多孔聚(甲基丙烯酸环氧丙酯-二乙烯基苯)微球的改性及作为蛋白质疏水层析介质的应用

用悬浮聚合方法合成了富含环氧基团的多孔聚（甲基丙烯酸环氧丙酯-二乙烯基苯）[Poly（Glycidyl ethacrylate-Divinylbenzene），P（GMA-DVB）]微球，为了消除其对蛋白质的不可逆吸附，探索用聚乙二醇（Polyethylene lycol，PEG）对微球进行改性，制备了带有PEG配基的P（OMA-DVB）微球．实验考察了反应条件对PEG固载量的影响规律，发现最适反应温度为80℃．以牛血清白蛋白（Bovine Serum Albumin,BSA）和胰蛋白酶作为模型蛋白，考察了PEG改性前后P（OMA-DVB）微球对蛋白质的吸附性能．改性前P（OMA-DVB）微球有30％～40％的不可逆吸附，蛋白质回收率仅为60%～70％．改性后介质消除了不可逆吸附，对蛋白质的吸附作用表现为可逆的疏水相互作用，吸附BSA和胰蛋白酶的质量回收率和活性回收率都在97％以上．结果表明，PEG-P（GMA—DVB）微球可以作为一种新型介质进一步应用于蛋白质的吸附与分离．

基于PGMA磁微球的纳米机械免疫传感器的片上磁分离

应用具有磁性和抗体双重靶向功能的聚甲基丙烯酸环氧丙酯磁微球,设计出新型微悬臂梁式免疫传感器,借助微平面电感线圈,实现在液相环境中,加电流时磁微球吸附,去电流时磁性微球解析并重新分布,解决传统微悬臂梁式免疫传感器的不足.着重研究片上磁分离机理,梁上微电感线圈结构,微磁场对磁微球的吸引,设计并优化出满足新型微悬臂梁式免疫传感器所需线长200μm、宽10μm、线间距厚10μm、1μm的钛金材料蛇形微平面电感线圈.通过生物磁分离实验,验证了设计及优化的结果,实现了用于生物分子分离的片上磁分离技术.

亚2微米聚合物微球的合成及影响因素

采用分散聚合法合成了粒径为0．8μm的聚苯乙烯种子，再通过一步溶胀法制备了亚2μm甲基丙烯酸环氧丙酯微球。研究了溶胀倍数、稀释剂比例、聚合温度、搅拌速度以及致孔剂等因素对溶胀、聚合过程和最终产物形态、结构的影响。结果表明，在控制溶胀倍数为8～16，SDS 0．1％，PVA 0．5％、溶胀和聚合物温度分别为30～35℃以及70～74℃。聚合时间为18～24h、搅拌速度为120～200r／min的条件下可合成出粒径为1．8μm的单分散甲基丙烯酸环氧丙酯微球、分散系数为0．2。而且，无孔亚2μm聚合物微球比多孔聚合物微球具有更好的耐压性，最高耐压力可以达到28MPa。

溶菌酶分子印迹聚合物的制备及其色谱评价

以单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球作为基质载体,溶菌酶为模板分子,β-环糊精和丙烯酰胺为复合单体,N,N′-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂,采用表面印迹法制备了溶菌酶分子印迹聚合物;以此聚合物为固定相进行前沿色谱分析和识别性能研究.结果表明,该分子印迹聚合物对模板分子溶菌酶具有特异识别能力,基于此可以分别实现溶菌酶与牛血清白蛋白、卵白蛋白及肌红蛋白的色谱分离.

亚氨基二乙酸键合的亲水单分散聚合物基质离子色谱填料的制备及应用

以自合成的5.0μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA-EDMA)微球为基质,与亚氨基二乙酸键合,合成了亲水性阳离子色谱固定相。用3.5 mmol/L甲烷磺酸作淋洗液,在流速为1.0 m L/min下,对二乙醇胺、Na+、NH4+、K+混合样及有机胺和铵离子混合样进行分离。将其用于黄纸板中阳离子的分离测定,与原子吸收法(AAS)对照,测定结果基本一致。

一种分离抗凝血酶Ⅲ的高效亲和色谱填料的制备及表征

以聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球 ( PGMA)为基质 ,利用还原氨化方法将肝素键合在其表面上 ,得到一种以肝素为配基的高效亲和色谱填料 ,该填料对抗凝血酶 的亲和容量为 1 .2 mg/g,对抗凝血酶 和人血清白蛋白的回收率分别为 96.9%和 94 .4 % .利用前沿色谱法测定了肝素与抗凝血酶 之间的表观解离常数为 1 .96× 1 0 - 5mol/L.

单分散大孔亲水弱阳离子交换填料的制备及其对鱼精蛋白的分离纯化

以自制的5.0μm单分散大孔亲水交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA/EDMA)微球为基质,对其表面进行化学改性,合成弱阳离子交换色谱填料(WCX)。详细考察了该填料对标准蛋白质的分离性能、表面亲水性能、稳定性和重现性以及流速对蛋白保留的影响。实验结果表明,该色谱填料对蛋白的分离性能、重现性及稳定性良好;在流速为3mL/min时,采用线性梯度洗脱,6min内可分离4种标准碱性蛋白质,以溶菌酶测定的该填料的动力学吸附容量为29.86mg/g。将其用于鱼精蛋白的分离纯化,经反相高效液相色谱测定纯化后鱼精蛋白的纯度为99.2%;与商品Shodex IEC SP-825强阳离子交换色谱柱比较,纯化结果几乎一样。

单分散树脂孔径分布影响因素及其凝胶渗透色谱性能的研究

探讨了以一步种子溶胀聚合法合成单分散交联聚甲基丙烯酸环氧丙酯微球(PGMA/EDMA)的成孔机理,首次详细研究了交联度、小分子致孔剂、高分子致孔剂等因素对PGMA/EDMA微球孔径分布的影响,利用凝胶渗透色谱表征了其孔结构及分布.将优化合成的孔径分布范围较宽的PGMA/EDMA微球用于分离5种标准聚苯乙烯样品,均取得了较好的效果.

高亲水性强阳离子交换色谱填料的制备及其在蛋白质分析中的应用

以具有双孔结构的聚甲基丙烯酸环氧丙酯(PGMA)微球为基质,以葡萄糖进行表面亲水改性,制备了强阳离子交换色谱填料,并将其用于复杂生命体系中生物大分子的快速而高效的分离、分析与纯化。葡萄糖亲水改性增进了填料的生物相容性,提高了蛋白质样品的回收率;双孔结构及较高的比表面积赋予填料良好的柱渗透性和样品负载量。以标准蛋白质为样品,考察了该填料对生物样品的分离性能。以100 mm×4.6 mm的色谱柱分离4种蛋白质,在6 min内实现了基线分离;以溶菌酶为样品,填料的吸附容量为39.5 g/L,在蛋白质快速分离纯化分析中显示了良好的应用前景。