血清生长分化因子15和聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶1在老年心力衰竭并发心律失常患者血清中的表达及其临床预后评估价值

目的分析血清生长分化因子15(GDF15)、聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶1(PARP1)水平对老年心力衰竭(心衰)并发心律失常患者预后的评估价值。方法选取2021年1月至2022年6月在湖北省天门市第一人民医院诊治的180例老年心衰并发心律失常患者为观察组,及同期180例老年慢性心衰但未发心律失常患者为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测老年心衰并发心律失常患者血清GDF-15、PARP1水平;Logistic回归分析影响老年心衰并发心律失常患者预后的因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清GDF-15、PARP1水平对老年心衰并发心律失常患者预后的预测价值。结果与对照组相比,观察组血清GDF-15、PARP1水平明显升高(P<0.05);随着心功能分级的增加,老年心衰并发心律失常患者血清GDF-15、PARP1水平依次明显升高(P<0.05);与预后良好组相比,预后不良组老年心衰并发心律失常患者血清GDF-15、PARP1水平显著升高(P<0.05);Logistic回归分析发现,心功能分级、GDF-15、PARP1是影响老年心衰并发心律失常患者预后的危险因素(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)是影响患者预后的保护因素(P<0.05);血清GDF-15、PARP1二者联合预测老年心衰并发心律失常患者预后的ROC曲线下面积(AUC)为0.908,均优于其各自单独预测(Z二者联合-GDF-15=1.871,P=0.031;Z二者联合-PARP1=2.847,P=0.002)。结论老年心衰并发心律失常患者血清GDF-15、PARP1水平升高,与患者预后有关,对老年心衰并发心律失常患者预后具有一定的预测价值。

环状RNA-胞裂蛋白2/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1分子轴在重症急性胰腺炎中的作用及机制研究

目的探讨环状RNA(circRNA)-胞裂蛋白2(SEPT2)/miR-150-5p/聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)分子轴在重症急性胰腺炎(SAP)中的作用及机制。方法选取2019年12月至2021年12月赣南医学院第一附属医院收治的46例SAP患者作为重症组;并选取本院同期收治的41例轻症急性胰腺炎(MAP)患者作为轻症组;另选取本院同期35名健康体检者作为对照组。3组均采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定血清circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量,采用急性生理和慢性健康评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评估病情严重程度;采用重组慢病毒包装合成有效感染序列sh-SEPT2(干扰组)与过表达序列oe-SEPT2(过表达组)建立动物模型,采用酶联免疫吸附试验测定大鼠生化指标[白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、D乳酸及二胺氧化酶(DAO)],采用RT-PCR及Western blot法检测大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1及细胞凋亡相关基因半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-9 mRNA表达。比较3组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分,采用Pearson相关性分析SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分的相关性;比较干扰组与过表达组大鼠苏木精-伊红染色法(HE)结果、肠黏膜损伤评分、炎症因子水平及cir-cRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1和Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量。结果重症组circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1基因表达量及APACHEⅡ评分均高于轻症组和对照组,且轻症组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性结果显示,SAP患者PARP-1与circRNA-SEPT2、miR-150-5p及APACHEⅡ评分均呈正相关(r>0,P<0.05)。干扰组HE染色下胰岛细胞界限清晰,胰岛丰富,胞浆丰富,形态完整;过表达组大鼠胰岛细胞界限不清,胰岛数量较少,细胞形态不规则,细胞体积较大,边缘不齐;干扰组胰腺损伤评分为(2.58±0.16)分,低于过表达组的(3.95±0.53)分,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组IL-1β、IL-18、TNF-α、D乳酸及DAO水平均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。干扰组大鼠circRNA-SEPT2、miR-150-5p、PARP-1 mRNA表达及细胞凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-9 mRNA表达量均低于过表达组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论PARP-1通过靶向作用于circRNA-SEPT2/miR-150-5p参与SAP的发生与发展,抑制circRNA-SEPT2表达,可减轻SAP肠黏膜屏障损伤,能为SAP治疗提供新的靶点。

