兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物相容性的实验研究

目的探讨兔耳软骨细胞与聚羟基丁酯-聚丙交酯复合物(PHB-PLA)的细胞相容性,为进一步以PHB-PLA为支架构建组织工程软骨提供实验依据和理论基础。方法分离、培养的兔耳软骨细胞,接种于PHB-PLA浸泡液及膜片上,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖指数及计算毒级,并在体外培养后组织染色(Masson)及扫描电镜观察细胞的生长状况。设立空白对照组。结果兔耳软骨细胞在PHB-PLA浸泡培养基中生长良好。24、487、2 h MTT法结果与对照组差异无统计学意义;毒性分级为0。组织染色及扫描电镜显示:兔耳软骨细胞生长良好,形态正常,黏附牢固。结论兔耳软骨细胞与PHB-PLA的相容性良好,无毒性,可以用于进一步构建组织工程软骨。

电活性可生物降解纳米复合材料PAP/op-HA/PLGA的制备及成骨活性

以苯胺五聚体(AP)与聚乳酸(PLA)的三嵌段共聚物(PAP)与表面接枝低聚乳酸的纳米羟基磷灰石(op-HA)和聚丙交酯-乙交酯(PLGA)的复合物共混,制备了电活性可降解纳米复合材料PAP/op-HA/PLGA,采用紫外-可见光谱、循环伏安扫描和标准四探针法分析其电化学特性及电导率.采用ESEM观察其膜表面形貌,用接触角评价其亲水性.通过在材料膜表面接种兔成骨细胞进行体外培养,采用荧光染色、NIH ImageJ图像分析和Real-time PCR综合评价细胞在材料表面的黏附、扩展(细胞面积比)和成骨相关基因的表达水平,以此评价新型电活性纳米复合骨修复材料PAP/op-HA/PLGA的表面性质和生物活性.结果表明,PAP/op-HA/PLGA的电导率较低(5×10-6 S/cm),但具有良好的电化学氧化还原性能,PAP质量分数为0.1%时,材料的亲水性明显改善,成骨细胞的黏附和扩展明显增强.培养7 d时骨形态蛋白-2(BMP-2)和骨连接蛋白(Osteonectin)的基因表达水平明显提高,而对Ⅰ型胶原蛋白的基因表达无明显影响.表明PAP/op-HA/PLGA具有良好的细胞相容性和成骨活性.