聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙的细胞生物相容性研究

目的:采用骨髓基质细胞检测聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙(PLGATCP)材料的细胞生物相容性,筛选细胞组织工程的载体材料。方法:利用骨髓基质细胞在体外接种于PLGA/TCP材料,并与PLGA/TCP材料浸提液共培养,进行形态学观察、细胞增殖及酶学检测。结果:骨髓基质细胞能在PLGA/TCP材料上贴附、繁殖,其生长及功能不受影响。结论PLGA/TCP材料具有良好的细胞生物相容性,能作为细胞组织工程种子细胞的载体材料。

改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸复合骨髓基质干细胞修复兔桡骨缺损

背景:前期试验证实骨髓基质干细胞能够在改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸材料表面黏附、增殖,该材料具有良好的生物安全性。目的:观察骨髓基质干细胞与改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸材料复合修复兔桡骨缺损的效果。方法:建立兔15mm桡骨缺损模型,随机分为3组:空白对照组不进行任何处理,实验组植入改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸+骨髓基质干细胞组织工程化骨,对照组植入单纯改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸支架材料。结果与结论:①X射线评价:术后1～12周,实验组骨缺损修复程度及速度明显优于空白对照组与对照组(P<0.05)。②组织学检测:实验组术后4周即可观察到新生骨和纤维组织长入材料空隙,局部形成陷窝结构;8周时新生骨组织增多,部分可观察到成熟的骨小梁结构;12周时可见大量成熟骨细胞,骨小梁排列紧密,移植材料逐步被新生骨取代,与正常骨组织形态基本一致,且骨小梁出现时间早于空白对照组与对照组。说明骨髓基质干细胞复合改性纳米羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸构建的组织工程化骨能够促进骨缺损处新骨的生成,较单纯支架材料具有明显优势。

快速成型聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架修复兔桡骨缺损

背景:理想的骨修复材料除必须具有生物相容性、可吸收性、利于血管化及迅速被新生组织替代的孔隙率,还需要有与骨组织相似三维结构。目的:检验快速成型工艺制作的聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架复合骨形态发生蛋白修复兔桡骨缺损的效果。方法:将乳酸乙醇酸共聚物溶于1,4-二氧六环中并混合粉末状磷酸三钙制备成液态的浆料,放入生物材料快速成形机TissFormTM制备出直径5mm,长15mm的圆柱形人工骨载体材料。按每个材料15mg的标准,采用预湿、负压复合骨形态发生蛋白、冻干3步处理,制备出活性人工骨材料。健康新西兰大白兔20只,制备右前肢桡骨中上段15mm骨缺损模型,实验组和对照组分别植入复合骨形态发生蛋白的活性人工骨和未复合骨形态发生蛋白的单纯支架。通过影像学、组织学、材料降解及骨密度评价修复兔桡骨缺损的效果。结果与结论:12周时实验组骨缺损愈合,新生骨痂连接缺损断端并塑形,支架材料近于完全降解,各检测指标与对照组比较差异均有显著性意义,对照组骨缺损内未见新骨形成。结果表明复合骨形态发生蛋白的聚乳酸-聚羟乙酸/磷酸三钙支架可以很好的修复兔15mm骨缺损,且降解速度与成骨速度匹配良好。

载c-FLIP反义寡核苷酸聚乳酸聚羟乙酸纳米粒的制备及特性评价

目的研究c-FLIP反义寡核苷酸(c-FLIPantisenseoligodeoxynucleotide,c-FLIP ASODN)的聚乳酸聚羟乙酸(PL-GA)纳米粒的制备工艺,并通过实验对纳米粒子进行评价。方法通过二次超声乳化和溶剂挥发技术将PLGA用于基因导入的载体制备,并评价载c FLIP ASODN的PLGA纳米粒的特性,包括粒子形态、包封率和保护作用等。结果制备的纳米粒子外观呈规则的球形,其粒径尺寸平均为95.5nm,平均包封率为48%,载药量为(0.579±0.016)%,体外释放达15d,经过PLGA纳米粒的包裹,对c FLIP ASODN起到保护作用。结论纳米粒包裹的c FLIP ASODN制备工艺简便,粒子性状符合要求,并能有效保护反义寡核苷酸免于核酸酶的降解而延长其作用时间。

羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸/骨形态发生蛋白复合生物材料在兔体内生物组织相容性的研究