核素标记聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂显像剂研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是一种DNA修复酶,参与基因转录、炎症、凋亡、细胞死亡和代谢等生命过程。在增殖活跃的细胞中PARP表达和活性增加,特别是在多种癌细胞中过度表达。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)可以治疗卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、输卵管癌、腹膜癌、胰腺癌等恶性肿瘤。通过放射性核素对PARPi类似物进行标记,靶向结合PARP-1,构建放射性显像剂进行肿瘤显像,可用于治疗决策和疗效评估等。本文将总结核素标记聚腺苷二磷酸核糖聚合酶显像剂的研究进展。

卵巢癌对聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂耐药机制的研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂类药物的问世是近年来肿瘤靶向治疗领域中的重要突破之一,其对于卵巢癌的治疗效果颇为显著。然而,一部分患者对于PARP抑制剂的治疗并不敏感,这种耐药现象限制了其在卵巢癌中的应用。探讨PARP抑制剂耐药机制、寻找克服耐药策略成为进一步扩大PARP抑制剂获益人群的迫切需求。现有研究表明,卵巢癌对PARP抑制剂耐药的主要机制有同源重组修复活性恢复、相关信号通路因子表达异常、药物外排作用和复制叉稳定性改变等。本文将就卵巢癌对PARP抑制剂耐药机制的研究进展作一综述,旨在为PARP抑制剂在临床中的合理应用提供理论依据,并对克服耐药策略的探索提供参考思路。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂诱导的血小板减少症的防治研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)是过去10年卵巢癌治疗的突破性药物,通过阻断参与DNA修复过程的酶发挥作用,用于卵巢癌的维持治疗。但PARPi诱导的血小板减少不但增加患者出血风险、降低治疗药物剂量、延迟用药时间,严重时可导致治疗终止,应引起高度重视。本文重点介绍了PARPi诱导血小板减少症的发病率、发生机制、危险因素及防治方法,为临床防治PARPi诱导的血小板减少症提供参考。

中国汉族、布依族和壮族群体中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1基因多态性

【目的】探讨人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)5个外显子核苷酸多态性。【方法】采用聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)和银染技术检测3个民族(汉族、布依族和壮族)634名正常人PARP-1基因多态性。【结果】在3个民族634名正常人血标本的5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中,219名汉族人PARP-1基因5个外显子均未检出多态性条带;203名布依族和212名壮族人PARP-1基因的5个外显子扩增产物中分别有2例的外显子20检出1条多态性条带,其余4个外显子扩增产物未见多态性条带。【结论】PARP-1基因第20外显子上可能存在多态性。

Notch1和多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1在糖尿病小鼠视网膜中的表达

背景 多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1（PARP-1）在糖尿病视网膜病变（DR）发生过程中具有重要作用,而Notch1是生物体重要的信号转导通路,可能参与对视网膜新生血管性疾病的拮抗过程,Notch1是否参与了DR的发生还未得到证实. 目的 探讨Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、核因子-κB（NF-κB）及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及高糖视网膜血管内皮细胞（RVECs）中的表达. 方法 建立糖尿病小鼠模型,应用免疫组织化学法和Western blot法检测Notch1、Dll4、PARP-1、Akt、NF-κB及caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织及RVECs的表达.结果 Notch1、Dll4、p-Akt在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显降低,而PARP-1、caspase-3在糖尿病小鼠视网膜组织中的表达量比正常对照组明显增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）,但NF-κB的表达量无明显变化,差异无统计学意义（t=0.748,P=0.530）.RVECs中Notch1、p-Akt的表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,而剪切型PARP-1、caspase-3的表达量则随葡萄糖浓度的增高而降低,在葡萄糖浓度为30 mmol/L时上述变化最显著,与正常对照组比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）,而NF-κB的表达量无明显变化. 结论 在糖尿病小鼠视网膜中,剪切型PARP和caspase-3蛋白的表达上调,但Notch1、p-Akt蛋白的表达量下调.剪切型PARP和caspase-3表达量随葡萄糖浓度的增高而增加,Notch1、p-Akt则相反.

