引进“血清中和试验法效检肉毒梭菌(C型)灭活疫苗”的试验总结

肉毒梭菌 (C型 )灭活疫苗又称肉毒梭菌中毒症 (C型 )灭活疫苗。本品系用免疫原性良好的C型肉毒梭菌 ,接种于适宜的培养基 ,将培养物经甲醛溶液灭活脱毒后 ,加氢氧化铝胶制成。主要用于预防牛、羊、骆驼、水貂的C型肉毒梭菌中毒症。肉毒梭菌 (C型 )灭活疫苗的效力检验方法 ,长期以来一直采用传统的本动物攻毒法 ,不仅检验程序复杂 ,而且要使用大量的本动物 (羊 ) ,检验周期长、技术落后。而中国兽医药品监察所于近年内在研究梭菌干粉苗的过程中 ,研究出一种用“血清中和试验的方法代替本动物攻毒法”的效检技术 ,此项检验技术科学简便、容易操作、实用性强 ,而且检验成本可下降 75 %。对今后的检验工作具有一定的推动性和实用性。

C型肉毒梭菌毒素面团毒饵现场灭家鼠效果研究

本文首次报告用C型肉毒梭菌毒素灭家鼠效果研究。1991年12月至翌年4月,在济南市郊区农村,用该毒素液体制剂进行了8次灭家鼠效果试验。毒饵中除含量为0.02%和0.04%的2组试验的灭效较低外,含量为0.1～0.5%的6组试验灭效为84.52～99.12%。作者认为,C型肉毒梭菌毒素是一种具有良好发展前景的灭鼠药,可大面积推广应用。

仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的研制与应用

为了研制仔猪大肠杆菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗,将大肠埃希菌C83549(K88)、C83644(K99)、C83710(987P)菌株和C型产气荚膜梭菌C59-2菌株分别接种适宜培养基,提取大肠埃希菌纤毛和C型产气荚膜梭菌外毒素,灭活和脱毒后加入冻干保护剂,冷冻干燥制成冻干灭活疫苗。该疫苗性状为类白色海绵状疏松团块,无菌检验合格,疫苗对仔猪和怀孕母猪安全,怀孕母猪免疫该疫苗后所产仔猪对大肠埃希菌和C型产气荚膜梭菌的攻毒保护率均在80%以上。临床应用结果表明,该疫苗能明显提高免疫母猪的窝平仔猪成活数。

C型肉毒梭菌毒素应用于旅游点现场的灭鼠试验

笔者于１９９２年６月，在高气温（室外２３～３３．５℃、室内２０～２９℃）条件下，用Ｃ型肉毒梭菌毒素在北方某市两个旅游点进行灭鼠试验，灭效分别为９３．３５％和１００％。基饵为大米，毒素含量为３０００ＭＬＤ／ｇ。国内尚未见同类报道。

牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗的研制及免疫效果观察

采用我所分离并保存的对本地区牛羊肉毒梭菌病具有良好免疫原性的菌株Nb6514研制成功牛羊肉毒梭菌（C型）灭活苗。用免疫牛、羊血清作小白鼠体外中和试验来测定抗体效价，结果表明：结果显示，免疫10d的牛羊均可抗10个小鼠最小致死量／mL；30d分别可抗30~280和20~240个最小致死量／mL血清；180d达到高峰，分别可抗300~1600和200~1200个小白鼠最小致死量／mL血清；至550（一年半）仍可抗10个最小致死量／mL血清。结果表明研制的牛羊肉毒梭菌（C型）灭活苗具有良好的免疫效果，能有效预防牛羊肉毒梭菌（c型）病。

仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的效力和安全试验

将带有K88、K99和987P纤毛抗原的大肠埃希氏菌(Escherichia coli)菌株(C83549、C83644和C83710)和免疫原性良好的C型产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens type C)菌株(C59-2、C59-37和C59-38)第10代基础种子制备的原液进行浓缩、甲醛溶液灭活和脱毒后,按抗原含量,加氢氧化铝胶制成3批二联灭活疫苗。经过对免疫怀孕母猪所产仔猪的攻毒测定,得到疫苗最小的免疫剂量为每头2mL,确定使用剂量为每头4mL。疫苗的免疫攻毒试验结果表明,疫苗在怀孕母猪中采用颈部肌肉注射进行免疫,二次免疫才能使仔猪通过吮吸初乳获得80%以上的被动免疫保护能力,与单苗具有相似的免疫保护力;单剂量、单剂量重复和超剂量的安全性试验结果显示,3批二联灭活疫苗不会引起母猪的全身不良反应和明显的局部反应,无流产,胎儿发育完全正常。

牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗的保存期试验

对研制的牛羊肉毒梭菌(C型)灭活苗二批分别置于0℃-4℃冰箱或室温(15℃)条件下,存放,每年用小白鼠进行效力试验,观察疫苗保存期。结果表明疫苗置于0℃-4℃冰箱或室温(15℃)条件下,3年仍可达灭活苗的效价,保存期暂定为3年。

C型肉毒梭菌毒素灭家鼠效果观察

作者于１９９４年１１～１２月在安徽省枞阳县长沙乡，用Ｃ型肉毒梭菌毒素对黄胸鼠和褐家鼠进行实验室和现场灭鼠效果观察。用灌胃法测定对黄胸鼠最小致死剂量为６４０００ＭＵ／ｋｇ体重，对褐家鼠为３２０００ＭＵ／ｋｇ体重。０．５％Ｃ型肉毒梭菌毒素大米毒饵，初遇和再遇适口性摄食系数褐家鼠为０．８６和０．６２；黄胸鼠为０．７５和０．５４．０．５％Ｃ型肉毒梭菌毒素现场灭效，鼠笼法灭鼠率为１８．０５％，粉迹法为２５．９６％；０．００５％溴敌隆毒饵灭鼠率鼠笼法为７５．６６％，粉迹法调查为７７．９５％：两者差别非常显著（Ｐ＜０．０１）．表明Ｃ型肉毒梭菌毒素对黄胸鼠和褐家鼠毒力较小。

C型肉毒梭菌毒素冻干剂对高原鼠兔的灭效试验

目的试验100万毒价/mlC型肉毒梭菌毒素冻干剂对高原鼠兔的杀灭效果。方法采用田间试验,共设试验小区5个,小区面积均为3hm2。其中0.1%和0.15%浓度小麦毒饵各投放2个小区,另一小区作为对照投放0.1%水剂小麦毒饵。此外,设一面积为0.25hm2的空白对照区,以测定自然灭洞率。结果灭前试验区高原鼠兔平均密度为1071.4洞口/hm2。投饵后第6天浓度为0.1%的小麦毒饵平均校正灭洞率为96.7%,浓度为0.15%的毒饵平均校正灭洞率为97.4%。处理对照区的平均校正灭洞率为97.7%;各浓度间校正灭洞率差异无统计学意义。试验期间,在试验地及其周围500m地区未发现非靶标动物中毒死亡现象。但在长时间及大范围内,该药剂的安全性需更进一步的验证。结论肉毒梭菌毒素冻干剂与同效价水剂差异无统计学意义。

C型肉毒梭菌毒素现场灭家栖鼠效果研究

Ｃ型肉毒梭菌毒素现场灭家栖鼠效果研究徐仁权，祝龙彪，钱文祥，唐杏琴，须俊明，陆志勋Ｃ型肉毒梭菌毒素是广谱、高效、低毒、无残留的生物毒性蛋白灭鼠剂，不会造成环境污染。据资料报道，灭鼠效果较为满意［１，２］．赵承善（１９９２）［３］在山东首次报道用Ｃ型肉...

C型肉毒梭菌毒素对小白鼠LD_(50)测定及现场灭鼠效果观察

目的：观察Ｃ型肉毒梭菌毒素对小白鼠的ＬＤ５０及现场灭鼠效果。方法：毒力测定采用定量药液灌胃法；用粉迹法调查鼠密度，计算灭鼠率。结果：该药在２５℃、３０℃、３５℃放置４８小时，对小白鼠的ＬＤ５０分别为００８９１±００４７３、０１３６３±００５９７和０１７１２±００６５２ｍｌ／ｋｇ；现场试验，昼最高气温２０～２５℃，夜最低气温１５～１８℃，３个试点村的灭鼠率分别为９１０８％、８９４１％、８８０４％。结论：Ｃ型肉毒梭菌毒素的毒力甚强。

C型肉毒梭菌毒素对非靶动物的一次和二次中毒的实验研究

为有效控制鼠害，又不危及天敌的生存、保护生态环境，笔者应用Ｃ型肉毒梭菌毒素，进行了对非靶动物的一次和二次中毒的实验研究。１材料１１实验动物小白鼠，从兰州生物制品研究所引种，自繁自养；高原鼠兔及黄鼬，捕于甘南玛曲县黄河沿岸鼠害区；狗、猫，购于平凉市场...

