85、4.50～4.43,肝细胞性肝癌病人肝脏同工铁蛋白的等电点明显偏酸。

红细胞酸性磷酸酶聚丙烯酰胺等电聚焦电泳分型研究及其在上海地区的分布频率

红细胞酸性磷酸酶(EAP)已被广泛地应用于法医学个人识别中,它具有六种不同的遗传表现型:A、BA、B、CA、CB、C,受控于2号染色体上的三个共显性等位基因Pa、Pb、Pc、中国人群中至今尚未见有 C、CA 和 CB 型的报道。