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1多态性的检测

目的 检测人类聚腺苷二磷酸核糖聚合酶 -1(PARP -1) 5个外显子核苷酸多态性。方法 采用聚合酶链式反应 (PCR) -单链构象多态性 (SSCP)和银染技术检测 3个民族 63 4名正常人PARP -1基因多态性。结果 在3个民族 63 4名正常人血标本的 5个外显子扩增产物SSCP电泳条带中 ,2 19名汉族人PARP -1基因 5个外显子均未检出多态性条带 ;2 0 3名布依族和 2 12名壮族人PARP -1基因的 5个外显子扩增产物中分别有 2例的外显子 2 0的SSCP电泳条带检出 1条多态性条带 ,其余 4个外显子扩增产物SSCP电泳未见多态性条带。结论 PARP -1基因第2 0外显子上可能存在多态性。PCR -SSCP银染技术具有简便、高效、快速、重现性好等优点 ,是对大样本进行PARP-1基因突变筛检的一种有效的方法 。

多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1通过激活NF-κB途径导致高糖人视网膜血管内皮细胞凋亡

目的探讨多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶-1[poly(adenosine diphosphate-ribose)polymeras-1,PARP-1]和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)在高糖人视网膜血管内皮细胞(retinal vascular endothelial cells,RVEC)中的相互作用及其在人RVEC中的表达定位及作用机制。方法体外培养人RVEC及HEK293T细胞,并进行传代,同时构建高糖人RVEC细胞模型。构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,酶切鉴定后转染高糖培养的人RVEC,Western blot法检测重组质粒表达目的基因的效果,并应用Western blot法和免疫共沉淀法检测高糖人RVEC中PARP-1和NF-κB的相互作用。PARP-EGFP和Flag-NF-κB质粒共转染人RVEC,激光共聚焦扫描显微镜检测PARP-1和NF-κB在高糖人RVEC中的定位及其相互作用。结果人RVEC复苏后24 h贴壁,细胞呈扁平梭形,3 d左右细胞开始融合呈铺路石样,单层生长,铺满瓶底,并可见接触抑制现象。成功构建PARP-EGFP及Flag-NF-κB质粒,并有效表达目的基因。免疫共沉淀结果显示PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,高糖组NF-κB p50的条带比正常对照组明显增粗,并且高糖情况下PARP-1结合NF-κB的量较正常对照组明显增加。激光共聚焦扫描显微镜结果显示PARP和NF-κB均表达于正常的人RVEC的细胞核和核周区域,当受到高浓度葡萄糖影响后,PARP-1和NF-κB均集中表达于细胞核内,尤以NF-κB最显著。结论 PARP-1和NF-κB是相互作用的蛋白质,血糖增高时,PARP-1可能进入细胞核内并结合同时进入细胞核的NF-κB,激活NF-κB信号通路,引起RVEC凋亡,导致DR的发生。

慢病毒介导的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1siRNA对大鼠脑梗死后神经血管单元的影响

目的观察慢病毒介导的聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)siRNA对大鼠脑梗死后神经血管单元(NVU)的影响。方法 SD大鼠132只随机分为假手术组(n=32)、脑梗死组(n=30)、空病毒组(n=32)和PARP-1组(n=38)。空病毒组和PARP-1组大鼠分别于侧脑室注射空病毒和携带目的基因的病毒5μl进行RNA干扰,14 d后进行脑梗死模型制作。造模术24 h后依据Longa 5分法进行神经功能评分。采用TTC染色检测脑梗死体积,HE染色观察脑组织病理改变,伊文思蓝(EB)通透率检测计算脑组织EB含量,脑组织干湿重法测定脑组织含水量,电镜观察NVU超微结构的改变。结果假手术组与空病毒组间大鼠PARP-1 mRNA表达水平的差异无统计学意义(P=0.244)。与空病毒组比较,PARP-1组RNA干扰后3 d、5d、8 d PARP-1 mRNA表达水平均明显下降(均P<0.05)。假手术组大鼠无神经功能缺损,无脑梗死。与假手术组比较,脑梗死组和空病毒组大鼠缺血侧脑组织EB含量和脑组织含水量明显增加(均P<0.05)。与脑梗死组和空病毒组相比,PARP-1组大鼠神经功能评分显著降低,脑梗死体积明显减小,脑组织EB含量和脑组织含水量明显减少(均P<0.05)。HE染色显示,假手术组大鼠海马神经细胞染色均匀,细胞排列紧密整齐且结构清晰;脑梗死组和空病毒组大鼠海马神经细胞肿胀、破裂、轮廓模糊,染色较深;PARP-1组神经细胞排列整齐,染色均匀。电镜可见,假手术组海马NVU超微结构清晰完整;脑梗死组和空病毒组神经细胞变性,线粒体肿胀、嵴减少,髓鞘变薄、分层,血管内皮细胞凋亡、基底膜不连续,突触数量减少、结构破坏;而PARP-1组海马NVU超微结构损伤明显减轻。结论抑制PARP-1的表达,可明显改善脑梗死大鼠的神经功能,缩小脑梗死体积,减轻脑梗死后NVU的损伤。