C型肉毒梭菌毒素及其灭鼠效果

C型肉毒梭菌毒素(Botulin Type C)是由C型肉毒梭菌(Clostridium botulinum TypeC)产生的蛋白毒素,系目前已知最强的神经麻痹毒素之一。鼠类可因摄取含有C型肉毒毒素的毒饵引起纯粹的毒素性食物中毒至死。采用生物技术工业化生产天然蛋白的毒素用以灭鼠已取得好效果。1 肉毒梭菌1.1 肉毒梭菌的型别与毒素 肉毒梭菌在培养过程中。

仔猪大肠埃希氏菌、C型产气荚膜梭菌的灭活及脱毒方法研究

[目的]研究仔猪大肠埃希氏菌病、C型产气荚膜梭菌病二联灭活疫苗的质量及产品的安全性。[方法]对大肠埃希氏菌和C型产气荚膜梭菌浓缩菌液,用不同浓度甲醛溶液经不同灭活时间、灭活温度进行了灭活和脱毒试验。[结果]大肠埃希氏菌培养物在37～38℃条件下用0.4%的甲醛溶液灭活48h,可以使细菌全部灭活;C型产气荚膜梭菌培养物在37～38℃,采用0.5%～0.8%的甲醛溶液进行灭活和脱毒7～14d,或者采用2次灭活和脱毒方法,7d可以达到完全灭活和脱毒。[结论]在37～38℃条件下,用0.4%的甲醛溶液对大肠埃希氏菌培养物灭活和采用0.5%～0.8%的甲醛溶液对C型产气荚膜梭菌进行灭活和脱毒,可以达到理想效果。

C型肉毒梭菌毒素的稳定性研究

报道了保存肉毒毒素经常会遇到的某些因素对Ｃ型肉毒梭菌Ｃ６５１４培养滤液稳定性的影响观察结果。结果表明，提高环境温度及介质酸碱度、日光照射、激烈震荡都能使毒素的毒力下降。甘油或明胶磷酸盐缓冲剂对于保存Ｃ型肉毒毒素都是较好的活性稳定剂。含甘油或明胶磷酸盐缓冲剂的毒素在４℃下保存１２个月后，毒力的变动甚微。此二法都不需要特殊设备，材料易得，操作简便，比较实用。

红豆草草粉粒C型肉毒梭菌毒饵灭鼠效果试验

采用Ｃ型肉毒梭菌生化杀鼠剂配制的小麦、红豆草草粉粒毒饵毒杀高原鼠、兔。结果表明，７５０：１小麦毒饵小区灭洞率为９３．２％，红豆草草粉粒毒饵小区灭洞率为９５．７％；７５０：ｌ小麦毒饵大面积灭洞率为８９．８％，７５０：ｌ红豆草草粉粒毒饵大面积灭洞率为９３．５％。红豆草草粉Ｃ型肉毒梭菌毒饵对高原鼠、兔的灭效优于小麦Ｃ型肉毒梭菌毒饵，并具有灭效持久、稳定等特点。

家畜C型肉毒梭菌脱毒干粉苗研制及免疫效果观察

采用具有良好免疫原性的菌株Nb6514,成功研制牛羊C型肉毒梭菌脱毒干粉苗。用其免疫牛羊血清作小白鼠体外中和试验进行免疫效果和免疫期测定。结果显示:免疫组牛羊体重可抗62000个/kg小白鼠MLD(全部健活),而对照组牛羊按体重抗17500个/kg小白鼠致死量(全部死亡),试验证实,牛羊免疫后21d左右,即可产生坚强免疫力;免疫10d的牛羊均可抗10个小鼠最小致死量/ml血清;30d分别可抗28~260和18~220个最小致死量/ml血清;180d达到高峰,分别可抗300~1500和200~1100个小白鼠最小致死量/ml血清;至550(一年半)仍可抗10个最小致死量/ml血清,结果表明免疫期在一年以上。研制的牛羊C型肉毒梭菌脱毒干粉苗具有良好的免疫效果,能有效预防牛羊C型肉毒梭菌中毒症。

C型肉毒梭菌毒素杀灭高原鼠兔试验

有史以来,鼠类就与人类为敌。鼠类给人类带来的巨大灾难,绝不亚于其他自然灾旱,鼠患危害之烈,已受到全世界的普遍关注。夏河县草场高原鼠兔(Ochotona curzoniae Hodgson)危害面积达43.3万亩,占整个鼠害总面积的37.98％。由于高原鼠兔啃食牧草嫩茎、叶、花、种子及根茎,抑制了优良牧草的生长发育,减少了草场可利用面积。同时,高原鼠兔频繁活动,挖洞形成大片“黑土滩”。