肝细胞球形聚集体培养研究进展

生物人工肝在治疗肝功能衰竭中起重要作用。球形聚集体培养作为肝细胞培养的主要方式之一,旨在达到高密度、维持长时间生物活性的目标。文章就近年来肝细胞球形聚集体培养的影响因素和培养方式作一综述。

琼脂在肝细胞聚集体培养中的应用

新分离的大鼠肝细胞在体外培养的过程中形成聚集体是一种很重要的现象 ,它对于人工肝支持系统的构建有重要意义 .聚集体中的肝细胞可以保持较高的特异生理活性 .采用琼脂作为细胞外基质包被细胞培养板 ,可以有效地促使肝细胞在无血清的培养基中形成聚集体 .结果表明 ,该办法简单有效 ,聚集体中的肝细胞的特异性功能如尿素合成、白蛋白分泌等活性均高于单层贴壁生长的肝细胞 .

人肝细胞 L-02/聚丙烯杂化界面的初步研究:肝细胞球形聚集体培养

生物人工肝（bioartificial liver，BAL）在肝功能衰竭中的治疗价值已得到肯定，大量高活性的人肝细胞是细胞型体外BAL支持系统的核心原材料。球形聚集体是一种立体、高密度、高活性培养肝细胞的方法，但操作较复杂。我们采用生物材料表面接枝功能化学基团的方法，对人肝细胞L-02／聚丙烯杂化界面进行了研究，并通过简单的静止培养实现了肝细胞的球形聚集体培养方式，极大的简化了既往的肝细胞球形聚集体培养方法。

超速玻璃化法冻存小鼠肝细胞球形聚集体的初步研究

现有的肝细胞冻存法是将分散的肝细胞用于冻存.从肝组织消化分离的肝细胞,其细胞完整性和功能都会受影响.有报道用肝细胞球形聚集体培养,效果优于用分散肝细胞培养[1].玻璃化法冻存细胞组织,由于不形成冰晶,对细胞损伤较小,已成功用于冻存胚胎、卵巢、胎肝组织和脑细胞[2-5].本研究将小鼠肝细胞预培养成球形聚集肝细胞,用改进的超速玻璃化法冻存,解冻后与含胶原培养液混合、培养,通过检测培养上清液中ALT、AST、乳酸脱氢酶（LDH）浓度判断肝细胞受损漏出情况,检测白蛋白（ Alb）浓度判断肝细胞合成功能.对照组用单层贴壁培养分散肝细胞做同样冻存和检测.