桑色素对脑缺血再灌注损伤大鼠多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶和核因子-κB表达的影响

目的探讨桑色素对大鼠脑缺血再灌注损伤区炎性递质多聚腺苷酸二磷酸核糖聚合酶(poly adeno-sine diphosphate ribose polymerase,PARP)和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)表达的影响。方法采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,将动物随机分为假手术组,模型组,尼莫地平组,桑色素高、中、低剂量组。观察各组大鼠的神经功能损害评分(neurological severity scores,NSS),采用蛋白质印迹法和PCR分别检测梗死区NF-κB和PARP蛋白及其mRNA的表达水平。结果与模型组比较,桑色素各剂量组大鼠NSS,以及半暗带区PARP蛋白、NF-κB蛋白、PARP mRNA、NF-κB mRNA表达水平均显著降低(P<0.05,或P<0.01);桑色素高剂量组在降低上述指标方面显著优于桑色素低、中剂量组及尼莫地平组(P<0.05,或P<0.01)。结论桑色素可能通过下调炎性递质NF-κB和PARP的表达而抑制炎性反应,从而促进脑缺血损伤神经功能的恢复。

大鼠肠缺血再灌注损伤中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1活性变化的实验研究

目的探讨肠缺血再灌注损伤中聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]活性变化情况。方法通过手术方法阻断腹腔干和肠系膜上动脉45 min后恢复血流,建立大鼠肠缺血再灌注模型为I/R组(n=10),假手术组为Sham组(n=10)。HE染色观察肠缺血再灌注后组织学改变;PARP-1的活化程度用免疫组织化学方法检测其产物聚腺苷二磷酸核糖[poly(ADP-ribose),PAR]的表达情况来表示;用WesternBlot检测PARP-1的裂解片段p89,探测有无凋亡早期信号表达。结果I/R组肠黏膜明显受损[病理损伤评分I/R组(14.2±2.6)分vsSham组(2.5±1.1)分,P<0.05];仅I/R组可见凋亡早期信号p89表达;与Sham组相比PAR呈显著阳性表达[I/R组(40.5±10.2)%vsSham组(5.3±3.4)%,P<0.05]。结论肠缺血再灌注过程中PARP-1被过度激活,可能在导致肠损伤中发挥重要作用。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)治疗卵巢癌:影像学研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂(PARPi)的出现,开启了维持治疗卵巢癌的新篇章,使大部分患者预后得到明显改善。影像学可对患者进行非侵入性全面评估,为临床诊治提供重要信息。本文就PARPi作用原理及影像学有关PARPi治疗卵巢癌进展进行综述。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1抑制剂对氢醌致人胚肺成纤维细胞凋亡的影响

