靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂AZD-9574的合成工艺改进

目的精简合成工艺,优化原始步骤,对靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂AZD-9574合成工艺进行改进。方法本研究分别以5-溴代吡啶酸甲酯和2-甲基(4-溴-3-氟-2-硝基苯胺)丙酸酯为起始原料,经氟代、取代、氨解、脱保护基、取代、还原环化、氧化、偶联、取代合成目标物靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂。结果对合成中关键步骤反应条件进行了优化,提高了产率。结论该方法操作简便、原料价廉易得、反应条件温和,可用于靶向聚ADP核糖聚合酶抑制剂的大规模制备。

聚ADP核糖聚合酶-1及其抑制剂在肿瘤细胞中的研究进展

聚ADP核糖聚合酶-1(PARP-1)在DNA单链断裂的碱基切除修复中具有非常重要的作用,在人类多种肿瘤中过度表达且过度表达者预后较差。利用合成致死原理,对于因BRCAl或BRCA2基因突变而同源重组修复DNA双链断裂缺陷的肿瘤细胞,抑制其PARP-1活性将导致肿瘤细胞死亡PARP抑制剂对于携带BRCA基因突变肿瘤患者具有一定的治疗作用,其临床应用价值已在多项临床试验中得到了证实。PARP-1可能会成为肿瘤治疗的重要靶点。

聚ADP核糖聚合酶1在人类乳腺癌中的表达及其与临床预后相关因子的关系

目的研究聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)在人类乳腺癌中的表达及其与患者临床预后相关因子间的相关性。方法采用RT-PCR及免疫荧光染色技术,检测66例手术切除的人类乳腺癌组织及癌旁组织中PARP-1的表达,并分析乳腺癌患者的康复相关因子与PARP-1表达间的关系。结果与癌旁组织相比,94.9%(62/66)的癌组织中PARP-1 mRNA表达上调,90.9%(60/66)的癌组织中PARP-1蛋白表达上调。临床分期越晚、肿瘤分化程度越差,PARP-1的标记指数(LI)、表达指数(EI)越大;单纯癌、浸润癌患者中PARP-1的LI、EI值较大;乳腺癌转移患者的PARP-1的LI、EI值显著高于非转移患者。结论PARP-1基因在转录和翻译水平上的过表达与乳腺癌的分期、病理分级、病理类型、肿瘤转移等临床预后相关因子有关。

聚ADP核糖聚合酶抑制剂用于卵巢癌治疗的研究进展

卵巢癌是导致女性死亡的主要癌症之一,死亡率在妇科癌症中居高不下。聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂可靶向杀灭同源重组修复缺陷的肿瘤细胞,包括乳腺癌易感基因(BRCA)突变的癌细胞,这种机制被称为协同致死效应。目前已有3个PARP抑制剂被FDA批准用于治疗晚期BRCA突变的卵巢癌。本文旨在阐述PARP抑制剂治疗卵巢癌的作用机制,并对已进入临床试验阶段的PARP抑制剂进行综述,以期为开发新的卵巢癌治疗药物提供参考。

聚ADP核糖聚合酶1在人类乳腺纤维腺瘤中的表达

目的研究聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)在人类乳腺纤维腺瘤中的表达,探讨纤维腺瘤的发生发展机制。方法采用免疫组化S-P法,检测156例人类乳腺纤维腺瘤组织(包括有乳腺癌家族史的26例和无乳腺癌家族史的130例)和40例腺瘤旁组织中PARP-1的表达,并对其表达进行比较。结果8.3%(13/156)的纤维腺瘤组织中PARP-1表达阳性,40例腺瘤旁组织中未发现PARP-1的表达,两组差异无统计学意义(P=0.059)。有乳腺癌家族史的纤维腺瘤患者中26.9%(7/26)PARP-1表达阳性,无乳腺癌家族史的纤维腺瘤患者中4.6%(6/130)PARP-1表达阳性,两组间差异有统计学意义(P=0.00);有乳腺癌家族史的纤维腺瘤患者PARP-1表达上调,与腺瘤旁组织相比差异有统计学意义(P=0.01)。结论PARP-1可能参与乳腺纤维腺瘤,特别是有乳腺癌家族史的乳腺纤维腺瘤的发生发展过程。

