肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ异常与脂代谢相关疾病研究进展

位于细胞线粒体内膜肉毒碱棕榈酰转移酶-Ⅱ(carnitine palmitoyl transferase-Ⅱ, CPT-Ⅱ),是脂肪酸氧化过程中起关键作用的限速酶。CPT-Ⅱ活性直接影响肉毒碱运送长链脂肪酸穿过线粒体内膜,进入基质进行β-氧化与能量产生。近来发现肝细胞CPT-Ⅱ活力低下与肝细胞脂肪堆集、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)及肝细胞的恶性转化密切相关。本文述评了CPT-Ⅱ与NAFLD等脂代谢相关疾病研究的进展。

新生儿期肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ缺乏症4例临床分析

目的探讨新生儿期肉碱棕榈酰转移酶Ⅱ(CPTⅡ)缺乏症的发生情况、临床特点,常规实验室检查、特异性生物化学检测的意义。方法回顾分析2008年4月至2012年5月佛山市妇幼保健院确诊4例CPTⅡ缺乏症患儿临床资料及诊治过程。结果 4例患儿均于新生儿期出现症状,表现为严重低血糖和严重心律失常、呼吸衰竭,短时间内抢救无效死亡,血串联质谱Aa18+Ac17分析C16增高或伴C14、C18增高、CO降低确诊本病。4例患儿入院时血糖分别为1.48 mmol/L、0.1 mmol/L、0.8 mmol/L和0.6 mmol/L;心律失常均表现为心率慢、心音低钝,心电图表现为房室传导阻滞,药物治疗无效。结论新生儿期CPTⅡ缺乏症发病率低,病情凶险,对可疑者宜早期采集标本行串联质谱检查。

脂肪酸代谢酶在坏死型高脂血症性急性胰腺炎大鼠肝脏组织中的表达及意义

目的:动态观察脂肪酸代谢及转移酶(SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36)在坏死型高脂血症性急性胰腺炎(HLP)大鼠肝脏组织中的表达并探讨其意义。方法:采用胰管内注射5%牛磺胆酸钠诱导高脂血症大鼠产生坏死型HLP大鼠模型。制模后第6、12、24h分别处死大鼠,每组6只大鼠。对照组仅建立坏死型急性胰腺炎大鼠模型。测定血清淀粉酶和胰腺组织病理学评分观察大鼠胰腺组织炎症程度。RT-PCR检测肝脏组织SCD-1、CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达;免疫组化检测肝脏组织SCD-1蛋白表达。结果:HLP组大鼠血清淀粉酶水平低于对照组;病理学评分示HLP组大鼠急性胰腺炎程度加重。RT-PCR和免疫组化分析示HLP组大鼠肝脏组织中SCD-1mRNA和蛋白表达显著低于对照组;RT-PCR检测示HLP组大鼠肝脏组织中CPT-Ⅰ和CD36mRNA表达略高于对照组。结论:HLP大鼠肝脏脂肪酸代谢及转移酶异常表达,加重了肝脏组织细胞内外的脂质代谢紊乱,是加重坏死型急性胰腺炎胰腺组织损伤的重要机制之一。

CPT Ⅱ基因F352C多态性与非酒精性脂肪性肝炎易感性的研究

目的:研究肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine Palmitoyltransferase Ⅱ,CPT Ⅱ)基因F352C多态性与日本高知地区非酒精性脂肪性肝炎(NASH)易感性的相关性。方法:提取日本高知地区45例肝活检证实的NASH患者和148例健康志愿者的外周静脉血,应用聚合酶链式反应(PCR)进行检测分析。结果:NASH组中A等位基因的频率显著高于正常对照组(P<0.01);NASH组中A/-基因型的频率显著高于正常对照组(P<0.01)。结论:CPT Ⅱ基因F352C多态性与NASH发生发展有显著相关性。

CPT-Ⅱ基因4号外显子质粒构建与变异分析

背景:肉毒碱棕榈酰转移酶Ⅱ(Carnitine palmitoyltransferase-Ⅱ,CPT-Ⅱ)位于细胞线粒体内膜上,是脂肪酸氧化过程中起关键作用的酶之一。目前关于流感病毒感染与CPT-Ⅱ基因变异尚未见报道。目的:构建CPT-Ⅱ第4号外显子(E4)表达质粒及其核苷酸变异分析。方法:从流感病毒感染2例患者外周血中提取DNA,以PCR法扩增CPT-Ⅱ基因的第4号外显子,将其片段插入pGEM-T载体,以T4DNA连接酶,构建T-CPT-ⅡE4,转化大肠杆菌DH5α细胞,增菌,制备质粒,EcoRI酶切、测序和变异分析。结果与结论:成功构建重组表达质粒pGEM-T-CPT-ⅡE4,经DNA测序,证实质粒中插入CPT-Ⅱ第4号外显子完整序列,全长1305个核苷酸,编码435个氨基酸;与Genebank源序列对照比较,发现含有两个变异位点:1618(GTC→ATC)和1858(TTT→TCT),对应氨基酸为V368I和F448L。