葛根联合肉桂颗粒对小鼠前列腺增生作用研究

目的:探讨葛根联合肉桂颗粒对小鼠前列腺增生模型的影响。方法:将60只4周龄的雄性昆明种小鼠随机分为6组,分为高中低剂量的葛根联合肉桂颗粒组、对照组、造模组、空白组,除空白组外,其余小鼠手术去势7 d后,皮下注射丙酸睾酮5 mg/(kg·d),同时分别予不同剂量的葛根联合肉桂颗粒、保列治、生理盐水灌胃,持续3周后断颈处死小鼠,摘取前列腺后称重,通过计算前列腺指数(PI),HE染色后观察镜下前列腺形态学变化,免疫组化法检测前列腺FGF2,Ki67,TGF-β1蛋白的表达,ELISA法检测5α还原酶活性,TUNEL法检测凋亡指数,从而初步探讨葛根联合肉桂颗粒对小鼠前列腺增生模型的影响。结果:与造模组比较,各给药组小鼠前列腺湿重、指数均明显减小(P<0.05),FGF2,Ki67,TGF-β1蛋白表达、5α还原酶活性显著降低(P<0.05),细胞凋亡指数明显增高(P<0.05);中高剂量的葛根联合肉桂颗粒组与保列治对照组相比,各项指标无统计学差异(P>0.05)。结论:葛根联合肉桂颗粒可能通过降低5α还原酶活性,抑制FGF2,Ki67,TGF-β1蛋白表达,提高细胞凋亡,从而缩小小鼠前列腺的体积。

肉桂人参颗粒的含量测定、指纹图谱建立及差异标志物筛选

目的测定肉桂人参颗粒中4种主要成分的含量,建立指纹图谱,并筛选影响其质量的差异标志物。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定甘草酸铵、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛的含量,并同法建立10批肉桂人参颗粒的HPLC指纹图谱,采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 25.0、SIMCA 14.1软件进行聚类分析、主成分分析和正交偏最小二乘法-判别分析,以变量重要性投影(VIP)值大于1为标准筛选影响样品质量的差异标志物。结果含量测定的方法学考察均符合相关要求,10批样品中甘草酸铵、甘草苷、肉桂酸、桂皮醛的含量分别为1.8084~2.7700、1.1372~1.4814、0.0765~0.0918、0.1309~0.4784 mg/g。10批肉桂人参颗粒中共有16个共有峰,共指认了其中4个共有峰,分别为甘草苷(6号峰)、肉桂酸(10号峰)、桂皮醛(11号峰)、甘草酸铵(15号峰);相似度均大于0.95。聚类分析结果显示,10批样品可聚为3类,其中S3为一类,S1~S2、S4~S5、S10为一类,S6~S9为一类;主成分分析结果显示,前3个主成分的累计方差贡献率为91.918%,分类结果与聚类分析一致;正交偏最小二法-判别分析结果显示,有4个共有峰的VIP值大于1,分别为11号峰(桂皮醛)、15号峰(甘草酸铵)、6号峰(甘草苷)和9号峰。结论所建指纹图谱及含量测定方法准确度高、重复性好,可用于肉桂人参颗粒的质量评价;甘草酸铵、桂皮醛、甘草苷等成分可能是影响肉桂人参颗粒质量的差异标志物。

Effects of N-(3',4',5'-Trimethoxycinnamoyl) ortho-Aminobenzoic Acid on Antigen-induced Contraction of Guinea-pig Ileum and the Degranulation of and Histamine Release from Mast Cells

N-(3′,4′,5′-Trimethoxycinnamoyl)ortho-aminobenzoic acid(TOA),at the concentration of 80μg/ml,significantly inhibited the antigen-induced contraction of ileum isolated from the actively sensitized guinea-pig.At the concentrations of 25 and 50μg/ml, TOA inhibited homocytotropic antibody-mediated degranulation of mast cells in the rat mesentery,and also inhibited anaphylactic histamine release from rat peritoneal mast cells.

基于“温通心阳”功效的桂枝和肉桂配方颗粒对大鼠心肌缺血/再灌注损伤模型保护作用的实验研究

基于“温通心阳”功效平行观察桂枝配方颗粒(Cinnamomi Ramulus formula granules)和肉桂配方颗粒(Cinnamomi Cortex formula granules)对大鼠急性心肌缺血/再灌注损伤(myocardial ischemia/reperfusion injury, MI/RI)的保护作用及潜在机制。90只SD雄性大鼠按体质量随机分为假手术组(sham),模型组,桂枝与肉桂配方颗粒各自低、高剂量(0.5、1.0 g·kg^(-1))组,每组15只。造模前,各组大鼠每天灌胃给药1次,连续给药7 d, sham组和I/R组给予等体积生理盐水。末次给药1 h后,除sham组外,其余各组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支制备缺血30 min、再灌注120 min的MI/RI大鼠模型,假手术组大鼠仅穿针不予结扎,其余处理相同。考察桂枝和肉桂配方颗粒对MI/RI大鼠心肌功能、心肌梗死面积、心肌病理学和心肌超微结构的改变、心肌细胞凋亡、心肌损伤标志物及炎症因子的影响。RT-PCR法检测大鼠心肌组织中核苷酸结合寡聚化结构域样受体家族pyrin结构域蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor family pyrin domain protein 3, NLRP3)炎症小体、凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD, ASC)、切割型半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-1(cysteinyl aspartate specific proteinase-1, caspase-1)、Gasdermin-D(GSDMD)、白细胞介素-1β(interleukin-1β, IL-1β)和白细胞介素-18(interleukin-18, IL-18)等基因表达水平。Western blot法检测大鼠心肌组织中NLRP3、caspase-1、GSDMD和N-GSDMD等蛋白表达水平。桂枝和肉桂配方颗粒预处理均能明显改善MI/RI大鼠的心肌功能,减小心肌梗死面积,抑制心肌细胞凋亡,降低血清中乳酸脱氢酶(lactic dehydrogenase, LDH)、肌酸激酶MB同工酶(creatine kinase MB isoenzyme, CK-MB)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase, AST)和心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ, cTnⅠ)的含量。此外,桂枝和肉桂配方颗粒预处理能明显降低MI/RI大鼠血清中IL-1β、白细胞介素-6(interleukin-6, IL-6)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)水平。RT-PCR结果表明,桂枝和肉桂配方颗粒预处理能下调模型大鼠心肌NLRP3、caspase-1、ASC和下游细胞焦亡相关效应物质如GSDMD、IL-18和IL-1β的mRNA表达水平。Western blot结果显示,桂枝和肉桂配方颗粒预处理还可下调模型大鼠心肌NLRP3、caspase-1、GSDMD和N-GSDMD的蛋白表达。综上所述,桂枝和肉桂配方颗粒均对大鼠MI/RI具有明显的心肌保护作用,其机制可能与抑制NLRP3/caspase-1/GSDMD信号通路从而减轻心肌炎症反应有关。