老年三阴型乳腺癌中高迁移率蛋白和聚ADP核糖聚合酶1表达与预后相关性

目的观察老年三阴型乳腺癌中高迁移率蛋白(HMG)A2和聚ADP核糖聚合酶(PARP)1的表达,分析其在乳腺癌组织中表达的临床特点并探讨其与预后的相关性。方法选择三阴型老年局部晚期乳腺癌标本和正常乳腺组织各68例,免疫组化染色(SP)法检测HMGA-2和PARP1蛋白在不同组织中表达,分析其与临床分级、病理类型及淋巴结转移等临床特点相关性,并通过生存曲线法比较两组预后情况。结果乳腺癌组织中HMGA-2、PARP1的阳性表达率分别为51.47%、67.65%。HMGA-2、PARP1表达与无瘤生存时间、淋巴结转移和分化程度相关(P<0.05)。Pearson直线相关分析显示,三阴乳腺癌组织中HMGA-2和PARP1的表达呈正相关(r=0.399,P<0.001)。生存曲线分析结果提示随着HMGA-2和PARP1阳性表达增加,患者术后生存期缩短。结论老年三阴型乳腺癌中PARP1和HMGA-2表达可作为乳腺癌的分子标志物,PARP1和HMGA-2阳性表达率越高,分化程度越高,更易发生淋巴结转移,无瘤生存时间愈短,预后差。

聚ADP核糖聚合酶-1与原发性肝癌的研究进展

最新统计数据表明,原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)是世界上第二大致病率肿瘤,它有很高的复发率及很低的5年生存率,且它的治疗选择有限。然而每年的新发例数却在逐年增加。找到原发性肝癌复发、转移及耐药的机制是我们亟待解决的问题。聚ADP核糖聚合酶-1 (poly(ADP)-ribose polymerase, PARP1)是一个分子量为116 kDa的细胞核蛋白,它在多种肿瘤当中异常表达,包括卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌、胰腺以及原发性肝癌。近年来目前上市的PARP抑制剂(PARP inhibitor, PARPi)药物,在乳腺及卵巢癌中应用广泛,但在原发性肝癌中不尽如意。原发性肝癌具有异质性,其发生与发展是一个多途径、多基因参与及多步骤的过程,其发病率与病死率在中国逐年上升。研究发现,PARP1与HCC的发生、发展及治疗密切相关,本文从PARP1的分子结构及生物学功能、PARPi的作用机制、PARP1在HCC组织中的表达情况、PARPi与HCC治疗的关系等4个方面对PARPi在HCC中作用的研究进展作一系统综述,为临床治疗HCC寻找新的治疗策略。

聚ADP核糖聚合酶在结直肠癌中作用的研究进展

近年来DNA修复途径成为癌症治疗的热门靶点,聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP)-ribosepolymerase,PARP]作为DNA修复的关键酶得到了广泛研究,目前上市的PARP抑制剂(PARP inhibitor,PARPi)药物,在乳腺及卵巢等肿瘤中取得了革命性的突破。结直肠癌(CRC)具有异质性,其发生与发展是一个多途径、多基因参与及多步骤的过程,其发病率与病死率在中国逐年上升。研究发现,PARP1与CRC的发生、发展及治疗密切相关,本文从PARP1的分子结构及生物学功能、PARPi的作用机制、PARP1在CRC组织中的表达情况、PARP1与结直肠癌干细胞的关系、PARPi与CRC治疗的关系等5个方面对PARPi在CRC中作用的研究进展作一系统综述,为临床治疗CRC寻找新的治疗策略。

聚ADP核糖聚合酶-1及其抑制剂与肿瘤治疗

聚ADP核糖聚合酶-1（PARP-1）能修复DNA损伤，从而维持细胞内环境与基因组稳定。多数恶性肿瘤细胞中PARP-1活性增强，因此，敲除PARP-1基因或使用PARP-1抑制剂能降低肿瘤细胞的DNA修复功能，增强其对DNA损伤因子的敏感性，从而提高肿瘤放疗和化疗疗效。PARP-1有望成为恶性肿瘤治疗的一个新靶点。