目的探讨聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)特异性抑制剂N-(6-氧-5,6-二氢菲啶-2-羟基)-N,N-二甲基乙酰胺-盐酸(PJ34)对氢醌(HQ)所致人胚肺成纤维细胞(HLF细胞)凋亡的影响及其作用机制。方法将离体传代培养的HLF细胞分为阴性对照组、阳性对照组(HQ组)、3个PJ34组和3个PJ34+HQ组。按PJ34不同浓度(0.5、1.0、2.0μmol/L)分为PJ34的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,作用4 h后检测结果;按PJ34的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组浓度及作用4 h后再分别加入HQ(80μmol/L)分为PJ34+HQ的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组,作用24 h检测结果;HQ组仅用HQ24 h处理。采用PARP-1单克隆抗体荧光标记,流式细胞术检测HLF细胞中PARP-1蛋白表达、细胞凋亡和细胞复制后期(G2)细胞数情况,噻唑蓝(MTT)比色法测定HLF细胞相对存活率。结果各组给予不同剂量的PJ34 4 h后,HLF细胞的存活(增殖)明显受抑制(P<0.05),随着PJ34浓度的增加,其抑制作用进一步增强;PARP-1蛋白表达阳性的HLF细胞百分数均明显低于阴性对照组(P<0.01);流式细胞术检测显示HQ作用24 h后均可引起HLF细胞的调亡,可出现明显的亚二倍体峰,且随着PJ34预处理浓度的增加,其峰值也逐渐增加;HQ可导致细胞周期出现G2期阻滞,PJ34+HQⅠ、Ⅱ、Ⅲ组G2期阻滞减少且差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论PARP-l抑制剂PJ34明显抑制HLF细胞PARP-1表达,增加HQ所致细胞凋亡,并通过诱导HLF细胞凋亡抑制其增殖。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂药物不良反应信号挖掘与分析

目的:挖掘、分析聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂的药物不良反应(ADR)信号,为提高临床用药安全提供参考。方法:应用英国药品和保健品管理局(MHRA)的综合标准法挖掘美国FDA不良事件报告系统(FAERS),调取2014年1月1日~2021年12月31日的不良反应事件数据,使用SQL SERVER(2008 R2)数据库整理信息,以4种PARP抑制剂的名称作为检索关键词。结果:截至2021年12月31日,总共收集9 849 888例不良反应事件信息,其中与尼拉帕利相关的不良反应事件9849例,奥拉帕利6655例,他拉唑帕利420例,卢卡帕利3327例;经挖掘后分别得到尼拉帕利的ADR信号597个,奥拉帕利168个,他拉唑帕利35个,卢卡帕利132个。所有信号涉及25个系统,以各类检查指标、胃肠系统疾病症状、血液及淋巴系统疾病症状和良性、恶性及性质不明的肿瘤这4个系统的信号最多。汇总4种PAPR抑制剂共有的前7种信号分别为糖类抗原125升高、血小板计数下降、卵巢癌复发、恶心、肿瘤标志物升高、恶性肿瘤进展和贫血症,其中尼拉帕利和奥拉帕利相关血小板计数下降和恶心信号的时间强度曲线均不稳定。结论:临床使用PARP抑制剂应重点关注血液学检验指标异常和胃肠系统不良反应,尤其对于低体重或基线血小板计数下降的患者,应加强尼拉帕利的药学监护。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶抑制剂在乳腺癌治疗中的临床研究进展

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)抑制剂作为靶向DNA损伤的新型抗肿瘤药物,通过抑制PARP活性以及参与PARP1-DNA捕获两大机制,并凭借与乳腺癌易感基因(BRCA)突变在DNA损伤修复途径中的合成致死作用,为携带BRCA突变的乳腺癌患者提供了临床治疗的新方向.近年来,研究者们试图扩大PARP抑制剂的适用范围,并尝试使用联合治疗方案抑制药物耐药,陆续开展了多个临床试验,获得了阶段性的研究成果.本文综述了PARP抑制剂在乳腺癌治疗中的临床研究进展以及亟待解决的问题.