目的评价快速成型工艺制作的羟基磷灰石/聚乳酸-聚羟乙酸/骨形态发生蛋白(HA/PLGA/BMP-2)生物材料在新西兰兔体内的生物组织相容性。方法健康新西兰大白兔20只,随机抽取10只为实验组,10只为对照组。实验组于兔颅顶部植入HA/PLGA/BMP-2生物材料,对照组植入金属钛网。分别于4周、8周、12周通过HE染色、血常规、血生化等评价方法,评价HA/PLGA/BMP-2生物材料在兔体内的组织相容性。结果实验组植入物周围组织(约1 cm)HE染色结果显示:4周见部分中性粒细胞,少量炎性细胞浸润;8周未见中性粒细胞,无炎性细胞浸润;12周未见炎性细胞,周围可见成纤维细胞增生。对照组植入物周围组织(约1 cm)HE染色结果显示4周、8周、12周均未见有炎性细胞生成。实验组、对照组肝、肾组织HE染色结果显示均未见有炎性细胞,无新生组织形成。实验组与对照组12周血液学结果比较,差异无显著性意义。结论 HA/PLGA/BMP-2生物材料具有良好的生物相容性,是一种安全、无肝肾毒性的生物材料,在新型骨组织工程材料上有一定的研发潜力。

可降解聚合物在组织工程心脏瓣膜中应用的皮下埋植实验研究

目的 :评价作为组织工程心脏瓣膜支架的聚羟乙酸 聚乳酸共聚物 (PGLA)、聚 β 羟基丁酯 (polyhydroxybu tyrate ,PHB)、胶原膜三种生物可吸收材料的组织相容性和皮下吸收情况。 方法 :本文对照研究三种材料经皮下埋植后 2、4、6、8周和 12周的大体观察及组织学检查。 结果 :胶原膜皮下包埋 8周仍保持膜状结构 ,8～ 12周完全降解 ,组织相容性及皮下吸收情况优于PHB及PGLA。 结论

盐酸布比卡因PLGA微球蛛网膜下腔给药后的药效学及生物相容性研究

目的通过布比卡因PLGA微球家兔蛛网膜下腔给药的药效学和生物相容性研究，考查布比卡因聚乳酸聚羟乙酸嵌段共聚物(poly lactide-glycolide，PLGA)微球的神经阻滞效果及安全性。方法本文以家兔为实验对象，以注射剂为对照组，以后肢反应综合评分法评价其麻醉效果。以用药部位病理切片分析评价微球的安全性。结果实验表明，微球组蛛网膜下腔给药后不同麻醉阶段的麻醉时间T1、T2、T3以及麻醉有效总时间T和综合评分S值均显著大于注射剂对照组(P<0.01)。结论微球组与注射剂组相比，局部麻醉作用持续时间长，微球组与注射剂组蛛网膜下腔给药3、7、14天均未发现刺激性反应说明微球组在体内具有明显的缓释作用和较好的安全性。

脑靶向纳米载体的研究进展

目的对近年来以纳米粒为载体的脑部给药系统研究进行总结和归纳。方法查阅大量的国内外文献,具体从聚氰基丙烯酸正丁酯(PBCA)、聚乙二醇-聚乳酸/聚乳酸聚羟乙酸纳米粒(mPEG-PLA/PLGA)、固体脂质纳米粒给药载体的发展现状、机理、临床应用及优缺点等方面进行阐述。结果纳米粒给药系统的研究重点在于怎样解决穿越血脑屏障的问题和用药的安全性。结论现阶段这种给药途径虽然已取得了突破性进展,有些药物已进入了临床试验,但仍然存在着很大的不足。

人皮肤成纤维细胞与PGA进行组织构建的适宜接种浓度

目的可吸收生物材料聚羟乙酸(PGA)与成纤维细胞已被证实可以应用于体外组织工程肌腱的构建,本试验旨在探讨应用人皮肤成纤维细胞与PGA在体外进行组织构建时的适宜接种浓度。方法酶消化法获得人皮肤成纤维细胞经体外培养、扩增至第2代,按照低、中、高三种浓度接种于PGA材料分别作为实验组1、2、3,传统浓度细胞接种的作为对照组,各组样本数n均为3,分别于接种后3天、1周、2周和4周进行观察和检测。结果接种后3天实验各组无明显差异,细胞在材料上黏附伸展良好。1周和2周时,各组细胞均有明显增殖,并分泌细胞外基质(ECM extra cellular matrix),但实验组1、2的ECM不如实验组3和对照组丰富,此后该现象更为明显。至第4周时,实验组1仅形成厚薄不均的薄膜状物,其余三组均形成组织样结构,但实验组2形成的细胞--材料复合物结构略为松散。结论应用本实验组中高浓度接种皮肤成纤维细胞在体外构建工程化组织可以达到传统所用更高浓度的接种效果,以节约细胞,减少取材。