莪术醇对肺癌A549细胞凋亡诱导因子、聚ADP核糖聚合酶及Caspase-3表达的影响

目的:观察莪术醇干预后,体外培养A549细胞凋亡诱导因子(apoptosis induce factor,AIF)和聚ADP核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase,PARP]的表达情况,探讨莪术醇对非半胱天冬酶(caspase)依赖细胞凋亡的分子机制。方法:以不同质量浓度的莪术醇(12.5,25,50,100 mg.L-1)及阴性组处理肺癌细胞,药物作用48 h后提取各组蛋白;采用Westernblotting法分别检测各组AIF,PARP,caspase-3蛋白表达,并进行统计学分析。结果:经莪术醇处理后,阴性组的A549细胞的PARP相对蛋白表达量为0.545 3,AIF的相对蛋白表达量为0.358 6,而100 mg.L-1加药组的相对蛋白表达量分别为1.661 3和2.212 4,蛋白表达均随药物浓度的增加而增多,药物组与阴性组相比差异极显著(P<0.01),而caspase-3的前体(32×103)表达受药物影响较小,其激活体(17×103)基本不表达。结论:莪术醇可能主要是通过上调PARP蛋白的表达,进而将AIF转位到细胞核而引起凋亡的非依赖caspase途径来介导肺癌A549细胞的凋亡。

聚ADP核糖聚合酶抑制剂治疗复发性卵巢癌的系统评价

目的研究聚ADP核糖聚合酶(PARP)抑制剂治疗复发性卵巢癌的疗效和安全性。方法采用Cochrane系统评价方法,检索Medline、Embase、Central和中国生物医学文献数据库,检索时限为建库至2017年9月,手工检索相关参考文献,纳入PARP抑制剂治疗复发性卵巢癌的随机对照试验(RCT)。应用RevMan5.3软件进行Meta分析。结果纳入5个RCT,试验组患者1 160例,对照组患者679例。PARP抑制剂治疗较安慰剂明显改善无进展生存[HR=0.34,95%CI(0.30,0.40),P<0.01]和总生存结局[HR=0.73,95%CI(0.55,0.96),P=0.025],增加客观反应率[RR=2.56,95%CI(1.17,5.59),P=0.020]。与单用化疗相比,PARP抑制剂+化疗明显降低疾病进展风险[HR=0.51,95%CI(0.34,0.77),P=0.001],但总生存结局[HR=1.17,95%CI(0.79,1.73),P=0.440]和客观反应率[RR=1.11,95%CI(0.86,1.42),P=0.420]在两组间的差异无统计学意义。PARP抑制剂治疗明显增加严重贫血、疲劳、恶心及呕吐的发生率。结论现有证据表明PARP抑制剂能改善复发性卵巢癌的无进展生存结局。

黄白抑瘤方对人直肠癌Colo320细胞凋亡与Caspase 3及聚ADP核糖聚合酶表达的影响

[目的]探讨黄白抑瘤方对Colo320细胞凋亡与凋亡相关蛋白Caspase 3及聚ADP核糖聚合酶(PARP)表达的影响,以明确其治疗结直肠癌的生物学基础。[方法]使用不同浓度黄白抑瘤方体外干预Colo320细胞,检测不同浓度黄白抑瘤方对Colo320细胞凋亡的影响,检测其处理后Colo320细胞内凋亡相关蛋白Caspase3、PARP的表达。[结果]黄白抑瘤方作用Colo320细胞48h后,Colo320细胞出现了不同程度的亚二倍体凋亡峰,相较对照组细胞的早凋率明显上升(P<0.01);凋亡相关蛋白Caspase 3和PARP表达差异有统计学意义(P<0.01)。[结论]黄白抑瘤方能参与人直肠癌Colo320细胞的胞内凋亡通路,诱导细胞凋亡,从而达到抗肿瘤的作用。

聚ADP核糖聚合酶和微血管密度在人结肠癌组织中的表达及意义

目的 探讨聚ADP核糖聚合酶（PARP）和微血管密度（MVD）在人结肠癌组织中的表达及意义.方法 应用免疫组织化学染色法检测PARP和MVD在85例结肠癌组织中的表达.结果 结肠癌组织中PARP的表达与患者年龄（＜50岁40/56∶≥50岁20/29）,性别（男35/48∶女25/37）,肿瘤直径（＜5 cm 38/52：≥5 cm 22/33）,发生部位（右半结肠27/42∶左半结肠23/43）均无关（P＞0.05）,而在Duke＇s分期高（34/40）、有淋巴结转移（43/53）、肝转移（39/47）中的表达高于在Duke＇s分期低（26/45）、无淋巴结转移（17/32）、无肝转移（21/38）中的表达（P＜0.05）.MVD在结肠癌组织中的表达与患者年龄（＜50岁18.69±5.71∶≥50岁21.38±7.56）,性别（男20.57±6.84∶女20.24±7.61）,肿瘤直径（＜5 cm 20.59±6.87∶≥5 cm 20.21±7.54）,发生部位（右半结肠20.61±6.63∶左半结肠20.17±7.96）均无明显相关（P＞0.05）,而在Duke＇s分期高（21.86±7.35）、有淋巴结转移（22.29±7.38）、肝转移（22.11±7.32）中的表达高于Duke＇s分期低（17.76±5.69）、无淋巴结转移（16.93±4.83）、无肝转移（17.28±5.34）中的表达（P＜0.05）.结论 PARP的表达与结肠癌的Duke＇s分期、淋巴结转移、肝转移有关.