聚ADP-核糖聚合酶-1在喉鳞状细胞癌细胞DNA氧化损伤及凋亡中的作用

目的探究聚ADP-核糖聚合酶-1(PARP1)在喉鳞状细胞癌(LSCC)中的表达及其对LSCC细胞DNA氧化损伤与凋亡的影响。方法收集40例患者的LSCC组织及癌旁组织样本,采用免疫组化染色和qRT-PCR检测LSCC组织与癌旁组织中PARP1的表达。采用不同浓度Menadione诱导LSCC细胞系Hep-2,MTT法检测不同浓度诱导下细胞增殖抑制率。将Hep-2细胞随机分为对照组(正常培养)、Men组(20μmol/L Menadione处理)、Men+PARP1抑制剂组(20μmol/L Menadione+10μmol/L PARP1抑制剂Olaparib共处理)。MTT法计算各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞内活性氧(ROS)水平;细胞免疫荧光染色观察各组细胞DNA损伤标记分子γ-H2AX焦点生成情况;Western blot测定各组细胞γ-H2AX、DNA-PKcs、BRCA1、LIG4、Caspase-3及Caspase-9蛋白表达;Hoechst33258染色观察各组细胞凋亡情况。结果LSCC组织中PARP1阳性表达率及PARP1 mRNA表达均明显高于癌旁组织(P<0.01)。Hep-2细胞经不同浓度Menadione诱导后,细胞增殖抑制率均升高(P<0.05)。与对照组比较,Men组和Men+PARP1抑制剂组的细胞增殖抑制率升高,细胞ROS水平升高,γ-H2AX焦点形成明显增加,γ-H2AX蛋白表达上调,DNA-PKcs、BRCA1、LIG4蛋白表达均下调,细胞出现浓缩、碎裂的蓝色凋亡体,Caspase-3和Caspase-9蛋白表达上调,差异均有统计学意义(P<0.05),且Men+PARP1抑制剂组以上变化较Men组更明显(P<0.05)。结论PARP1在LSCC组织中高表达,抑制其表达能够进一步加重Menadione诱导的Hep-2细胞DNA氧化损伤,并促进细胞凋亡。

聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1对热休克蛋白60的抑制作用

目的观察聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(PARP-1)对早产儿脑室周围白质软化(PVL)小鼠模型及体外培养的少突胶质前体细胞中的热休克蛋白60(HSP60)表达的调控作用。方法建立未成熟小鼠野生型(Wild-type)和PARP-1基因缺失型小鼠脑白质损伤模型,术后取脑,冰冻切片,采用免疫荧光标记法对切片内HSP60进行染色,并在荧光显微镜下观察HSP60的表达。体外培养的少突胶质前体细胞经PARP-1的抑制剂3,4-dihydro-5-[4-(1-piperidinyl)butoxyl]-1(2H)-isoquinoline(DPQ)或激活剂Etopside预处理,再经IFN-r激活后,应用Western-blot方法检测细胞内HSP60的表达情况。结果在PARP-1基因缺失型小鼠脑白质损伤模型脑中,HSP60的表达量明显高于Wild-type组(P<0.05)。PARP-1抑制剂DPQ能够明显增强HSP60的表达,而PARP-1激活剂Etopside可显著抑制HSP60的表达。结论 PARP-1对HSP60的基因表达具有负调控作用。

汉族人群聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1遗传多态性的检测

目的:通过检测人聚腺苷二磷酸核糖聚合酶-1(hPARP-1)7个外显子核苷酸多态性,了解在广东的汉族人群中hPARP-1基因多态性分布,为建立民族特色的DNA修复基因多态性数据提供基础资料。方法:选取在广东地区的汉族健康人群320名的基础资料及血液样本,抽提血液DNA,用PCR法扩增hPARP-1基因7个外显子,采用聚合酶链式反应(PCR)-单链构象多态性(SSCP)和银染技术检测hPARP-1基因多态性,并进行DNA序列测定。结果:在广东的汉族正常人320名血标本的7个外显子扩增产物SSCP电泳条带中,4个样本hPARP-1基因外显子17的SSCP电泳条带检出1条多态性条带,3个样本第12内含子检出1条多态性条带,其余6个外显子扩增产物SSCP电泳未见多态性条带。正常带型DNA测序结果与genebank中已知序列完全一致,第17外显子上有1种基因突变类型(T→C)。结论:在广东地区的汉族人群的hPARP-1基因第17外显子和第12内含子上可能存在多态性。