可吸收骨折内固定材料的新进展

当前治疗骨折的内固定材料基本上是金属,但是金属有几个明显的缺点需要克服:(1)金属内固定物过于坚硬,由于应力遮挡可形成骨质疏松、延迟愈合和再骨折;(2)骨折愈合后需再次手术取出;(3)一部分病人对金属敏感性大而产生免疫反应;(4)金属植入物有诱变性,可导致恶性肿瘤的发生。 基于这些原因,从六十年代开始许多发达国家就开始了可生物降解内固定物的研究,希望找到一种既能满足骨折固定的需要,又能生物降解的材料,以取代金属材料作为骨折内固定物。八十年代随着高分子聚合技术和塑料加工技术的发展,尤其是纤维增强技术的发展,可吸收骨折内固定物才有了很大的发展。目前临床应用最多的是自增强聚羟乙酸(self-reinforced polyglycolic acid,SR-PGA)、聚乳酸(poiylactic acid,SR-PLA)及其共聚物(polylactin 910),并以各种商品名在市场上销售,如Biofix、Vicryl、Phusiline及Ethipin等。

九州浏览

今年2月底,在国家"863"十五周年成就展上,一只背上长着"人耳"的活老鼠引起了观众的极大兴趣。这只老鼠的眼睛为红色,尾巴长长的,浑身没毛。鼠背上的"人耳"几乎与老鼠的身子一样大。这种老鼠叫裸鼠,因为没有免疫力,所以不会对那只"人耳"产生排异反应。老鼠身上的"人耳"是由负责此项研究的首席科学家曹谊林教授亲手植入老鼠体内的。方法是将裸鼠的背上割开一个口子,然后将已经培养好的"人耳"植入后缝合。"人耳"是在此之前一周开始制备的。先用一种高分子化学材料聚羟乙酸做成"人耳"的模型支架,然后让细胞在这个支架上繁殖生长。支架最后会自己降解消失,"人耳"便与老鼠浑然成为一体。因为老鼠很娇气,所以得不时地给它喂水、喂食,而且饲料也是特制的。

β-TCP／PLGA复合BMSCs联合高压氧修复海水浸泡兔桡骨骨缺损的作用研究

目的探讨β-磷酸三钙/聚乳酸-羟基乙酸共聚物(β-TCP/PLGA)复合骨髓间充质干细胞(BMSCs)联合高压氧修复海水浸泡骨缺损的疗效。方法复苏和传代的BMSCs接种于β-TCP/PLGA支架上,构建组织工程骨。60只新西兰兔在双侧桡骨制作1.5cm的骨缺损,经海水浸泡3h后,分成4组,A组:空白对照组;B组:单纯BMSCs组;C组:BMSCs+高压氧组;D组:β-TCP/PLGA+BMSCs高压氧组。分别于术后4、8、12周分别X射线摄片处死后取桡骨。通过X线片、苏木素-伊红(HE)染色和免疫组织化学检测,评价各组海水浸泡骨缺损修复效果。结果影像学检查,术后12周A组骨缺损未完成修复,断端硬化;B组骨缺损部分修复;C组骨缺损基本完成修复,髓腔未通;D组骨缺损完成修复,髓腔再通。各个时间点骨痂灰度值D组>C组>B组>A组(P<0.05)。组织学观察,术后12周,A组少量板层骨;B组少量板层骨形成,少量骨小梁生成;C组大量板层骨形成,骨小梁排列欠规则;D组大量板层骨形成,骨小梁排列规则。免疫组织化学检测各组表达骨钙素(OCN)强度,术后4周最强,术后8周减弱,术后12周达到最低。术后4周和8周,OCN表达强度D组>C组>B组>A组(P<0.05),术后12周各组差异无统计学意义(P>0.05)。结论β-TCP/PLGA复合BMSCs联合高压氧是修复海水浸泡骨缺损的有效方法之一。