多聚（ADP-核糖）聚合酶抑制剂对大鼠缺血再灌注肾脏损伤的保护作用

目的探讨多聚（ADP-核糖）聚合酶（PARP）抑制剂3-氨基苯甲酰胺（3-AB）在大鼠-肾脏缺血再灌注损伤中的保护作用及对肾组织血管内皮生长因子A（VEGF-A）和中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）mRNA表达的影响。方法将54只大鼠随机分为假手术组（S组）、再灌注后模型组（M组）和PARP抑制剂组（P组），每组8只。比较各组大鼠右侧肾动脉缺血再灌注后2、6、12h后的血肌酐和尿素氮水平、肾脏组织病理学变化、肾组织PARP蛋白表达及肾组织VEGF-A和NGAI．mRNA表达。结果（1）M组各时间点的血肌酐、尿素氮水平均高于S组，P组各时间点血肌酐、尿素氮明显低于M组，差异均有统计学意义（P〈0．01）；（2）P组肾组织病理学表现较M组改善；（3）P组各时间点肾组织PARP表达明显低于M组，差异有统计学意义（P〈0．05）；（4）与M组相比，P组肾组织的VEGF-AmRNA的表达升高，NGALmRNA表达降低，有统计学差异（P〈0．05）。结论PARP抑制剂3AB对大鼠肾脏缺血再灌注损伤具有保护作用，可下调NGAL及上调VEGF-AmRNA表达。

聚ADP核糖聚合酶（PARP）在三阴乳腺癌分子靶向治疗的研究进展

三阴乳腺癌（TNBC）是以不表达雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）及人表皮生长子因子2受体（HER2）为特征的一类高度异质性乳腺癌。由于其特殊的生物学活性能力、极差的预后，因此TNBC一直是乳腺癌治疗中的难点。研究发现TNBC的发生发展与BRCA基因突变或缺失有着密切联系。

聚ADP核糖基聚合酶的抑制剂苯甲酰胺在肺癌细胞PG凋亡中的作用

研究了聚 ADP核糖基聚合酶 ( PARP)抑制剂苯甲酰胺 ( BA)在 DNA损伤所造成的肺癌细胞 ( PG)凋亡过程中的作用 .分别用 MNNG( N-甲基 -N′-亚硝基氮亚硝基胍 )和 BA,以及同时用 MNNG和 BA处理 PG细胞 ,然后用非放射性细胞增殖测定试剂盒和流式细胞仪测定 PG细胞的增殖活性和细胞凋亡的变化 ,并用免疫组化法检测细胞中 Bcl-2蛋白表达的变化 .结果表明 ,在 MNNG的作用下细胞的增殖活性受到明显抑制 ,细胞凋亡显著 ,Bcl-2蛋白低表达 .单独用 BA处理 PG细胞时 ,细胞的增殖活性、细胞凋亡数及 Bcl-2的表达与空白对照组相似 .用 BA和 MNNG共同处理 PG细胞时 ,细胞的增殖活性、细胞凋亡数及 Bcl-2的表达 ,与对照组细胞和 BA单独处理的细胞相比均无明显差异 .这说明 PARP对诱导细胞凋亡起重要作用 ,而且这种作用可被

山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1的作用机制

目的探讨山萘酚对脂肪酸诱导的胰岛微血管内皮功能损伤的保护效应及多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1(PARP-1)的作用。方法以小鼠胰岛微血管内皮MS-1细胞为研究对象,将细胞分为正常对照组、溶剂(DMSO)对照组、脂肪酸组(0.25mmol/L软脂酸+0.5 mmol/L油酸)、山萘酚组(50μmol/L)、脂肪酸+山萘酚组、PARP-1抑制剂(8μmol/L BYK204165)+脂肪酸组和PARP-1抑制剂+脂肪酸+山萘酚组,分别检测各组细胞活力、凋亡水平、一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及氧化应激相关指标的改变。结果脂肪酸处理后,MS-1细胞存活率下降,细胞凋亡率升高(P<0.05);同时,脂肪酸也增加了细胞内NO的含量,升高了总NOS(tNOS)、诱导型NOS(iNOS)和结构型NOS(cNOS)的活性(P<0.05);促使脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量增加,抗氧化物质谷胱甘肽(GSH)和超氧化物歧化酶(SOD)的水平下降(P<0.05);并增强了PARP-1、iNOS和cNOS的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05)。而山萘酚干预后,各项指标的水平均得以改善(P<0.05);而且,利用PARP-1抑制剂BYK204165预处理1h,山萘酚对脂肪酸的拮抗效应更为显著,各项检测指标与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论脂肪酸可直接引起胰岛微血管内皮功能损伤,而山萘酚具有拮抗脂肪酸毒性的作用,且抑制PARP-1的表达水平能增强山萘酚的保护效应。

子宫内膜癌聚ADP核糖聚合酶1表达与子宫内膜癌转移的关系

目的:探讨聚ADP核糖聚合酶1(PARP-1)在子宫内膜癌(EC)中的表达、预后作用,并利用体外方法研究了PARP-1对EC细胞中生物行为和相关信号通路及机制的影响.方法:收集2011-2016年本院采集石蜡包埋组织标本135份,包括75例EC、24例不典型增生和36例正常子宫内膜.采用免疫组化检测PARP-1在EC组织中的表达.体外实验中,构建PARP-1敲低的EC细胞模型.分别采用MTT和Transwell法测定细胞的增殖、迁移和侵袭,并通过western blotting检测上皮间充质转化(EMT)标记物和PI3K/AKT信号通路蛋白表达.结果:PARP-1在EC组的阳性表达率92%(69/75)显著高于非典型增生子宫内膜组70.83%(14/24)和正常子宫内膜组50%(18/36),并且PARP-1高表达与晚期、分化差和淋巴结转移有关.PARP-1高表达组的平均生存时间为49.4个月,明显低于PARP-1低表达组的59.4个月.多变量Cox回归分析显示PARP-1高表达是EC患者预后的独立危险因素.在Ishikawa细胞中抑制PARP-1表达后增殖能力降低,并且迁移和侵袭能力受到显著抑制.此外,下调PARP-1表达可以抑制EC细胞中的EMT过程并抑制PI3K-AKT信号通路.结论:PARP-1在EC的发生、发展和恶性行为中起重要作用,并且较高的PARP-1表达与EC患者的不良预后相关.

两种聚腺苷二磷酸核糖聚合酶1抑制剂对人肝癌细胞株HepG2增殖和凋亡的影响

目的观察聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)-1抑制剂AG-014699和AZD2281对人肝癌细胞株Hep G2细胞抑制作用和凋亡,初步探讨PARP-1抑制剂诱导Hep G2细胞凋亡的机制,为肝癌提供一种新的治疗靶点。方法 MTT实验观察不同浓度的AG-014699和AZD2281对Hep G2细胞增殖的影响,用流式细胞术检测Hep G2细胞凋亡率;Western Blot法检测casepase3和casepase8蛋白表达水平。组间比较采用t检验。结果 AG014699和AZD2281均有抑制Hep G2细胞增殖的作用,且具有时间和浓度依赖性,但Hep G2细胞对两种PARP-1抑制剂的敏感性不同,用MTT法检测48 h AG-014699和AZD2281的IC50分别约为20、400μmol/L。因AZD2281不敏感,未做流式细胞术和Western Blot法检测细胞凋亡。用10、30、50μmol/L的AG-014699能诱导Hep G2细胞凋亡,48 h时凋亡率最高达(31.00±2.13)%,明显高于对照组(0.900±0.013)%,二者差异有统计学意义(P<0.01)。30、50μmol/L的AG-014699作用Hep G2细胞48 h后的caspase3和caspase8蛋白水平相对于正常对照组显著增加。结论 PARP-1抑制剂AG-014699和AZD2281均能抑制Hep G2细胞增殖,但敏感性不同,AG-014699可诱导Hep G2细胞凋亡,通过上调caspase3和caspase8蛋白水平来诱导细胞凋亡。